hMLHl、hMSH2及PCNA在宫颈癌组织中的表达及意义

2009-09-18 09:50王秀莹等
中国当代医药 2009年10期
关键词:免疫组织化学宫颈癌

苏 红 李 梅 王秀莹等

[摘要]目的:探讨宫颈癌中错配修复基因hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白表达的关系及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测68例宫颈癌中的bMLHl、hMSH2及PCNA蛋白表达。结果:①宫颈癌中,hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白阳性表达率为57.35%、58.82%及72.06%。②在PCNA阳性表达和阴性表达的宫颈癌病例中,hMLHl阳性表达率分别为61.22%和47.37%,hMSI-12阳性表达率分别为67.35%和36.84%。PCNA与hMSH2表达呈正相关(P<0.05)。结论:hMSH2可能通过与PCNA蛋白相互作用参与宫颈癌的发生。

[关键词]宫颈癌;hM_LHl;hMSH2;PCNA;免疫组织化学

[中图分类号] R737.3 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2009]05(b)-011-02

宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,其发病机制目前仍不清楚。研究表明,由于体内外各种因素的刺激造成的DNA损伤是其发展的重要原因。人体细胞存在DNA错配修复(DNA mismatch repair,MMR)系统,错配修复功能的完整是细胞DNA准确复制和基因组稳定的基本保证。该功能缺失与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关,但其在子宫颈癌发生中的作用尚不清楚。hMLHl和hMSH2是错配修复系统的2个重要成员。增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen。PCNA)与细胞DNA合成密切相关。本研究通过免疫组织化学法检测68例宫颈癌的hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白表达,探讨宫颈癌中PCNA表达与hMLHl、hMSH2表达的关系及意义。

1资料与方法

1.1一般资料

选取大连妇产医院2000~2002年收治的68例宫颈癌手术病例。患者年龄为22~78岁,中位年龄40岁。所有标本均经4%中性甲醛固定,石蜡包埋,制成3~μm切片,HE染色,由两位有经验的病理医师进行病理学诊断。

1.2试剂与方法

采用免疫组织化学SP法染色,切片常规脱蜡水化,微波加热抗原修复,鼠抗人单克隆抗体hMLHl(1:50稀释,美国Zymed Laboratories公司,克隆系:14)、鼠抗人单克隆抗hhMSH2(1:250稀释,美国Zymed Laboratories公司,克隆系:FEll)、PCNA(1:400,克隆系:pc 10,美国NeoMarker公司)40cC孵育过夜,操作按SP试剂盒(北京中山生物技术有限公司)说明书进行。以PBS代替一抗作为阴性对照。选取已知阳性的切片作为阳性对照。

1.3结果判定

hMLHl、hMSH2以细胞核或细胞浆内出现棕黄色颗粒的细胞为阳性细胞,PCNA以核内出现棕黄色颗粒细胞为阳性细胞,计数5个高倍视野或500个细胞。对hMLHl、hMSH2判定:阳性细胞数与实质细胞总数之比≥10%,判为阳性表达,否则为阴性表达。PCNA判定:阳性细胞数与实质细胞总数之比>20%为阳性表达,否则为阴性表达。结果均由两位有经验的病理医师采用双盲法判定。

1.4统计学方法

采用)(2检验,应用SPSSl3.0软件对结果进行统计学分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白在宫颈癌中的表达

在宫颈癌中,hMLHl、hMSH2及PCNA蛋白阳性表达率分别为57.35%(39/68)、58.82%(40/68)及72.06%(49/68),见图1、2。

2.2 PCNA与hMLHl、hMSH2蛋白在宫颈癌中的表达关系

在PCNA阳性表达与阴性表达的宫颈癌病例中,hMLHl阳性表达率分别为61.22%和47.37%,hMSH2阳性表达率分别为67.35%和36.84%。PCNA阳性表达病例中,hMLHl、hMSH2表达率均较高,但PCNA表达与hMLHl表达无显著相关关系(P>0.05)。PCNA与hMSH2表达显著相关(P<0.05)。见表1。

3讨论

MMR基因是高度保守的看家基因,其功能完整保证了DNA复制的高保真性。突变或启动子甲基化能够通过减少或抑制该类基因表达,使机体错配修复功能缺失,从而引起整个基因组的不稳定以至肿瘤发生。hMLHl、hMSH2是MMR系统的重要成员,其编码蛋白的主要功能是识别DNA错配并结合错配碱基,启动修复反应。许多恶性肿瘤的发生伴随着错配修复蛋白结构或功能的异常,常表现为hMLHl、hMSH2蛋白表达的减少或增多。如大肠癌,常出现因错配修复基因突变或甲基化引起的蛋白表达减少。但有些恶性肿瘤,却常出现hMLHl、hMSH2蛋白表达增多。本研究宫颈癌组织中,hMLHl、hMSH2蛋白阳性表达率为57.35%、58.82%,也有较高表达。

有学者认为增殖细胞核抗原在宫颈癌组织中其阳性率显著增高,肿瘤细胞过度增殖时会伴有DNA碱基错配增多,从而引起细胞错配修复蛋白合成代偿性增多。PCNA在细胞增殖的启动上起重要作用。不溶性PCNA较稳定,其量的变化与DNA合成一致,检测其在细胞中的表达,可作为评价细胞增殖状态的一个指标。

由于恶性细胞增殖旺盛,DNA复制频繁且紊乱。DNA复制过程中出现错配的概率大大增加,hMLHl、hMSH2蛋白代偿性的表达上调以启动错配修复反应进行。还有研究表明PCNA参与错配修复反应。本研究发现宫颈癌中PCNA与hMSH2表达呈正相关也支持上述观点,提示错配修复蛋白与PCNA相互作用在宫颈癌发生中起重要作用。

猜你喜欢
免疫组织化学宫颈癌
液基细胞学检查对宫颈癌前病变及宫颈癌临床筛选的临床价值
宫颈癌护理及心理护理对宫颈癌患者治疗依从性的影响
如何选择不同效价的宫颈癌疫苗?
宫颈小细胞神经内分泌癌6例临床病理分析
婴幼儿肌纤维瘤病临床病理学观察及文献复习
凋亡相关基因PDCD5在胃癌组织的表达及临床意义
宫颈癌疫苗作用有多大
乳腺浸润性微乳头状癌44例临床病理分析
非小细胞肺癌中E—cadherin、β—catenin和CXCR4蛋白表达及意义
高迁移率蛋白1(HMGB1)在宫颈癌中表达及其意义