HBsAg胶体金法快检在无偿献血中的应用

于海忠 刘 静

我国是乙肝病毒感染最严重的国家之一。据卫生部疾病控制中心在1991～1994年组织全国30个省6.7万人的调查，乙肝的流行率为57.63%[1]。现在血站都是采血前对无偿献血都进行乙肝快速检测，为了更好地开展无偿献血、减少不合格血液的采集，对无偿献血者进行乙肝胶体金法快检。

1 材料与方法

1.1 标本

自2008年1～7月瓦房店市采血屋无偿献血者500人份。年龄18～55岁。

1.2 试剂

乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（胶体金法）由英科新创（厦门）科技有限公司提供。HBsAg酶免试剂盒分别由英科新创（厦门）科技有限公司、北京科卫临床诊断试剂有限公司提供。试剂均在有效期内使用。操作及结果判定按使用说明书。

1.3 检测仪器

深圳雷杜生命股份有限公司RT-6000酶标仪，深圳雷杜生命股份有限公司RT-3000洗板机。

1.4 检测方法

经胶体金法HBsAg检测的无偿献血者，采集血液，并留取血样待测，对同一份标本分别采用上海科华和英科新创ELISA法试剂盒进行HBsAg再检。若其中一厂家试剂判定结果为HBsAg阳性，而另一厂家试剂为阴性，则对该血样用前厂家ELISA法试剂再次双孔重复试验。若结果一致，且S/oD≥1时，判定为HBsAg为阳性。

2 结 果

在胶体金法检测的500份标本中，阴性数为452份，阴性率为90.4%，阳性为48份，阳性率为9.6%；ELISA法复检中阴性为451份，阴性率为90.2%，阳性为49份，阳性率为9.8%。胶体金法漏检率为0.2%。胶体金法检测的HBsAg阳性经ELISA法检测均为阳性。

3 讨 论

无偿献血是血站收集血液的主要途径，然而这种采血方式受到无法常规初检的限制，产生一定比例的不合格血液，其中乙肝表面抗原阳性是一个主要因素[2]。应用HBsAg快速检测对无偿献血者进行初筛检查，经ELISA法再检后的统计资料表明，500份胶体金法初筛合格血样HBsAg阳性率为1.07%。正常情况下HBsAg人群阳性率在10%左右。通过上述结果可以看出快速初筛后的样本经ELISA法初复检HBsAg结果基本是一致的。因此应用胶体金法对血液进行初筛简单易行、经济实用、效果良好，避免了血源的浪费，并且具有较高的信度和效度[3]。胶体金法原理：采用胶体金免疫技术，在醋酸纤维素膜上预包被金标抗HBsAg单抗（Au-sAb1），硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗HBsAg单抗（Au-sAb2）和单抗鼠IgG。检测时，样本血清中HBsAg可与胶体金-抗体结合形成复合物，由于层折作用复合物沿纸条向前移动，如为阳性标本，则与检测线预包被的抗体结合形成“Au-sAb1-HB-sAg-sAb2”夹心物而凝集显色。并且因为检测纸条上有滤过膜的存在，可以有效地组织红细胞的通过，因此检验时不需要分离血清直接使用全血进行即可。

与ELISA法相比，胶体金法具有以下优势：①检验时可直接应用全血，无需分离血清，从采集指血标本到出检测结果，只需3～5min，快速方便，阳性率高；②试纸法操作步骤简单，对检测设备要求低，肉眼可直接观察结果，省时、省财、省力，又避免了复杂步骤过程中污染的可能；③试剂保存比较方便，可在室温储存；④可单分检测，快速，又避免资源浪费；⑤价格低廉。基于以上优点，在实际操作中一方面达到了有效检测血液质量的目的，同时也节省了献血者的等候时间，值得在献血屋和流动采血车采血时应用和推广。但应用胶体金法对血液进行快速初筛不能代替正规的血液检验，不能完全排除假阳性或假阴性，灵敏度和特异性均有待于进一步提高[4，5]。

胶体金法检测存在一定比例的假阳性和假阴性，究其原因可能有：①试剂的灵敏度，全血胶体金法试剂的灵敏度为1ng，而ELISA法试剂的灵敏度可达0.5ng，因此导致了一定程度的假阴性的出现。②献血者人数较多时，操作人员为缩短检测时间而未严格按照要求操作，因此造成检测线不明显的弱阳性漏诊。③实验人员加样过多或过少，检测纸条变质等因素导致检测结果不准确。④少数标本可能存在乙肝肝炎病毒（HBV）变异或亚型而不易检出。⑤高温、干燥、风吹均能影响实验结果。因此，我们在做HBsAg快速检测时，应该严格按照操作规程进行操作。

[1] 高寿征.病毒性肝炎防治研究[M] .北京:北京出版社,1992:11.

[2] 孟宪军,史志旭徐州市无偿献血初检复检结果分析[J] .中国输血杂志,1996,9(4):212.

[3] 肖甫星译.输血技术手册[M] .北京:人民卫生出版社,1999:265-266.

[4] 陈均.全血胶体金法快速筛查非固定采血点HBsAg的初探[J] .中国输血杂志,2000,13(13):198.

[5] 许倩.HBsAg检测的胶体金法与ELISA法效果比较[J] .中外医疗,2008,27(13):107.