Etest法与标准琼脂稀释法测定黄杆菌药敏试验结果比较

(献县人民医院，河北献县 062250)

黄杆菌属包括脑膜炎败血症黄杆菌、产吲哚黄杆菌和芳香黄杆菌，可引起多种人类侵入性感染，采用有效抗生素进行及时有效的抗菌治疗非常必要。2006年 9月 ～2008年 6月，我们对Etest法与标准琼脂稀释法测定黄杆菌药敏试验的结果进行了比较。现报告如下。

材料:100株黄杆菌，其中 39株脑膜炎败血症黄杆菌，56株产吲哚黄杆菌，5株芳香黄杆菌;哌拉西林、米诺环素、头孢噻肟、头孢他啶、氧氟沙星、环丙沙星、氨曲南、亚胺配能、阿米卡星共 9种抗菌药物的标准粉剂;Etest试纸条购自AB生物试剂公司;质控菌株由河北省临床检验中心提供，包括金黄色葡萄球菌，美囯标准菌株收藏中心 ATCC 29213，大肠埃希氏菌 ATCC 25922，绿脓假单胞菌 ATCC 27853。

方法:根据国际临床实验室标准化委员会制定的规则，以抑制微生物可见生长的最低浓度确定为最小抑菌浓度，用琼脂稀释法测定。Etest法操作按照说明书进行，9种 Etest试纸条抗菌浓度范围:哌拉西林、头孢噻肟、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星、米诺环素为 0.016～256μg/m l;亚胺配能、氧氟沙星、环丙沙星为 0.002～32μg/ml。 Etest法测定的最小抑菌浓度在 2倍稀释度之间的，均归结于下一个 2倍稀释度值;琼脂稀释法测定的最小抑菌浓度大于 128μg/m l和 Etest法测定的最小抑菌浓度大于 256μg/ml者，均认为最小抑菌浓度为 256μg/ml。Etest法所测结果必须与琼脂稀释法测得的最小抑菌浓度符合率大于 90%;Etest法和琼脂稀释法测得的抗生素的最小抑菌浓度必须在 3种质控菌株参考范围内，且这 2种方法测得的最小抑菌浓度差异必须在上下两个稀释度之间。

结果:Etest法和琼脂稀释法测得各抗菌药物的最小抑菌浓度见表 1。显示 2种方法测定哌拉西林的最小抑菌浓度值有统计学差异(P＜0.05)。除米诺环素外，其他抗菌药物抑制黄杆菌的能力都有限。对于头孢噻肟、头孢他啶、阿米卡星、米诺环素、氧氟沙星、环丙沙星，用这 2种方法测得的最小抑菌浓度一致性可以接受。所有药物用这 2种方法测得的最小抑菌浓度的符合率为 93%。

表1 2种方法测定各抗生素对黄杆菌的最小抑菌浓度比较(μg/m l)

讨论:测定抗菌药物的敏感试验方法很多，其中纸片扩散法最常用，但其测定结果与标准琼脂稀释法存在显著差异。标准稀释敏感试验用来测定治疗黄杆菌感染的药物最小抑菌浓度，既费力又费时;肉汤微生物稀释药敏法在大多数基层医院因缺少相应的设备目前还无法普及。Etest法在20世纪末已被证明可以代替标准琼脂稀释法测定抗菌药物的最小抑菌浓度。本研究结果显示，哌拉西林、氧氟沙星和环丙沙星可作为治疗黄杆菌感染的首选药物。据报道，Etest法测定哌拉西林的最小抑菌浓度值，56%的菌株比琼脂稀释法高;氧氟沙星和环丙沙星的最小抑菌浓度值，26%的菌株比标准琼脂稀释法低。提示Etest法的测定结果可能存在种类差异。本研究 9种用于测定大肠杆菌最小抑菌浓度转化点的菌株被用来测定黄杆菌时，除哌拉西林外，其他任何药物用这 2种方法测定的最小抑菌浓度值无统计学差异。因此，我们建议除哌拉西林外，Etest法用于测定抗菌药物对黄杆菌的敏感性是可以接受的首选方法。在测定哌拉西林的敏感性时，如果 Etest法测得的最小抑菌浓度为 ＜128μg/m l时，应换用另外一种方法重新检测。