溴氯海因对几种病原真菌的室内毒力试验及田间药害试验

谢刚 ，刘雨华 ，朱宏建 ，高必达 ﹡

（1.湖南农业大学生物安全科学技术学院，湖南长沙 410128；2.湖南生物机电职业技术学院招生就业处，湖南长沙410127）

溴氯海因 （1-溴-3-氯-5.5-二甲基乙内酰脲，简称BCDMH）是近期发展起来的高效、广谱、快速安全的新型氧化型消毒剂，可用于水产养殖业中各种疾病的预防和治疗，还可用于游泳池消毒、水果保鲜和工业用循环水灭藻及日常生活消毒等[1-3].溴氯海因消毒杀菌，主要是通过它在水中水解产生次溴酸发挥作用.次溴酸将硫基氧化为过硫键，氨基氧化为肼或肟醚，作用于微生物的细胞壁，使其通透性增加，细胞中的蛋白质与核心物质漏出，DNA双链发生断裂，从而使细胞死亡[4-6].溴氯海因具有强烈杀灭真菌、细菌及病毒的功效[7]，但尚无在植物保护领域应用的报道.为探讨溴氯海因在植物病害防治上应用的可能性，笔者进行了溴氯海因对几种植物病原真菌的室内毒力测定及田间药害试验.

1 材料与方法

1.1 材料

辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici Leonian)、辣椒炭疽病菌（Colletotrichum capsici）、水稻纹枯病菌 （Rhizoctonia.solani Ktihn）、 水稻稻瘟病菌(Magnaporthe grisea).均由湖南农业大学植物病理学实验室提供；供试水稻、辣椒植株均由湖南农业大学植物病理学研究基地提供；16%溴氯海因由湖南省海洋生物工程有限公司提供.培养基均采用PDA培养基.

1.2 方 法

供试菌株培养.用PDA培养基分别接种辣椒疫霉病菌、辣椒炭疽病菌、水稻纹枯病菌、水稻稻瘟病菌，试验前纯培养物在温箱内 (28℃)培养5 d，至菌落接近完全覆盖培养平板，备用.

1.2.1 培养平板抑菌试验

在超净工作台上，取16%溴氯海因1 g，放入49 mL无菌水的150 mL三角瓶中，振荡摇匀，用无菌移液管吸取药液分别配制成100、200、400、800倍药液，充分摇匀后倒入PDA培养基（55℃左右）中，使稀释倍数分别为2 500、5 000、 10 000、 20 000、 40 000， 摇匀， 制成平板，并设清水空白对照（CK）.待培养基冷却后，用7 cm无菌打孔器在纯培养的病原菌上打成菌饼，倒置移放到含有药液的平板中央.每个病原菌每个浓度重复3次.静置1 h后放入温箱，28℃下培养5 d.用十字交叉法测量抑制菌圈直径.

1.2.2 田间药害试验

取16%的溴氯海因分别配制成250、500、1 000倍水溶液，摇匀后装于喷雾器具中，均匀喷洒于供试水稻和辣椒叶片，每个浓度分别处理植株5株，另设清水对照，3 d后观察结果.

2 结果与分析

室内毒力试验表明，16%溴氯海因对4种病原真菌均有一定的抑制作用，当稀释到2 500倍时，对稻瘟病菌、稻纹枯病菌、辣椒疫霉病菌、辣椒炭疽病菌的抑制率分别达到88%、100%、93%、78%，其EC50值对稻纹枯病菌为60，抑制效果最佳.

表1 溴氯海因对4种真病原菌的室内毒力

田间药效试验表明,16%溴氯海因稀释至250倍时，在水稻叶片上产生明显的褐色斑点，药害现象较为明显，至1 000倍时，没有药害症状.辣椒对溴氯海因水溶液不敏感，3个浓度与清水对照比，无明显区别.

3 讨论

溴氯海因对4个病原真菌的室内毒力试验，结果表明，在同一稀释倍数2 500倍下，对纹枯病菌的抑制效果最好，达100%，对辣椒炭疽病菌抑制效果最差，只有78%;而从对稻纹枯病的抑制效果来看，其EC50值为60，和井冈霉素相比，尚有一定的差距[8].美国麦科伊[9]认为,在氧化型杀菌剂中最具实用价值的是溴氯海因，因此在植物病害防治方面的应用，有待于进一步研究.笔者在试验中发现,此药剂粉剂剂型很难溶于水，可能限制了作用效果.有试验表明,添加少量的助溶剂可明显改善溴氯海因的杀菌能力，含0.1%助溶剂的溴氯海因（3 mg/L）对大肠杆菌的杀灭率为99.91%，无助溶剂时的杀灭率为96.48%,同时加入表面活性剂，能使有效溴氯更好地与菌体接触、黏附，提高其药效和速度[10].因此改变药剂剂型可能会提高防治效果.

[1]Yasuhara Yoshiharu,Hasegawa Kazuhiro,Tanaka Kazunari,et al.Method and apparatus for disinfecting drainage with bromine and iodine disinfectant[P].Wo:2000018689,2000-08-06.

[2]Budavaris，Maryadlele J，Neil O，et al，The Merck Index:An Encyclopedia of Chemcals，Dlogicals (12th ed)[M].Whiehouse Station，N J:Merck＆Co.，Inc,1996:518-519.

[3]熊永忠，万文英，杨林.一种新的消毒剂——溴氯海因[J].畜牧兽医科技信息，2005（1）：56.

[4]刘继敏，赵勇.溴氯海因杀灭微生物效果与稳定性的试验观察[J].中国消毒杂志，2001（18）：218-222.

[5]陈荣凤，薛广波.二溴二甲基乙丙酰脲消毒机理的实验室研究[J].南方护理学报，2002（9）：69-71.

[6]李焰，陈祖兴.新型二溴二甲海因复合保鲜剂的研制[J].精细化工，2001（18）：307-309.

[7]陈强，李清禄.复方溴氯海因消毒剂的性能[J].福建农林大学学报，2003（6）：225-229.

[8]张穗，郭永霞.井冈霉素A对水稻纹枯病菌的毒力和作用机理研究[J].农药学学报，2001，12:31-37.

[9]麦科伊J W.冷却水的化学处理[M].麦王筠,译.北京：化学工业出版社，1981:93.

[10]秦娟，崔群，朱跃钊，等.溴代海因水溶液制剂及杀菌效果研究[J].南京工业大学学报，2005：27（4）：22-26.