猪链球菌病的诊治

张海容

(1.德州学院农学系,山东 德州 253023;2.德州兔业工程中心,山东德州253023)

猪链球菌病在我国已流行多年,2008年下半年,兰州市许多养猪场暴发了以发热、关节肿胀、败血症和神经症状为特征的急性传染病,通过对疑似链球菌病料进行病原分离鉴定及药敏试验等,现已确诊为猪链球菌病,经采取综合防治,病情已得到控制。报告如下。

1 临床诊断

根据发病情况、临床症状和病理变化做出初步诊断。

2 实验室诊断

来自兰州市4个猪场的疑似链球菌病料1#、2#、3#、4#。病猪的肝、肺 、脾、肾 、脑和关节液 ,进行革兰染色镜检,然后分别接种鲜血琼脂平板37℃需氧培养24h,挑取可疑菌落革兰染色镜检,然后挑取单个菌落再接种鲜血琼脂平板,纯化后放置4℃,冷藏备用。

取单个保存好菌落分别在普通琼脂平板、鲜血琼脂平板、麦康凯琼酯平板,37℃培养24h后观察。同时取分离菌株接种10%鸡血清的肉汤,37℃培养48h。取血清肉汤中的絮状沉淀物抹片,分别革兰染色,并镜检。将分离的菌株接种到pH9.6肉汤中,经 60℃、30min后移植到鲜血琼脂平板,接种pH9.6的葡萄糖肉汤、6.5%的NaCl肉汤中。

生化试验：取上述分离菌血清肉汤培养物1#、2#、3#、4#,分别接种蔗糖、山梨醇、葡萄糖、甘露糖、乳糖、马尿酸钠及淀粉培养基,37℃培养24h,观察对糖的利用情况,全部重复3次。

动物感染试验：将分离菌株24h血斜面用灭菌的生理盐水适当稀释,配成悬浊液,腹腔注射4只健康小鼠,接种量0.3mL/只,另外 4只作对照,注射同剂量的生理盐水,观察结果。

药物试验：采用纸片扩散法,取分离菌的血清肉汤培养物,涂布于鲜血琼脂平板,37℃培养24h,观察结果。结果按抑菌圈直径大小和各抗菌药具体标准,评定为高度敏感、中度敏感或耐药。

3 试验结果

3.1 病料及分离物涂片革兰染色后镜检,4个养猪场的疑似病料中含有大量的革兰阳性单在、呈双或链状排列的球菌。

3.2 培养特性和生理特性 37℃培养24h后,在鲜血琼脂平板肉汤中形成大量圆形不透明、表面光滑隆起的灰白色直径为1～2μm小菌落,菌落β-溶血。在普通平板和麦康凯培养基上,单个菌落生长贫瘠。10%鸡血清肉汤中培养48h,可见管底形成絮状沉淀,上液清亮,无菌膜和菌环。染色镜检见大量革兰阳性单在、呈双或链状排列的球菌。在pH9.6肉汤经30min、60℃后移到鲜血琼脂平板仍能生长,在pH9.6葡萄糖肉汤中生长表现上液清亮,而管底有絮状沉淀,6.5%NaCl肉汤中生长状况为均匀混浊。

3.3 生化试验鉴定结果 见表1。

表1 分离链球菌的生化试验鉴定结果

表2 药敏试验结果

表1表明分离的1#、2#、3#、4#菌生化反应结果均符合猪链球菌生化特性,说明分离菌均为猪链球菌。

3.4 动物感染试验结果 小鼠注射病原菌第4天开始死亡,死亡小鼠皮肤发绀,剖检肝、脾、肺、心出血,注射部位有直径0.9～1.1cm脓肿,脓汁呈黄绿色。对照均未见死亡,从死亡小鼠肝脏重新分离到革兰阳性单在、呈双或链状排列球菌。表明分离的菌株对小鼠有致病性。

3.5 药敏试验结果 见表2。

表2表明,敏感的药物依次是：头孢菌素、环丙沙星;中度敏感的是：青霉素和卡那霉素;而对土霉素、链霉素、庆大霉素具有抗药性。此为临床用药提供了科学依据。

4 综合防治

4.1 预防 病猪隔离治疗,带菌母猪尽可能淘汰。污染的用具和环境用3%来苏儿液或1/300的菌毒敌彻底消毒。急宰猪或宰后发现可疑病变的猪胴体,经高温处理后方可食用。

清除猪圈和饲槽等处的尖锐物体及可能引起外伤的物体。新生的仔猪无菌结扎脐带,并用碘酊消毒。

免疫接种疫苗：每头肌肉注射2～3头份,4周后加强1次。

4.2 治疗 根据药敏结果选择高敏药物治疗。对淋巴结脓肿,待脓肿成熟及时切开,排除脓汁,用3%双氧水或0.1%高锰酸钾液冲洗涂以碘酊。环丙沙星治疗,每千克体重用 2.5～10.0 mg,每12h注射1次,连用3d。对败血症型及脑膜脑炎型应早期大剂量使用抗生素。青霉素每头每次40万～100万IU,每天肌肉注射2～4次;革庆增安注射液,每千克体重0.1mL,肌肉注射,每日2次,也有好的疗效。为巩固疗效,可连续用药5d以上。有明显发热症状,用退热剂退热,体质虚弱的,注射维生素C,全群口服抗生素;每吨饲料加入200g阿莫西林或500g土霉素,连用7d以防继发感染。