光合细菌菌剂在提高板蓝根品质中的应用研究

李 军 ，张 辉 ，李建文 ，白红娟 ，杨官娥

1.山西医科大学药学院，山西太原 030001；2.中北大学化工与环境学院，山西太原 030051

光合细菌菌剂是一种生物肥料[1-3]，它是以自配培养基为原料、活性光合细菌为菌种，经现代生物工程技术研制而成的一种复合性生物肥料。具有生物固氮，分解硫化物、农药、化肥等多种有毒有害物质的能力[4]，可有效降解土壤中的农药残留、H2S、过剩氨氮等，无污染无公害，净化土壤，促进根系发育，是良好的土壤调节剂[5]。多年在农作物上的应用表明，光合细菌菌剂对于促进农作物的生长发育、提高产量、防治病虫害、改善品质、降低硝酸盐含量等都有明显的功效。

本文将光合细菌菌剂用于板蓝根的种植。以大青叶中靛玉红的含量和板蓝根中醇溶性浸出物的含量来考察光合细菌菌剂对提高板蓝根品质的影响[6-8]。为光合细菌菌剂在中草药种植中的应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 仪器

SHZ-III电热恒温水浴锅 （上海贺德实验设备有限公司）；AR1140电子分析天平 （奥豪斯国际贸易有限公司）；RE52-98型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；DHG202型电热干燥箱（山东淮坊医疗器械厂）；LC-10ATvp高效液相色谱仪（日本岛津）。

1.2 试剂与药材

1.2.1 试剂 靛玉红对照品（中国药品生物制品检定所，批号717-200204）、氯仿（分析纯，天津市化学试剂一厂）、甲醇（分析纯，天津市化学试剂一厂；批号：990120）、无水乙醇（天津市风船化学试剂科技有限公司，分析纯；批号：20101208）。

1.2.2 药材 没有使用光合细菌菌剂的板蓝根、大青叶药材，使用1：1稀释光合细菌菌剂培育的板蓝根、大青叶药材；药材产地：山西陵川，经山西医科大学中药学教研室白云娥副教授鉴定为十字花科植物菘蓝的地上和地下部分，即大青叶（Folium Isatidis）和板蓝根（Radix Isatidis）。

1.3 方法

1.3.1 大青叶中靛玉红的含量测定 ①供试品溶液的配制：取大青叶的细粉0.25 g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿浸泡15 h，加热回流提取至提取液无色。回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至100 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得[9]。②对照品溶液的配制：精密称取靛玉红对照品0.002 1 g，加甲醇制成每1 ml含2.1 μg的溶液。③测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。[色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（75∶25）为流动相；检测波长为289 nm。理论板数按靛玉红峰计算，应不低于4 000]。

1.3.2 板蓝根浸出物含量测定 按照2010年版《中国药典》一部醇溶性浸出物测定法 （附录XA）项下的热浸法测定，用45%乙醇做溶剂。方法：取供试品2～4 g，精密称定，置100～250 ml的锥形瓶中，精密加45%乙醇50～100 ml，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用45%乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量（%）（此处方法后的内容为新加内容，在实验中精密加45%乙醇60 ml）。

2 结果

2.1 大青叶中靛玉红的含量测定

通过3批样品的测定表明，未使用光合细菌菌剂的大青叶中靛玉红的含量为0.11 mg/g，使用光合细菌菌剂的大青叶中靛玉红的含量为0.26 mg/g，增加了136.4%。对照品及样品HPLC图谱见图1～3。

2.2 板蓝根浸出物含量测定

由表1可知，板蓝根中醇溶性浸出物含量由42.2%增加为47.2%，提高了11.8%。

表1 板蓝根中醇溶性浸出物含量测量结果

3 讨论

按照2010年版《中国药典》一部规定，大青叶中靛玉红含量不少于0.2 mg/g。本文中未使用光合细菌菌剂的药材靛玉红含量只有0.11 mg/g，通过应用光合细菌菌剂使大青叶中靛玉红含量增加为0.26 mg/g，增加了136.4%。说明光合细菌菌剂可以提高大青叶的品质。按照2010年版《中国药典》一部规定，板蓝根中浸出物的含量不少于25.0%。通过应用光合细菌菌剂使板蓝根中浸出物含量提高了11.8%，说明光合细菌菌剂可以提高板蓝根的品质。

本研究为进一步研究光合细菌菌剂对板蓝根品质的提升提供了理论依据，为光合细菌菌剂在其他中草药种植中的应用奠定了基础。

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