黔产金钗石斛茎和花中浸出物测定

杨婷婷，钟 可，刘秀平，黄芯琦，韩 楷

(贵州中医药大学 药学院，贵州 贵阳 550025)

金钗石斛(DendrobiumnobileLindl.)为兰科石斛属植物，是2015版《中国药典》收载的石斛药材来源之一，具有生津益胃，清热养阴的功效[1]。药理研究表明，金钗石斛具有抗肿瘤、降血糖、增强机体免疫力等作用[2，3]。贵州省赤水市是我国金钗石斛的道地产区之一，生产的金钗石斛获得了石斛类国家地理标志保护产品。金钗石斛以新鲜或干燥的草质茎入药，但市场上有金钗石斛花茶作为保健品使用[4]。为进一步探究黔产金钗石斛的质量，本文以贵州赤水产金钗石斛的茎和花为研究对象，对茎和花中的浸出物含量进行测定，为金钗石斛的质量研究提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器与试剂

仪器：电热恒温鼓风干燥箱(上海博讯公司，GZX-9070MBE)、数显恒温水浴锅(上海双捷实验设备有限公司，DRHH-S8)、分析天平(万分之一，梅特勒-托利多上海有限公司，ME204E)、称量纸、冷凝管(20 mL、25 mL、50 mL)、锥形瓶(250 ml)、漏斗、烧杯、蒸发皿、干燥器、胶头滴管、玻璃棒、移液管、滤纸。

试剂：无水乙醇、娃哈哈纯净水。

1.2 供试药材

实验样品采集于贵州省赤水市金钗石斛仿野生种植基地，采集地点：贵州赤水旺隆镇；北纬28°30′50″；东经105°52′43″；海拔 510 m。经贵州中医药大学药学院钟可副教授鉴定为兰科植物金钗石斛(DendrobiumnobieLindl)。将金钗石斛茎除去杂质和鲜叶，用开水略烫，将搓净叶鞘后剪成1～3 cm的小段于烘箱中60 ℃干燥，粉碎过4号筛，置干燥容器中备用；将金钗石斛花分别阴干、晒干、30 ℃烘干、60 ℃烘干，粉碎过3号筛，置干燥容器中备用。

表1 金钗石斛样品来源Tab.1 Sources of Dendrobium nobile samples

2 方法与结果

2.1 水溶性浸出物测定

2.1.1 方法

冷浸法：取供试品(14号样品，5月份采收二年生金钗石斛茎)约4 g，精密称定，置250 mL的锥形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6 h内时时振摇，再静置18 h，用干燥滤器(滤纸)迅速滤过，精密量取续滤液20 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

热浸法：取供试品(14号样品，5月份采收二年生金钗石斛茎)约4 g，精密称定，置250 mL的锥形瓶中，精密加水100 mL，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

2.1.2 结果与分析

水溶性浸出物冷浸法及热浸法测定结果见表2、表3。

表2 水溶性浸出物冷浸法测定结果(n=3)Tab.2 Determination results of water-soluble extracts by cold-leaching method (n=3)

由表2、表3水溶性浸出物测定可知，冷浸法浸出物平均含量为18.23%，热浸法浸出物平均含量为17.95%。因此金钗石斛的水溶性浸出物含量测定冷浸法效果优于热浸法。

表3 水溶性浸出物热浸法测定结果(n=3)Tab.3 Determination results of water-soluble extracts by hot-leaching method (n=3)

2.2 醇溶性浸出物测定

2.2.1 方法

冷浸法：以浓度分别为10%、20%、30%、50%、75%、90%、100%的乙醇为溶剂，其余照2.1.1冷浸法项下操作，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

热浸法：以浓度分别为10%、20%、30%、50%、75%、90%、100%的乙醇为溶剂，其余照2.1.1热浸法项下操作，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

2.2.2 结果与分析

醇溶性浸出物冷浸法及热浸法测定结果见表4、表5。

表4 醇溶性浸出物冷浸法测定结果(n=3)Tab.4 Determination results of ethanol-soluble extracts by cold-leaching method (n=3)

表5 醇溶性浸出物热浸法测定结果 (n=3)Tab.5 Determination results of ethanol-soluble extracts by hot-leaching method(n=3)

由表4可知，醇溶性浸出物冷浸法以30%乙醇为溶剂提取的浸出物含量最高，为18.92%；由表5可知，醇溶性浸出物热浸法以20%乙醇为溶剂的浸出物含量最高，为20.91%。因此在醇溶性浸出物测定中，20%乙醇为溶剂的热浸法效果更佳。

根据以上金钗石斛的水溶性浸出物和醇溶性浸出物测定结果，醇溶性浸出物测定以20%乙醇为溶剂的浸出物含量高于水溶性浸出物测定冷浸法的浸出物含量。因此金钗石斛浸出物的最佳测定法为以20%乙醇为溶剂的醇溶性浸出物热浸法。

3 黔产金钗石斛茎和花浸出物的含量测定结果

照以下最佳方法测定样品：取样品约4 g，精密称定，置250 mL的锥形瓶中，精密加20%乙醇100 mL，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸l h放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用20%乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。计算样品中浸出物含量的百分值(%)。结果见表6。

表6 金钗石斛茎和花浸出物测定结果(n=2)Tab.6 Determination results of stem and flower extracts of Dendrobium nobile (n=2)

续表6

浸出物含量测定结果表明，不同采收时间的金钗石斛茎中浸出物的含量，2月份最高，为35.14%。不同生长年限的金钗石斛茎中浸出物的平均含量大小为：一年生(27.33%)>三年生(23.99%)>二年生(23.90%)。金钗石斛茎中浸出物的平均含量为25.07%，金钗石斛花中浸出物的平均含量高于茎的浸出物平均含量。不同干燥方式的金钗石斛花中浸出物含量大小为：阴干>60 ℃烘干>30 ℃烘干>晒干。

4 结论

金钗石斛水溶性和醇溶性浸出物实验结果表明：在水溶性浸出物测定中，冷浸法效果优于热浸法，浸出物含量最高，为18.23%。醇溶性浸出物的测定，采用不同浓度的乙醇试剂进行实验，以20%乙醇为溶剂的热浸法浸出物的含量最高，为20.91%。因此对于金钗石斛浸出物测定最佳方法是醇溶性热浸法，溶剂为20%乙醇。

通过测定36批不同采收月份的金钗石斛茎的浸出物含量，2月份最高，为35.14%。不同生长年限的金钗石斛茎中浸出物的含量大小为：一年生>三年生>二年生，建议2月份采收一年生金钗石斛茎质量最佳。不同干燥方式的金钗石斛花中浸出物含量测定结果表明：采用阴干法的样品浸出物含量最高，为33.03%，晒干含量最低，为28.56%。故金钗石斛花不建议采用暴晒的方式进行干燥。此外，金钗石斛花中的浸出物含量高于金钗石斛茎中的平均含量，表明金钗石斛花有广阔的开发前景。本实验测定黔产金钗石斛茎和花的浸出物含量，对于研究黔产金钗石斛的质量以及金钗石斛花的资源开发利用提供了有价值的参考资料。