Ki-67在不同葡萄胎组织中的表达及临床意义

张贺玲 许焕芝 王素琴

用Ki-67检测发现肿瘤的增生活性越高，反映其恶性程度越高，肿瘤分期越高，由此可以认为该肿瘤复发和转移的发生机会增加［1］，本研究采用免疫组化方法对75例葡萄胎患者宫内组织中检测Ki-67的表达，以期对于在临床上如何尽早、准确的预测疾病的发展方向及对患者的治疗和预后提供指导。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2006年1月至2010年1月在我院住院的葡萄胎患者75例，经产妇23例，首次妊娠36例。停经时间6～14周，其中＞12周9例，8～12周31例，6～8周35例。所有患者均无葡萄胎病史，均经病理检查确诊。其中侵蚀性葡萄胎5例，完全性葡萄胎42例，部分性葡萄胎28例。年龄20～39岁，平均年龄28.8岁。

1.2 方法

1.2.1 标本采集:对每1位葡萄胎患者刮宫时，取宫腔中央典型的葡萄样组织送病检。

1.2.2 病理处理:先对送检组织进行石蜡切片病理组织学诊断，确诊为葡萄胎。再分别对组织进行免疫组织化学测定Ki-67的表达。采用免疫组化方法SP法，SP试剂盒及Ki-67抗体购自福州迈新生物技术有限公司，常规设阳性对照和阴性对照，用已知阳性片作阳性对照，以TBS代替一抗作阴性对照。

1.2.3 结果判定:每张切片在高倍镜下随机选择10个视野，计算视野阳性细胞的平均百分数。阳性染色均为棕黄色颗粒。根据着色强度及范围，阳性细胞占细胞总数＜5%为(-)，5%～25%为(+)，26%～50%为(++)，＞50%为(+++)。

1.3 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，组间比较先进行秩变换，然后用方差分析进行两两比较，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

Ki-67的表达 Ki-67在3种不同类型葡萄胎组织中的表达阳性率分别为75%、88.1%、100%，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 不同类型葡萄胎组织中Ki-67的表达 例

3 讨论

葡萄胎为一种良性病变，其特点是绒毛间质水肿，外观呈许多水泡聚集状如葡萄。葡萄胎除有绒毛间质水肿形成水泡外，还有绒毛间质中心血管消失，滋养细胞增生活跃等变化。葡萄胎虽属良性病变，却具有生长活跃和潜在恶变的特点，约20%的完全性葡萄胎与4%的部分性葡萄胎会发展为侵蚀性葡萄胎或绒癌。在临床上判断葡萄胎清宫后是否发现恶变的主要依据是对人绒毛膜促性腺激素(HCG)的监测，甚至是转移病灶的出现。Ki-67抗原为细胞内与细胞分裂增殖相关的蛋白抗原，作为一种增殖相关抗原，Ki-67可以标记在很多妇科肿瘤中，有望成为诊断和预测疾病预后的辅助工具。

葡萄胎是妊娠滋养细胞疾病之一，其恶变率高，并有局部侵蚀及远处转移的潜在危险。葡萄胎的恶变，滋养细胞肿瘤的发生，是和很多因素相关的。滋养细胞肿瘤的发生是打破了滋养细胞巧妙的平衡，以及影响了细胞繁殖、分化、凋亡、侵蚀的细胞进程。所以这种恶变的机制是多方面，多步骤的。有待于我们的继续研究。如果能在分子水平发现其变化，则有利于我们对葡萄胎的恶变做出早期的诊断及干预，为预防性化疗提供更准确的指征［2］。本研究采取了能代表细胞增殖程度的标记物Ki-67的测定，了解其表达状况及与不同类型葡萄胎之间的关系，为临床诊断、治疗及预后判断提供一定的理论依据。

本研究发现，不同类型的葡萄胎组织中Ki-67的表达存在差异，即部分性葡萄胎＜完全性葡萄胎＜浸润性葡萄胎。国内外学者对此进行过研究，他们的结论与本研究结果一致［3-5］。妊娠滋养细胞疾病是一组以滋养细胞增生为本质特征的病变，分为部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎等，前二者为良性病变，但极易发展为恶性滋养细胞病变，恶变率可达10%～20%。尽管有明确的病理组织学诊断标准，但仍有观察者间的认识不一致。本研究通过检测增殖标记物Ki-67，发现三者的表达呈递增形成，提示表达的差异由滋养细胞异常增生所致。因此，我们认为Ki-67可准确反应滋养细胞疾病的增殖活性，可作为评价滋养细胞疾病进展的指标。也可作为判定葡萄胎的指标之一。临床上若发现葡萄胎中这种增殖标记物均呈强阳性表达时，应警惕葡萄胎恶变的可能，建议进行预防性化疗处理，以免进一步病情进展。

Ki-67做为细胞增埴标记物，是一种单克隆抗体，在细胞周期S、G2、M期均有表达，Go期缺如。它的指数高低与许多肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关，因此被广泛作为各种恶性肿瘤的必检项目之一。因此我们认为Ki-67是目前能代表葡萄胎滋养细胞异常增生的客观指标，通过检测其在不同葡萄胎组织中的表达，有助于对各种不同类型葡萄胎的细胞增生程度作出判断并预测其预后，有助于判定葡萄胎术后是否进行预防性化疗。

1 Sebire NJ，Fisher RA，Rees HC.Histopathological diagnosis of partial and complete hydatidiform mole in the first trimester of pregnancy.Pediatr Dev Pathol，2003，6:69-77.

2 黄佳，潘玫.葡萄胎恶变相关因素研究进展.现代肿瘤医学，2010， 18:416-418.3 陈梦香，马淑芬，陈文磊，等.增殖与转移相关基因在妊娠滋养细胞疾病中的表达.现代妇产科进展，2000，9:41-42.

4 蔡红光，楼艺，史骁梁，等.葡萄胎组织中PCNA与Ki-67的表达及临床意义.中国妇幼保健，2008，23:1702-1704.

5 Kale A，Soylemez F，Ensari A.Expressions of proliferation markers(Ki-67，proliferating cell nuclear antigen，and silver-staining nucleoalar organizer regions)and of P53 tumor protein in gestational trophoblastic disease.Am J Obstet Gynecol，2001，184:567-574.