萃取法与索氏提取法提取当归中阿魏酸含量结果的比较

张培培，韩春超

(山东中医药大学药学院，山东 济南 250355)

当归为伞形科植物Angellica sinensis(Oliv)Diels.的根。具有补血调经，活血止痛，润肠通便的功效。主要用于热血虚诸症，血虚血瘀，月经不调，经闭，痛经，虚寒性腹痛，跌打损伤，痈疽疮疡，风寒痹痛，血虚肠燥便秘［1］。当归所含有效成分主要是阿魏酸［2］，具有促进细胞免疫和体液免疫，增强单核细胞的吞噬功能［3］。本实验以阿魏酸为指标综合评判，对萃取法与索氏提取法进行对比研究。

1 仪器与材料

MA110型电子分析天平(上海第二分析仪器厂);KQ—100B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);LXI—Ⅲ离心沉淀器(上海医疗器械三厂);Agilent 1100高效液相色谱仪。

阿魏酸对照品(批号:110773－200611，供含量测定用)购自中国药品生物制品检定所;甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 样品液的制备 将当归中药材粉碎，称取10～20目的当归粗粉25 g，浸泡0.5 h，用中性水加热回流提取3次(加水量依次为药材重量的10，8，8倍，提取时间依次为3.0，3.0，3.0 h)，提取液用8层纱布分别滤过，滤液离心(3000 r·min－1，15 min)，合并上清液，在水浴锅上浓缩并定容。

2.2 提取方法比较

2.2.1 索氏提取法制备供试液 取样品液于蒸发皿中水浴蒸至近干，加硅藻土3 g，搅匀，烘干，研细，以甲酸－乙酸乙酯(1∶19)索氏提取2 h，回收溶剂，残渣加适量甲醇使溶解，转移至25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到供试液A。

2.2.2 萃取法制备供试液 取样品液用甲酸－乙酸乙酯(1∶19)萃取(20 mL×6次)，合并萃取液，回收溶剂至干，残渣加适量甲醇使溶解，转移至25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到供试液B。

2.3 对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品2.370 mg，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)溶解并定容至5 mL，制成对照液A(每1 mL含当归液0.474 mg)，取对照液A，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)稀释成 0.0077 mg·mL－1，0.0159 mg·mL－1，0.0316 mg·mL－1，0.0633 mg·mL－1，0.1263 mg·mL－1对照液 A1～5。

2.4 阿魏酸的含量测定

2.4.1 色谱条件 色谱柱为 Kromasil C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm);流动相为甲醇－1%冰醋酸(30∶70);检测波长320 nm;进样量20 μL;柱温30 ℃。

2.4.2 线性关系考察 精密吸取2.3项下对照品溶液A1～5，按2.4.1项下色谱条件，依法测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程为:Y=3151.9X－3.7704，r=0.9999，表明在0.0077～0.1263 mg·mL－1浓度范围内线性关系良好。

2.4.3 含量测定［4］依次吸取阿魏酸对照品溶液和2.2项下供试液A、B，按2.4.1项下色谱条件，依法测定，结果见图1、图2 和图3、表1。

图3 索氏提取法的阿魏酸图谱

表1 2种供试液中阿魏酸成分的含量比较

3 小结与讨论

3.1 根据阿魏酸含量测定结果比较，索氏提取法提取阿魏酸高于萃取法，表明当归有效成分的提取索氏提取法优于萃取法。

3.2 采用不同比例甲醇－水溶液进行试验，结果发现加入冰醋酸可明显改善峰形，提高柱效。可依据不同色谱柱，调整甲醇与水的比例，以缩短分析时间。

［1］高学敏.中药学［M］.2版.北京:中国中医药出版社，2007:460.

［2］匡海学.中药化学［M］.北京:中国中医药出版社，2003:99.

［3］袁丽霞，王红.HPLC法测定当归苦参丸中阿魏酸的含量［J］.中国药事，2008，22(1):61.

［4］张兆旺，王英姿，孙秀梅.当归苦参丸2种方法提取液的成分比较［J］.中国中药杂志，1999，24(12):734－735.