运输对荣昌猪生理生化指标的影响*

2011-05-31 06:55魏光河张培晏
动物医学进展 2011年10期
关键词:荣昌转氨酶生理

魏光河,张培晏

(1.西南大学荣昌校区动物医学系,重庆 402460;2.四川省广元市元坝区畜牧食品局,四川广元 628021)

运输是猪的主要应激原之一,据张林等[1]报道的相关数据统计,运输后仔猪发病率高达25.3%,病死率在6.1%~14.29%不等,对养猪业造成了严重的经济损失。Buckham K R等[2-4]研究了运输应激对国外优良品种猪的影响,但国内对优良地方品种猪的研究报道较少。

荣昌猪作为中国的地方优良品种猪之一,赵敏、张庭科等报道了荣昌猪以其母性强、繁殖率较高、性情温顺、肉质良好而闻名的品种特性。张毅等[5]报道了荣昌猪的繁殖性能选育指标,姚瑞英等[6]报道过广西环江香猪等中国地优良品种猪的静态生理生化指标;康世良[7]研究运输应激对猪的营养及健康的影响。运输对荣昌猪生理生化指标的动态影响尚未见报道。本研究拟通过比较运输前后荣昌仔猪生理生化指标的变化,探讨荣昌猪对运输的耐受力,为荣昌猪的养殖提供技术参考,并为建立和减弱运输的保健方案和措施提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用动物 健康的40日龄荣昌仔猪12头,购自重庆市荣昌县石河村某养猪户,常规饲养管理。

1.1.2 主要仪器和设备 Au640型全自动生化分析仪,为日本奥林巴斯产品;MINDRAY BC-1800全自动血液细胞分析仪,为深圳迈瑞公司产品;5mL一次性注射器、兽用体温计、听诊器;肝素抗凝管、枸橼酸钠抗凝管等;猪笼、长安货车等。

1.1.3 主要试剂 肝素,38g/L的枸橼酸钠;谷丙转氨酶及谷草转氨酶测定试剂盒,为上海蓝怡科技有限公司产品;甘油三酯等检测试剂,均为四川迈克生物科技股份有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 将12头试验用荣昌仔猪随机编号为1号~12号,其中1号~10号为第1组,即试验组;11号~12号为第2组,即空白对照组。试验组于室外温度15℃左右的条件下,将10头试验用荣昌仔猪装入猪笼,往返运输合计2h约100km的路程,途中不给任何饮水和食物,并于运输前、运输停止后30min、运输停止后 第1、3、7天采集血样;空白对照组饲喂于圈舍,采血和测定方法同试验组。

1.2.2 血液样本的采集及处理 准备好抗凝管、注射器等,于试验前对处于空腹状态的12头试验用荣昌仔猪按5mL/头前腔静脉采血。其中,3mL注入抗凝管(肝素)混匀用于检验血液生化指标,2mL注入抗凝管(枸橼酸钠)混匀用于检验血液生理指标,编号,静置,备送检。同法采集运输后30min、运输后1d、运输后3d及运输后7d试验仔猪的血样,编号,送检。

1.2.3 血液生化、生理指标的检测 将由肝素处理的各血液样品置于Au640全自动血液生化分析仪,按其要求添加各种检测试剂,检测葡萄糖、尿素等血液生化指标的变化,记录检测结果。由枸椽酸钠处理的各血液样品送BC-1800全自动血液细胞分析仪,检测白细胞、RBC分布宽度变异系数等血液生理指标的变化,记录检测结果。用F检验对运输前后的各血液生理生化指标做统计分析,比较运输前后的差异显著性。

1.2.4 三大生理指标的检测 对所有12头试验用荣昌仔猪于运输前、运输停止后30min、运输后第1、3、7天监测三大生理指标即体温、呼吸和脉搏。其中,运输后的第1、3、7天均在空腹状态时测量三大生理指标。肛门测定体温,取3次测定结果的平均值。通过观察猪腹部起伏测定呼吸次数,重复3次,取其平均值。脉搏次数采用听诊器左侧胸部听诊,重复3次取其平均值。

1.2.5 运输对荣昌猪血液生化指标的影响 根据测定的试验组及空白对照组各血液样品生化指标结果,以每个生化指标为基础,计算试验组(10个平行样本)和空白对照组(2个平行样本)每个生化指标的平均值作为本次试验的测量值,观察运输对荣昌猪血液生化指标影响的动态变化过程。

1.2.6 运输对荣昌猪血液生理指标的影响 参照本文1.2.5项的方法,测定运输2h约100km的运输对荣昌猪血液生理指标影响的变化,观察运输对荣昌猪血液生化指标影响的动态变化过程。

1.2.7 运输对荣昌猪三大临床生理指标的影响

根据测定的三大临床生理指标结果为基础,同本文1.2.5项的方法测定运输2h后荣昌猪在7d内的三大生理指标的变化,观察运输对荣昌猪的影响程度。

1.2.8 运输对荣昌猪个体间影响的差异性分析以测定的10头试验猪的各血液生理、生化指标为基础,采用F检验分析各试验猪在组内各个体间的血液生理、生化指标在运输前、运输停止后30min、运输停止后第1、3、7天变化的差异性。同时,以运输停止后30min的各血液生理、生化指标为基础,与空白对照组相应指标作参照,分析血液生化与生理指标与运输的差异性。

1.2.9 试验数据用Microsoft Excel 2010统计处理软件进行方差分析和F值检验。

2 结果

2.1 运输前后荣昌猪生化指标的变化及分析

荣昌猪在运输前后的血液生化指标变化情况见表1。

表1 运输前后血液生化指标的检测及分析Table 1 Detection and analysis of the blood biochemical indexes of Rongchang pig for the transport stress

(续表1)

从表1可知,尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、球蛋白、血清钾、血清钙、血清磷、血清镁、淀粉酶在运输停止时与运输前比较差异都极显著(P<0.01);葡萄糖、白蛋白、血清钠、血清氯在运输停止时与运输前比较差异不显著;葡萄糖、尿素、肌酐、总胆固醇、肌酸激酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、球蛋白、淀粉酶在运输停止时与运输前比较时都先有不同程度升高后逐渐恢复到运输前水平;低密脂蛋白、直接胆红素、间接胆红素、谷丙转氨酶、谷氨酰胺基转移酶、血清钾、血清钙、血清镁、血清磷在运输停止时与运输前比较都有不同程度降低后逐渐恢复到运输前水平。

从监测的运输停止后30min到运输后第7天的荣昌猪血液生化各指标的变化可以看出,血液中葡萄糖在运输停止后第1天~第3天内降至正常值以下,即5.0mmol/L,第7天基本恢复至正常水平;谷草转氨酶于运输后30min内上升明显,达73.40 mmol/L,运输停止后第3天开始下降,在第7天时恢复到运输前水平;肌酸激酶于运输停止时(即运输停止后30min)急剧上升,运输停止后第1天急剧下降,并于运输停止后第7天表现接近对照组的水平;血清钾、钠、钙离子水平于运输停止时(即运输停止后30min)降低,运输停止后第1天升高,第7天接近正常水平。

2.2 运输前后荣昌猪血液生理指标的变化及分析

运输前后荣昌猪血液生理指标的变化结果见表2。

表2 运输前后血液生理指标的检测及分析Table 2 Detection and analysis of the blood physical indexes of Rongchang pig for the transport stress

从表2可知,白细胞、淋巴细胞绝对值、中性粒细胞绝对值、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白、血小板压积、血小板、红细胞、淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、中间细胞百分比、血红蛋白浓度、RBC分布宽度变异系数在运输停止时与运输前比较差异都极显著;血小板压积、RBC分布宽度标准差、平均RBC血红蛋白浓度、平均血小板体积、血小板分布宽度在运输停止时与运输前比较差异不显著;红细胞、中性粒细胞百分比、平均血小板体积、RBC分布宽度变异系数四项血液生理指标在运输停止时与运输前比较都有不同程度的升高,其他的血液生理指标在运输停止时都呈现下降。

从表2的动态监测可知,白细胞含量于运输停止时(即运输停止后30min)急剧下降,运输停止后第1、3、7天处于高水平;红细胞于运输停止时到运输停止后的第7天之内均处于高水平。

2.3 运输前后荣昌猪临床三大生理指标的变化及分析

荣昌猪在运输前后三大临床生理指标见表3。

表3 临床三大生理指标检测结果Table 3The results of three clinical physical indexes of Rongchang pig for the transport stress

从表3可知,在整个试验过程中体温变化不大,运输前后差异不显著;脉搏在运输停止时与运输前比较差异极显著,运输脉搏次数明显增加;呼吸在运输停止时与运输前比较差异显著,呼吸次数减少。

从表3的动态监测可知,脉搏于运输后加快,运输停止后第1天达最高值,即131次/min,运输停止后第7天还处于正常水平之上;呼吸频率于运输停止后30min内降低,运输停止后第1天接近正常值,运输停止后第2天起,处于26次/min左右的较低水平。

2.4 运输对荣昌猪个体间影响的差异性分析

多重比较表明,运输前的10头试验用荣昌仔猪与空白组的2头荣昌仔猪各血液生理生化指标及临床指标在个体间差异不显著 (P>0.05),运输后30min各生理生化指标在试验猪及空白对照组间的差异显著(P<0.05),部分指标在试验猪组内的个体间差异极显著 (P<0.01)。

3 讨论

动物血液生化指标作为衡量其机体的健康指针,根据环境和饲养等因素的变化一直处于动态平衡,以适应周围环境。作为器官机能正常与否的信号,血液各生化指标的变化程度必将表明动物某个器官是否发生了器质性的病变或损伤。本文对荣昌猪在运输前后重要的几个血液生化指标进行了动态变化监测。从监测运输2h后,7d内的动态变化可知,葡萄糖、肌酐、谷草转氨酶及三种主要血清离子在运输前后波动都很大,差异极显著 (P<0.01)。但在运输停止后的第7天基本恢复到和对照组一致的水平。谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内,当肝脏发生严重坏死或破坏时,将引起谷草转氨酶的升高,运输后谷草转氨酶浓度升高说明运输对荣昌猪肝脏功能影响较大。

钾离子是细胞内的主要阳离子,体内98%的钾离子存在于细胞内。心肌和神经都需要有相对恒定的钾离子浓度来维持正常的应激性。朱道立等[8]报道动物应激时血清中钠离子变化不明显,高得仪等[9]报道要减少。本试验结果表明,运输停止时血清钾离子减少,停止运输后第1天血清钾离子回升,应该是运输时的应激及气温等紧密相关。本次试验中的其他几种血清离子如钙、磷、镁等在运输前后的变化差异都极显著 (P<0.01)。

本研究监测荣昌猪在运输停止后连续7d的血液生理指标的动态变化可知,除白细胞于运输停止后到第7天一直处于高水平之外,其他几种生理指标也一直处于对照组对应的指标浓度值之上。而白细胞作为动物机体免疫防御的主要细胞类型,表明运输对荣昌猪的特异性和非特异性免疫机制都有一定影响。红细胞浓度的持续较高水平说明运输对荣昌猪的刺激所致紧张和呼吸频率增加,需要消耗更多氧有关[10]。

从监测的三大临床生理指标动态变化表明,荣昌猪的体温在运输后变化不很明显,这主要与运输时天气(室外温度15℃左右)及季节(11月份)有关;脉搏在运输后上升,可能与运输时的噪音、陌生环境等引起的精神紧张有关;呼吸频率在运输后下降与运输所至紧张而呼吸加快,后因呼吸肌疲劳密切相关。

试验表明,正常健康的荣昌猪运输2h约100 km的路程后,与抵抗疾病密切相关的肌酸激酶、白细胞及红细胞数量、葡萄糖的含量等都出现明显变化。因此,运输前的增强抵抗力的中药保健、重点疫苗的免疫、饲喂或注射抗应激的药物以降低神经机能的紧张度,并辅以电解多维饮水,调节其机体内环境等,应该是减少运输对荣昌猪影响的较好措施。

综上所述,正常健康的荣昌仔猪在15℃室外温度下运输2h后,大部分生理生化指标如谷丙转氨酶、肌酸激酶等上升,部分生理生化指标如白细胞等的数量急剧下降,运输停止时与运输前比较,差异极显著(P<0.01)。运输后30min试验组猪的各个生理生化指标与空白组的荣昌猪在个体间差异显著(P<0.05);试验组内大部分生理生化指标在个体间差异不显著(P>0.05),小部分生理生化指标的变化在试验组内个体间差异极显著(P<0.01)。荣昌猪对运输的抵抗能力较差,需要在运输前后做好抗应激措施。

[1]张 林,张海军.运输应激对畜禽的影响及其应对措施[J].家畜生态学报,2009,30(2):106-109.

[2]Buckham K R,Burton J L.Transportation stress in young bulls alters espression of neutrophil genes important for the regulation of apoptosis,tissue remodeling,margination,and anti-bacterial function[J].Vet Immunol Immunopathol,2007,118(1/2):19-29.

[3]Buckham K R,Xiao L.Transportation stress alters the circulating steroid environment and meutrophil gene expression in beef bulls[J].Vet Immunol Immunopathol,2008,121:300-320.

[4]方 元,译.猪受应激后出现的不良后果及其预防[J].国外畜牧学:猪与禽,1988,6:28-30.

[5]张 毅,向 钊,杨飞云,等.聚类分析确定荣昌猪繁殖性状选育指标[J].中国兽医学报,2004,24(4):405-406.

[6]姚瑞英,许镇凤,郭善康 ,等.广西环江香猪血液生理生化指标的测定[J].广西畜牧兽医,1997,13(2):9-12.

[7]康世良.应激对动物营养与健康的影响[J].饲料博览,1994(5):16-18.

[8]朱道立.应激与神经内分泌及免疫的研究[J].北京实验动物科学与管理,1994,11(1):32-35.

[9]高得仪,韩 博.猪运输应激血液生化指标的变化[J].中国兽医学报,1996,16(3):285-288.

[10]赵 敏,张庭科.荣昌猪的品种特性与发展现状[J].中国牧业通讯,2009(22):32-34.

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