地塞米松长期间断用药对大鼠骨骼的影响

卢 丽 ，王秀丽 ，蔡惠宁 ，陈 珺 ，杨国柱 ，程 晴 ，李青南 *

1.广东药学院生命科学与生物制药学院，广东广州 510006；2.北京海军总医院门诊部，北京 100048

地塞米松（Dexamethasone，Dex）属于糖皮质激素（Glucocorticoids，GCs）类药物，在临床上应用极为广泛，疗效显著。但Dex的长期、持续使用可造成一系列严重的不良反应，其中包括骨质疏松症，其发病急、病情重，增加了原发病的治疗难度[1]。为使Dex在临床上发挥更好的作用，需寻求一种适当使用Dex的方法，既能够保证原发病治疗的同时，又可以预防药物引发的副作用。本文通过观察长期、间断应用Dex对大鼠骨形态及骨质量的影响情况，来探讨一种能避免骨丢失且可安全应用Dex的方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物

3 月龄 SPF 级雄性 SD 大鼠 20只，体重（200±20）g，动物由广州中医药大学实验动物中心供应，质量合格证编号：SCXK（粤）20080020。随机将其分为两组：①NC组，给予等体积的生理盐水；②Dex组，给予地塞米松磷酸钠，0.25 mg/100 g肌注，1周2次，共给药90 d。

1.2 骨标本不脱钙包埋及制片

动物处死前第14、13天和第3、2天分别注射钙黄绿素5 mg/kg作体内荧光标记。实验结束时，取其左胫骨（LT）及左股骨（LF），将 LT 锯出胫骨上段（PTM）和胫骨中段（TX），行不脱钙骨包埋。PTM包埋块切出5 μm和9 μm薄片，切片采用Masson-Goldner Trichrome 染色；TX 段锯出 40 μm 厚片[2]。

1.3 骨组织形态计量学检测

骨组织形态计量学参数分为静态参考和动态参数。静态参数可以分析骨量和骨的结构；而动态参数则可反映骨形成和骨吸收的指标[3]。

1.4 股骨生物力学检测

将股骨置于三点弯曲器内，加载点位于股骨中段测量处，两施压点间距为20 cm，压头以2 mm/min的速率加载，电子万能试验机记录并得出最大载荷，最大应力和最大应变，以反映其生物性能。

1.5 统计学处理

所有数据以均数±标准差（x±s）表示，采用 SPSS 11.5软件包进行分析，运用t检验检测两组之间的变量差异，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Dex对TX骨形态的影响

静态参数示：Dex组皮质骨骨量明显低于NC组，骨髓腔面积增大。动态参数示：Dex不但降低骨外膜的矿化沉积率、荧光周长百分率和骨形成率，且还使骨内膜的矿化沉积率和骨形成参数降低。另外，Dex还促进了骨内膜的骨吸收。见表1。

2.2 Dex对PTM骨形态的影响

与NC组相比，Dex并没使PTM静态参数出现明显变化，见表2。但Dex造成了PTM动态参数的改变，使骨矿化率及成骨细胞周长百分率明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05 或 P＜0.01），见表 3。

2.3 股骨生物力学检测

两组最大载荷、最大应力与最大应变比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），见表 4。

3 讨论

以往的实验[4-7]均提示长期持续（0.25 mg/100 g，1 次/d）使用Dex会使大鼠皮质骨和松质骨的骨量都丢失，令全身负荷骨的力学性能下降，骨质量降低。本研究以用药频率为切入点，维持用药剂量不变，频率降为2次/周，给药90 d，采用骨形态计量学与骨生物力学评价长期、间断使用Dex对骨骼的影响。

表 1 Dex 对 TX 骨形态的影响（x±s，n＝10）

表2 PTM骨形态学静态参数的比较（x±s，n＝10）

经分析Dex对骨量的影响与用药剂量有关，研究表明高剂量Dex抑制成骨细胞增殖与分化活性，但低剂量Dex呈促进作用[8-9]。因此导致骨丢失是Dex的超生理剂量应用的结果，它使成骨细胞数目减少，分化受抑制，影响成骨细胞的正常功能，使骨形成作用延迟，从而造成骨量丢失。而Dex使用的时间长短是众所周知的另一个原因，临床患者长期持续使用Dex，易致糖皮质激素性骨质疏松症。笔者认为除了Dex的用药剂量和时间，用药频率应该也起关键作用。研究发现长期间断性使用Dex仅使皮质骨骨量丢失，未对松质骨造成明显的影响。Dex对皮质骨的影响主要是使骨内外膜的骨形成减少，同时骨内膜面的骨吸收增加，从而出现皮质骨变薄，骨髓腔增大的情况。然而，这种几何形状的变化，并没有明显改变骨生物力学的性能，使骨质量得以维持。长期、间断应用Dex为何能避免骨丢失的机制仍有待探讨，可能的原因是间断用药减少了Dex对成骨细胞的抑制作用，从而减弱了Dex引起的骨量丢失，维持了骨生物性能。

表3 PTM 骨形态学动态参数的比较（x±s，n＝10）

表 4 Dex 对股骨骨生物力学的影响（x±s，n＝10）

综上所述，对于Dex这一类药物，用药剂量、时间及频率变化对骨骼的效应不同，提示临床上在需要长期、大量服用Dex时，可考虑采用间歇性用药方法，以减少骨丢失的程度。

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