科技进展

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甘露聚糖酶和玉米干酒糟及可溶物对生长育肥猪生长性能、营养物质消化率和肌肉特性的影响

设计了4个试验研究玉米干酒糟及可溶物（DDGS）配合甘露聚糖酶对生长育肥猪生产性能，能量和营养物质全消化道表观消化率（ATTD），血液代谢指标和肌肉特性的影响。

试验一，96头生长猪（初始体重57.6kg）被分进4个处理，每个处理4个圈，每个圈6头猪，饲喂含10%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和600U/kg的玉米大豆基础日粮。日增重（ADG）和血糖随着日粮甘露聚糖酶浓度的增加而增加（线性效应，P＜0.05）。随着猪甘露聚糖酶饲喂水平的增加，干物质和粗蛋白的ATTD得到改善（二次效应，P＜0.05）。

试验二，64头育肥猪（初始体重92.7kg）被分进4个处理，每个处理4个圈，每个圈4头猪，饲喂含15%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和 600U/kg玉米大豆基础日粮。ADG、血糖、干物质、能量和粗蛋白的ATTD随着日粮甘露聚糖酶水平增加而呈线性增加（P＜0.05）。

试验三，利用2×2双因子设计，将208头生长猪（初始体重60.5kg）分进4个处理，每个处理4个圈，每个圈13头猪，饲喂含0、10%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基础日粮。饲喂含有甘露聚糖酶的猪的ADG和血糖增加。猪的干物质和粗蛋白ATTD因日粮含有DDGS降低（P＜0.05）， 但因含有甘露聚糖酶而增加（P＜0.05）。

试验4，利用2×2双因子设计，将208头育肥猪（初始体重86.5kg）分进4个处理，每个处理4个圈，每个圈13头猪，饲喂含0、15%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基础日粮。饲喂含有甘露聚糖酶的猪的ADG和血糖增加 。 猪 的 干 物 质 （P＜0.05） 、 能 量 （P＜0.1） 和 粗 蛋 白（P＜0.05）的ATTD因日粮含有甘露聚糖酶而增加。肌肉特性和肉质没有受到DDGS和甘露聚糖酶的影响。这些结果表明，传统日粮中添加10%和15%的DDGS对猪的生长性能和肌肉特性没有负面影响。另外，日粮中含10%和15%的DDGS并配以甘露聚糖酶400U/kg可以改善育肥猪生长性能和粗蛋白的ATTD。

译自： Yoon SY,Yang YX,Shinde PL,et al.Effects of mannanase and distillers dried grain with solubles on growth performance,nutrient digestibility,and carcass characteristics of grower-finisher pigs.J Anim Sci,2010（88）： 181-191.

副猪嗜血杆菌细胞壁表面蛋白6-磷酸葡萄糖酸酯脱氢酶的特性及克隆表达

（His）（6）6PGD 蛋白引导 SJPLC 的 IL-8和 IL-6的产生。此外， 用（His）（6）6PGD 蛋白免疫在腹腔攻毒 5×LD（50）剂量的SH0165株副猪嗜血杆菌后能产生75%的保护率，免疫保护效果较好，说明6PGD具有很重要的细菌抗原性。了解6PGD蛋白的特性将有助于我们研究新的药物和疫苗。

译自： Fu S,Yuan F,Zhang M,et al.Cloning,expression and characterization of a cell wall surface protein,6-phosphogluconate dehydrogenase,of Haemophilus parasuis.Res Vet Sci，2011Aug 11.[Epub ahead of print]

在生产疫苗的细胞系和其他细胞系调查1型猪圆环病毒感染情况

1型圆环病毒（PCV1）在猪只中广泛流行，最近美国报道允许轮状病毒疫苗上市。从动物中提取的原料，比如细胞、胰岛素和血清，是导致生物制品病毒污染的主要原因。

我们调查了从ATCC（美国模式培养物集存库）获得的许多细胞系中PCV1污染的情况（这些细胞系广泛用于研究、诊断或者疫苗的研发）。在这些细胞系的建立和使用历史上，由于使用的血清和胰蛋白酶没有经过新的病毒灭活方法，也没有通过目前实验测试的记录，预计这些细胞系已经感染牛和猪的病毒。这个研究显示VERO、MRC-5和 CEFs,已经用于许多疫苗的生产，其他细胞系用于研究疫苗，包括MDCK、HEK-293、HeLa和 A549（上述所有细胞系用巢式PCR分析，PCV1阴性）；还有一些细胞系通过感染试验分析确定为阴性。然而MDBK细胞系（用于动物疫苗生产的一个细胞系），虽然没有分离到病毒，但是检测到含有PCV1的基因序列。

虽然结果显示，猪圆环病毒感染可能没有在以前的培养条件下发生，最近发生的疫苗污染事件，提示人们应继续重视预防从动物材料中引入病毒。

译 自 ： Ma H,Shaheduzzaman S,Willliams DK,et al.Investigations of porcine circovirus type 1 （PCV1）in vaccine-related and other cell lines.Vaccine， 2011Aug 8.[Epub ahead of print]

编码胸膜肺炎放线杆菌Ⅳ型菌毛基因的DNA疫苗引起强烈的免疫反应对血清型2型的菌株攻毒保护力有限

胸膜肺炎放线杆菌是革兰氏阴性细菌能引起猪的胸膜肺炎，该病在全世界范围内是一个致死性的疾病，传染性极高。

我们之前的研究显示编码Apx外毒素结构蛋白ApxIA和ApxIIA的DNA疫苗，可有效对抗致死剂量的胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌株攻毒。胸膜肺炎放线杆菌的疫苗研究由于疫苗的交叉保护力不确定而受阻（各血清型之间）。IV型菌毛蛋白ApfA已被证明是目前在各种血清型的胸膜肺炎放线杆菌中高度保守的。

一个新的DNA疫苗编码ApfA（pcDNA-apfA）被构建，其对胸膜肺炎放线杆菌血清型2型菌株的攻毒保护力被评估。在免疫pcDNA-apfA以后，对于菌毛蛋白的抗体反应明显，暗示了菌毛蛋白在体内的表达。通过对IgG亚型的分析（IgG1和 IgG2a）显示pcDNA-apfA疫苗能激活Th1和Th2免疫反应。通过IgA分析显示DNA疫苗也能提高黏膜免疫，然而，pcDNA-apfA疫苗虽然能产生大量菌毛蛋白的抗体，但是只能对攻毒（血清型2型的猪肺炎放线杆菌）产生有限的免疫保护率（30%）。这项研究的结果与前人的研究结果不同（Ⅳ型菌毛蛋白是一个广谱有效的候选疫苗蛋白），表明菌毛蛋白在猪胸膜肺炎放线杆菌的疫苗开发中发挥的作用有限。

译自： Lu YC,Li MC,Chen YM,et al.DNA vaccine encoding type IV pilin of Actinobacillus pleuropneumoniae induces strong immune response but confers limited protective efficacy against serotype 2challenge.Vaccine， 2011Aug 9. [Epub ahead of print]

中国东北部地区分离出新的猪呼肠孤病毒

我们分离出一个新的呼肠孤病毒（MRV-HLJ/2007），该病毒是从中国黑龙江省的猪身上分离出来的。基因组序列分析显示MRV-HLJ/2007与SC-A株具有很近的遗传学关系。SC-A株是2006年从四川的猪身上分离出来的。虽然系统发育分析显示MRV-HLJ/2007可能来自于SC-A株，但这两株病毒的M2和S3基因不同。系统发育分析显示：除了S1基因与感染人的呼肠孤病毒不同，MRV-HLJ/2007和SC-A株的其他基因与感染人的呼肠孤病毒很接近。这些发现暗示了MRV-HLJ/2007株可能是一种流行在中国的呼肠孤病毒新毒株。

译 自 ： Zhang C， Liu L， Wang P， et al.A potentially novel reovirus isolated from swine in northeastern China in 2007.Virus Genes， 2011Jul 15.[Epub ahead of print]

编码口蹄疫病毒B和T细胞表位定位到猪白细胞抗原经典Ⅱ类分子的DNA疫苗在攻毒后对猪只起到保护作用

研发有效安全的口蹄疫病毒疫苗是非常重要的。以前我们实验室的研究证实DNA疫苗编码C型口蹄疫病毒（FMDV）的B和T细胞表位，能有效控制病毒在小鼠中复制，然而在猪身上却没有保护作用。

这个研究工作发现通过运用新的DNA疫苗（pCMVAPCH1BTT），编码FMDV B和T细胞表位融合到单链可变区（1F12小鼠抗猪白细胞抗原经典Ⅱ类分子的单克隆抗体），以增加在猪上的保护力，DNA疫苗免疫的猪只攻毒后得到100%的保护，然而其余的猪只与对照组相比为部分保护，显示出延迟、短暂和温和的病症。疫苗免疫得到完全保护的猪只在FMDV攻毒之前激活相关分泌特异的IFNγ的T细胞，在FMDV攻毒之后，很快产生大量中和抗体。说明该DNA疫苗与免疫反应相关的所有结构都起到保护作用。我们的试验结果找到了一个研究FMDV亚单位疫苗的新方向。

译 自 ： Borrego B,Argilaguet JM,Pérez-Martín E,et al.A DNA vaccine encoding foot-and-mouth disease virus B and T-cell epitopes targeted to class II swine leukocyte antigens protects pigs against viral challenge.Antiviral Res， 2011Jul 26.[Epub ahead of print]

开发A型口蹄疫单克隆抗体

为了开发A型口蹄病毒（FMDV）单克隆抗体（mAb），BABL/C小鼠用A型FMDV免疫。抗A型FMDV的单克隆抗体（mAb）7B11和8H4被SP2/0骨髓瘤细胞和脾细胞融合的细胞表达出来。单克隆抗体7B11和8H4的滴度分别为1024和512。所有的mAb都包括κ轻链，mAb为IgG1。为了确定mAb链接表位，用间接ELISA研究这些mAb对A型口蹄疫病毒的反应，结果显示两种mAb都与A型FMDV作用。这些mAb可以在未来用于FMDV疫苗、诊断方法、预防、病原学及免疫研究。这些mAb没有与猪水疱病毒（SVD）或O型，亚洲1型和C型FMDV的交叉反应。腹水中它们的滴度分别为 1： 5×106and 1： 2×106,7B11为 IgG1亚型,8H4为IgG2b亚型。mAb可以用来临床检测A型FMDV。

译自： Lin T,Li J,Shao JJ， et al.Develope monoclonal antibody against foot-and-mouth disease virus A type.Virol Sin，2011， 26（4）:273-278.