杂环取代苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶类衍生物的合成及其抗癌活性*

赵 云， 欧阳贵平， 杜才富， 秦信蓉， 金林红， 袁 凯

(1. 贵州省油菜研究所，贵州 贵阳 550008; 2. 贵州大学 精细化工研究开发中心 绿色农药与 农业生物工程国家重点实验室培育基地 教育部绿色农药与生物工程重点实验室，贵州 贵阳 550025)

苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶及其衍生物是一类广谱生物活性化合物，如抗炎[1]、抗菌、抗肿瘤[2，3]等。近年来，苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶类化合物在有机合成和医药上倍受关注，如SuperGen 公司研制的抗癌候选药物、酪氨酸激酶抑制剂MP470(Chart 1)，具有广谱抗癌活性，与化疗和放疗具有协同作用，已经进入一期临床试验。

为了寻找具有高效抗癌活性的新化合物，本文在前期工作[4，5]的基础上，以MP470为先导化合物，将1,3,4-三唑等引入苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶中，合成了7个未见文献报道的杂环取代苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶类衍生物(4a～4e,5f和5g, Scheme 1)，其结构经NMR, IR和MS表征。

or

Scheme1

Chart1

初步生物活性测试结果表明，4和5对人前列腺癌细胞PC3都具有一定的抑制活性，其中4e的抗癌活性最为显著，接近对照药品阿霉素。

本工作对苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶衍生物进行结构修饰以提高其抗癌活性，为筛选出具有高抗癌活性的化合物奠定了一定的技术基础。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

X-4型数字显示显微熔点仪(温度计未校正);JOEL-ECX 500 Hz型核磁共振仪(CDCl3为溶剂,TMS为内标);VECTOR 22型红外光谱仪(KBr压片);Agilent 1100 MSD-Trap-VL型质谱仪。

1按文献[6,7]方法合成；其余所用试剂均为国产化学纯或分析纯。

1.2 4和5的合成(以4a为例)

在三口瓶中加入(1-苯基)-5-(2-氯-苯基)-2-巯基-1,3,4-均三唑(2a) 143.5 mg(0.5 mmol),乙腈10 mL和无水碳酸钾140 mg(1 mmol),搅拌下于室温反应3 min;加1100 mg(0.5 mmol),于78 ℃～79 ℃反应9 h。旋蒸脱溶，残余物用水洗除碳酸钾，抽滤，滤饼用乙酸乙酯重结晶得4a。

用类似方法合成4b～4e,5f和5g。4和5的实验结果见表1,表征数据见表2。

表 1 合成4和5的实验结果

*ESI-MSm/z{[M+Na]+}

1.3 体外抗癌活性测试

培养环境:饱和湿度,37 ℃, 5%CO2。种细胞在96孔板上(2 000细胞/孔)培养24 h;去除上清废液，在残余物中加带药培养基(供试药预溶在DMSO中，使用时用血清培养基稀释成10 μmol·L-1) 200 μL/well，培养72 h;去除上清废液，在残余物中加0.5 mg·mL-1MTT溶液100μL/well,培养4 h;加10%十二烷基硫酸钠溶液100 μL/well，培养12 h。冷却至室温，静置20 min～30 min后测其吸光度值(OD)，并按下式计算供试药的抑制率(%)。

表 2 4和5的表征数据

续表2

2 结果与讨论

每样本用药剂量重复六个孔，每个实验重复三次，取平均值，实验结果见表3。由表3可知，在用药剂量为10 μmol· L-1时，4b和4e对PC3的抑制率分别为59.2%和88.1%;4e的体外抗癌活性比较接近对照药阿霉素(93.5%)，总体上4和5对PC3癌细胞都具有一定的抑制效果。

表 3 4和5对PC3癌细胞的抑制率*

*c10 μmol·L-1

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