富硒黑木耳中无机元素及硒含量测定

张冬冬

硒是人和动物生命中必需的微量元素，缺硒或过量均会导致人畜得病。菌多糖在国际上被称为“生物反应调节剂”，目前已成为医药、保健品开发的“热点”。黑木耳多糖由于其优良的人体保健功能，在医学界、营养学界等都进行了比较多的研究，并证明了多种临床保健功能。黑木耳多糖的提取九十年代已引起人们的关注，但黑木耳硒多糖的提取工艺未见报导。

1 材料与方法

1.1 材料 伊春市铁力林业局2009年栽培富硒黑木耳和黑木耳实体。

1.2 仪器与试剂 荧光分光光度计，Hitachi650-105型日本东京日光股份有限公司:电子自动分析天平、恒温电热板，恒温干燥箱。试剂:DAN、高氯酸、浓盐酸、浓硝酸、环已烷、盐酸羟胺、甲酚红、氨水，EDTA-钠盐、亚硒酸钠。

1.3 试验方法

1.3.1 标准硒溶液的配制 准确称取亚硒酸钠0.2190 g经处理后0.1 mol/L盐酸稀释至浓度为0.1 mol/L。

1.3.2 0.1%DAN试剂的配制 此试剂在暗室内配制。置冰箱内保存，使用前再用环已烷纯化一次。

1.3.3 EDTA混合液的配制 将100 ml 0.2 ml/L EDTA二钠盐溶液，10 ml 10%盐酸羟胺溶液，5 ml 0.02%甲酚红指示剂混合，加水稀释至1000 ml。

1.3.4 样品处理 将自然风干的样品先用自来水洗净，再用蒸馏水漂洗，自然风干，再放60℃真空干燥箱烘干，粉碎过40目筛，装瓶放入干燥器内储存待用。

1.3.5 样品消化 准确称取样品0.1000 g，加混合酸液5 ml，加热，将消化液转移到50 ml容量瓶中，准确稀释至50.00 ml。取稀释液0.5 ml，加10%盐酸1.0 ml水浴100℃煮沸10 min，使六价硒完全还原为四价硒，冷却，加入5 ml EDTA混合液，混匀后溶液呈浅粉色。用1:1氨水(V/V)及1∶1盐水(V/V)调至溶液呈浅黄色，于暗室内加3 ml 0.1%DAN溶液混匀，沸水浴中加热5 min，冷却后加入5 ml环已烷振荡5 min，将溶液移入分液漏斗中，分层后放掉水层，将环已烷倾入带盖付管中。

2 测定

将上述带盖付管中分离出的环已烷层倾入比色杯中，于荧光分光光度计上用激发波长376 nm，发射波长520 nm，测定苯并苤硒脑的荧光强度。

2.1 富硒黑木耳和普通黑木耳中无机元素及营养成份含量测定 以伊春市铁力食用菌生产基地提供的黑木耳及富硒黑木耳为分析对象，采用荧光分光光度计测定了九种无机元素。结果表明富硒黑木耳中对人体有害的重金属铅和汞的含量明显低于普通黑木耳，其他元素含量降低幅度较小，硒对铅、汞有拮抗作用。目前由于工业生产中铅和汞的大量使用，使环境中铅、汞含量较高。铅、汞随食物链进入人体后，可在人体蓄积，造成慢性铅、汞中毒。富硒黑木耳的出现为人们提供了一种简便易行的抗铅、汞的心途径。对富硒黑木耳中硒元素采用2、3-二氨基萘荧光光度分析法进行测定，结果表明富硒黑木耳中硒含量为6.52 mg/kg，普通黑木耳中含量为0.45 mg/kg，说明黑木耳具有很强的耐硒和富硒能力，比目前国际上报导的食用菌中硒含量最高的美味牛肝菌(芬兰)的硒含量1.9 mg/kg高6.5倍。同时对普通黑木耳和富硒黑木耳中所含的蛋白质，氨基酸、脂肪、多糖粗纤维等营养成份进行了全面测定，结果表明富硒黑木耳粗蛋白、碳水化合物含量明显提高。脂肪含量变化不明显，富硒黑木耳中氨基酸的总量高达90.03 mg/g，其中人体必需的氨基酸达44.62 mg/g，对儿童智力有益的赖氨酸达8.31 mg/g。由此可见，富硒栽培改善了香菇子实体的品质。

通过对富硒黑木耳中硒含量的测定，表明在培养基中加入一定浓度的硒，可被菌丝体吸收利用并富集，提高子实体中的硒含量，使原来乏硒的黑木耳成为富硒的，这项研究对富硒保健食品的开发具有重要意义。

2.2 硒含量 黑木耳中硒含量为0.45 μg/g，富硒黑木耳中硒含量为 6.52 μg/g。

3 讨论

众所周知，硒是人和动物必需的微量元素，具有增加免疫力和防癌抑癌的作用，而黑木耳多糖亦具有增加免疫力，提高机体抗肿瘤的作用。据中科院地理研究所的调查报告，我国存在一条从东北至山东、青藏、云贵、新疆等22个省的低硒带，占国土总面积的70%，几亿人生活在缺硒和低硒地域，硒分无机硒和有机硒，无机硒如亚硒酸钠，毒性大，不易吸收，生物利用率低，有机硒毒性极小，易吸收，生物利用率高，为了将无机硒转化为有机硒，我们将含硒化合物按设计比例重量加入黑木耳固体培养基中培育出富硒黑木耳，提取分离得硒多糖，同时我们从普通黑木耳中提取黑木耳多糖，将硒多糖，多糖分别分为高、低剂量组，结果表明硒多糖及多糖均具有抑制肿瘤生长的作用，且硒多糖组效果优于多糖组，硒多糖高剂量组效果优于环磷酰胺组，低剂量组较环磷酰胺组为弱，同时硒多糖，多糖可延长小鼠生存期，硒多糖组效果优于多糖组及环磷酰胺组［1］。

目前临床上常用的化疗药如环磷酰胺对肿瘤的生长虽有较好的抑制作用，但毒性作用亦较大，可使患者机体免疫功台鲁下降，影响治疗，硒多糖及多糖均可抑制肿瘤生长且可提高杌体免疫力，无明显不良反应，而以硒多糖效果更佳，值得进一步研究和开发。

［1］姚占芳，等.香菇多糖提取工艺条件和测定方法的研究，河南农业大学学报，1995，29(2):180-183.