复方水杨酸洗剂药效学研究

(南通体臣卫生学校药学系，江苏 南通 226007)

脂溢性皮炎是皮肤科的常见病、多发病，抗炎、止痒、杀菌是外用药物治疗脂溢性皮炎的基本治疗原则[1]。皮质类激素、抗生素乳膏和酊水剂是常用外用药物，但由于皮质类激素的多种副反应，临床使用受限。为此，笔者根据脂溢性皮炎的发病机制以及临床表现并结合多年的临床治疗经验，以水杨酸、间苯二酚、薄荷脑、苯酚为主要配方，研制了非激素类外用制剂复方水杨酸洗剂。本试验中对复方水杨酸洗剂的镇痛与抗炎作用进行了研究，并与临床常用的激素类药物曲安奈德溶液进行了对比观察，现报道如下。

1 试验材料

复方水杨酸洗剂(南通市中医院制剂室，含水杨酸1%、间苯二酚2%、薄荷脑1%、苯酚1%，制剂批准文号为苏药制字H04002770，批号为20101026);曲安奈德溶液(唐山集川药业利康制药有限公司，规格为10 mL∶2.5 mg，批号为201009423);复方水杨酸洗剂辅料(含依地酸二钠、乙醇、纯化水，南通市中医院制剂室提供)。昆明种小鼠，18～22 g，雌性或雌雄兼用，均为无特定病原体(SPF)级，由学校动物房提供，中国科学院上海噬齿动物研究中心购买;实验室温度(25±1)℃，相对湿度70%，自然光照。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

2.1.1 处方

水杨酸 10 g，间苯二酚20 g，薄荷脑 10 g，苯酚10 g，依地酸二钠 0.2 g，乙醇 600 mL，纯化水加至 1 000 mL。

2.1.2 制备

取水杨酸、间苯二酚、薄荷脑与苯酚加乙醇研磨溶解，另取依地酸二钠加适量纯化水溶解，缓缓以细流加入上述溶液中，随加随搅拌，过滤，加纯化水使成1 000 mL，搅匀，分装，即得。

2.2 热板法镇痛试验[2－3]

选择昆明种雌性小鼠，置(55±0.5)℃恒温水浴的金属盆底热板上，测定小鼠从热板放置开始到受热板刺激第1次舔后足掌的时间，作为痛阈值。选择痛阈值小于30 s(疼痛反应不规则者如过敏、迟钝或喜跳动的小鼠剔除不用)的小鼠50只，随机分为5组，即辅料对照组(A组)，复方水杨酸洗剂小、中、大剂量组(B1，B2，B3组)和阳性对照组(曲安奈德溶液，C组)，每组10只。试验前1日给各组小鼠腹部剃毛，面积1 cm2。根据人体常用推荐剂量(0.05 mL/cm2)，按体表面积折算出小鼠用量为 0.032 mL/cm2。B1组涂药2次，前1次涂腹部脱毛区，后1次涂四足掌[4];B2组涂药4次，前2次涂腹部脱毛区，后2次涂四足掌;B3组涂药6次，前3次涂腹部脱毛区，后3次涂四足掌;给药面积1 cm2，每次间隔均为30 min。A组与C组的用量及给药次数同B1组。各组动物末次给药后30，60，90，120 min分别测定1次痛阈值，如痛阈超过60 s，则按60 s计。结果见表1。

表1 复方水杨酸洗剂小鼠热板试验结果(X ± s，n=10)

2.3 电刺激镇痛试验[5]

用方波脉冲电流刺激小鼠尾巴根部，连续刺激3次，每次间隔5 s，3次均有嘶叫者为电刺激致痛合格小鼠。选取合格小鼠80只，分组方法同热板法。试验前1日给各组小鼠腹部剃毛，面积1 cm2。B1组涂药2次，前1次涂腹部脱毛区，后1次涂尾巴根部电刺激处;B2组涂药4次，前2次涂腹部脱毛区，后2次涂尾巴根部电刺激处;B3组涂药6次，前3次涂腹部脱毛区，后3次涂尾巴根部电刺激处;给药面积1 cm2，每次间隔均为30 min。A组与C组的用量及给药次数同B3组。各组动物末次尾部涂药后15，30，60，90，120 min 用同样强度方波脉冲电流重复刺激，若连续2次不嘶叫者，表示有镇痛效果。结果见表2。

表2 复方水杨酸洗剂小鼠电刺激镇痛试验结果

2.4 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[4－6]

取体重合格的昆明种小鼠50只，雌雄各半，分组方法同热板法。分别将受试物均匀涂于各组小鼠右耳正反面，给药量为每次0.032 g/cm2，给药面积 2 cm2，左耳作为对照。B1组给药 1 次，B2组给药2次，B3组给药3次，每次间隔1 h。A组与C组的用量及给药次数同B3组。末次给药后1.5 h，各小组的右耳以温水洗去残余药物，用干棉球擦净，然后将0.05 mL二甲苯涂于小鼠左右耳廓前后两面致炎，致炎后30 min处死小鼠，用直径为8 mm的打孔器在两耳相同的部位取下左、右圆耳片，称重，计算左、右耳片质量差即为肿胀度。结果见表3。

表3 复方水杨酸洗剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(±s)

表3 复方水杨酸洗剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(±s)

注:与 A 组比较，△P ＜0.05，▲P ＜0.01;与 B1组比较，□P ＜0.01，■P＜0.01(表 4同)。

组别A组B1组B2组B3组C组剂量(mL/cm2)0.192 0.064 0.128 0.192 0.192肿胀度27.3 ± 8.6 21.8 ± 4.8△18.7 ± 4.2▲15.2 ± 5.4▲■14.9 ± 4.8▲■抑制率(%)－20.15 31.50 44.32 45.42

2.5 对二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响[7]

选取体重合格的昆明种小鼠50只，分组方法同热板法，试验前1 d给各组小鼠腹部剃毛，面积3 cm2。涂药部位为腹部去毛皮肤，面积约 3 cm2。B1组按每次 0.032 mL/cm2，涂药 2 次，B2组涂药4次，B3组涂药6次，每次间隔1 h，A组与C组的用量及给药次数同B3组。各组动物末次涂药后1 h，与尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水0.01 mL/g体重，随后于小鼠腹部正中部位去毛皮肤上滴二甲苯0.03 mL/只，20 min后处死，剥下腹部皮肤，肉眼观察评定皮肤蓝斑深浅程度;再用手术剪将蓝斑皮肤剪下，剪碎后投入有塞玻璃试管内，倒入丙酮－硫酸钠提取液10 mL，置暗处放置，每日轻轻摇动试管2～3次，3 d后2 500 r/min离心10 min，取上清液于590 nm处比色测定吸收度，以丙酮－硫酸钠液校零，计算每mg皮肤所含染料的量。结果见表4。可见复方水杨酸洗剂能明显抑制二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性增高。曲安奈德的作用与大剂量复方水杨酸洗剂相似。

表4 复方水杨酸洗剂对二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响(±s)

表4 复方水杨酸洗剂对二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响(±s)

组别A组B1组B2组B3组C组用药剂量(mL)0.576 0.192 0.384 0.576 0.576蓝斑色泽深浅(级别)5.8 ±1.7 4.3 ±1.3△3.9 ±1.4△3.1 ±0.8▲□3.2 ±0.9▲□蓝斑染料量(μg/mg)0.268 ± 0.089 0.151 ± 0.035△0.147 ± 0.031△0.127 ± 0.025▲□0.128 ± 0.053▲□

3 讨论

本研究结果显示，3种剂量的复方水杨酸洗剂对热板法和电刺激法致痛的2种动物模型有镇痛作用，且剂量增大，镇痛作用增强。本处方中所含的水杨酸具有镇痛、抗炎、止痒和抗菌作用[7];薄荷脑作为复方制剂局部使用，可产生清凉、止痒、消炎作用[8]。以上2种药物配伍使用，可使镇痛作用进一步增强。

在抗炎试验中，复方水杨酸洗剂对二甲苯所致小鼠耳肿胀有显著抑制作用，并可显著抑制二甲苯引起的小鼠毛细血管通透性增高，提示复方水杨酸洗剂对体液渗出、毛细血管通透性增大和组织水肿等炎症过程有明显抑制作用。薄荷脑能抑制3α－羟类甾醇脱氢酶，促进生成更多氢化可的松，发挥抗炎作用[8]。水杨酸通过抑制前列腺素合成酶，使炎性介质前列腺素合成减少[7]，发挥抗炎作用。本制剂的抗炎作用主要与薄荷脑和水杨酸有关。

间苯二酚具有抑菌(包括真菌)作用，并具有良好的止痒作用，作为皮肤科外用制剂局部使用，对脂溢性皮炎具有良好的治疗作用[9]。苯酚可使菌体蛋白质变性而具有良好的杀菌作用[10]，与具有温和防腐、抑菌作用的间苯二酚和薄荷脑[9－10]配伍使用，对防止搔抓所致继发性皮肤感染具有良好的预防作用。以上4种药物的配伍使用，对脂溢性皮炎可起到标本兼治的治疗作用。

热板法镇痛试验时，所采用的金属盆应导热良好，底部平整光洁。本试验仅选用雌性小鼠，是因雄性小鼠阴囊受热下垂，与热板接触，受热刺激而使其跳动影响试验。

本研究结果进一步显示，复方水杨酸洗剂是一种治疗脂溢性皮炎的非激素类有效制剂。

[1]赵 辨.临床皮肤病学[M].第3版.南京:江苏科学技术出版社，2003:934－936.

[2]盛国荣.复方利多卡因乳膏的处方优选[J].中国药房，2009，20(28):2 182－2 184.

[3]王 昶，姜 宜，谢小龙.龙芽葱木皂苷抗炎镇痛作用的实验研究[J].中国药师，2007，10(8):788－790.

[4]陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社，1993:377－378，307－308.

[5]徐叔云.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社，1991:695－697.

[6]蔡瑞宏，姚 宏，张亚峰，等.芦荟冰片烧伤膏生肌、镇痛及抗炎作用[J].中国医院药学杂志，2007，27(2):170－172.

[7]柳春兴，邢建国.前列宁片抗前列腺增生与抗炎镇痛实验研究[J].中国药师，2006，9(1):26－28.

[8]芮耀诚 .现代药物学[M].北京:人民军医出版社，1999:1 364－1 365.

[9]王浴生.中药药理与应用[M].第2版.北京:人民卫生出版社，2000:1 240－1 241.

[10]靳培英.皮肤病药物治疗学[M].北京:人民卫生出版社，2004:776－777.