高效液相色谱法测定解郁安神饮中栀子苷含量

周蓓瀛，毕雪艳，宗东升

(1.河北省冀中能源峰峰集团有限公司总医院，河北 邯郸 056200;2.河北省邯郸市药品检验所，河北 邯郸 056001;3.沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016)

解郁安神饮是由夜交藤、珍珠母、生石决明、栀子等药材组方的制剂。为有效控制本制剂的内在质量，笔者参考文献报道[1－10]采用高效液相色谱(HPLC)法对制剂中栀子的主要成分栀子苷进行含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－2010AHT型高效液相色谱仪(岛津);AE240型电子天平(瑞士)。栀子苷对照品(批号为0749－9605，供含量测定用，中国药品生物制品检定所);乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯;解郁安神饮(河北省邯郸市中医院，批号分别为20080401，20080501，20080607)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:C18烷基硅烷基键合硅胶柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈－水(15∶85);流速:1.0 mL/min;检测波长:238 nm;进样量:10 μL。

2.2 溶液制备

精密称取栀子苷对照品10 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每1 mL含30 μg)。精密量取本品2 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，超声30 min，放冷，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得供试品溶液。取按处方比例并以相同工艺制备的缺栀子的阴性对照品2 mL，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验:在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、阴性对照品溶液、供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪。结果阴性对照品溶液色谱图中，在与对照品溶液色谱相应的保留时间处无色谱峰出现，表明处方中其他组分对栀子苷的测定无干扰(见图1)。

线性关系考察:取对照品溶液，分别精密量取6，8，10，12，14 μL，注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，以进样量为横坐标(X)、峰面积积分值为纵坐标(Y)，求得回归方程为 Y=1.365 9×106X+4.989 5 ×103，r=0.999 9(n=5)，结果表明，栀子苷进样量在0.18～0.42 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。

稳定性试验:取同一供试品溶液(批号为20080607)，分别于0，2，4，8，24，32 h 时进样测定。结果栀子苷在 32 h 内的峰面积分值基本稳定不变。

精密度试验:取同一对照品溶液(批号为20080607)，连续进样5次。结果栀子苷峰面积积分值的 RSD为0.65%。

重现性试验:取同一批号样品5份(批号为20080607)，分别按含量测定项下方法操作，测定含量。结果表明，方法重现性良好，RSD 为 0.51%。

加样回收试验:取已知含量的样品(批号为20080607)9份，各精密称取1 mL，分别精密加入高、中、低3个水平的对照品溶液各3份。分别按含量测定项下方法操作，测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 栀子苷加样回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定

精密量取本品2 mL，依法制备供试品溶液测定含量。结果每1 mL批号分别为20080401，20080501，20080607的3批样品中栀子苷含量分别为 1.08，1.11，1.09 mg。

3 讨论

取栀子苷对照品溶液，在200～400 nm波长范围内扫描，结果栀子苷在238 nm波长处有最大吸收，无干扰，选定238 nm作为检测波长。

[1]得出，解郁安神饮每1 mL含栀子以栀子苷计，不得少于0.9 mg。解郁安神饮中栀子苷很容易在高效液相色谱柱中分离，其化学性质稳定，提取简单，灵敏度高，重现性好，因此选用栀子苷作为指标成分控制其内在质量，效果较好。

参考文献:

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:173.

[2]熊野娟.HPLC测定复肾宁片中栀子苷的含量[J].江西化工，2007(4):97－98.

[3]刘瑞新.HPLC同时测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷和栀子苷的含量[J].中成药，2007，29(8):1 170－1 172.

[4]李长根，刘春亮.HPLC法测定孕妇金花片中栀子苷的含量[J].安徽医药，2007，11(11):1 010－1 011.

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[6]刘 静.高效液相色谱法测定舒肝胶囊中栀子苷的含量[J].海峡药学，2007，19(9):47－49.

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