巴戟天对训练小鼠肝组织自由基代谢的影响

龙碧波，徐海衡，陈猛醒，张新定，胡金祥

（海南师范大学 体育学院，海南 海口 571158）

长时间、大强度的运动可引起机体体内自由基产生增加，导致体内抗氧化防御能力降低，组织细胞内脂质过氧化代谢产物增强，引起机体体内某些生物大分子结构发生变化，组织细胞遭受损伤或破坏，造成运动能力下降[1].因此，如何从天然物质中筛选有效无毒的抗氧化剂，成为运动医学领域研究的热点.巴戟天是茜草科植物巴戟天（Morinda Offieinalis How，MOH）的根，具有补肾阳、强筋骨、祛风除湿、增强免疫力等功效[2].本研究通过分析巴戟天对游泳训练小鼠肝组织自由基代谢及血清酶GOT、GPT活性的影响，探讨其作用机制，为将巴戟天在运动性疲劳中的广泛应用提供理论和实验依据.

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物及分组

选用60只健康雄性SD小鼠，体重20～22 g（购自广州中医药大学动物中心）.将小鼠随机分成分成3大组：安静组、运动组、恢复组，每大组组内均设药物组和对照组，每组10只.所有动物均在室温22～27℃、相对湿度为50%～60%的实验室内饲养，光照时间随同自然变化，以基础饲料（由广州中医药大学动物中心提供）和蒸馏水正常喂养.

1.1.2 试剂

巴戟天购自海南省中医院，采用蒸馏水浸泡、煮沸、过滤，浓缩成含巴戟天生药1.0g·mL-1的药液供实验备用[3].超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）、血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）的测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所.

1.2.1 造模与给药

各组小鼠自由摄入水和基础饲料，药物组采用灌胃给药，用药剂量为 4.5g·kg-1·d-1[4]，每天下午4时灌服给药.对照组灌胃相等剂量的生理盐水，共连续6周.训练组和恢复组小鼠共进行6周的游泳运动.水温（30±2）℃，水深35 cm，每天上午9时进行游泳训练.每周游6 d，休息1 d.第1周每天游泳训练30 min，然后每周递增10 min，第6周每天游泳时间已达到80 min.第6周游泳训练结束后进行最后一次力竭性游泳[5].训练组小鼠在力竭游泳运动后立即处死.安静组也同时处死.恢复组在力竭游泳运动后24 h立即处死.

1.2.2 指标的测定

眼眶取血，肝素抗凝，立即取出肝脏组织，低温组织匀浆，冷冻离心取上清液.严格按照试剂盒说明书的方法测定肝组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性.血液离心取血清，按照试剂盒说明书的方法测试血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）活性.

1.2.3 数据处理

所测数据均采用SPSS13.0统计软件进行处理，实验数据一律采用平均数±标准差（x±s）表示，以P＜0.05作为显著性差异标准.

2 结果

2.1 巴戟天对小鼠力竭游泳时间的影响

从表1可以看出，训练对照组小鼠力竭游泳时间为216.6 min，训练药物组小鼠力竭游泳时间为280.7 min，力竭游泳时间训练药物组小鼠较训练对照组小鼠显著延长了64.1 min（P＜0.05），延缓率为29.59%.

表1 巴戟天对小鼠力竭游泳时间的影响(x±s,n=10)Tab.1 Effect of MOH on swimming time of mice(x±s,n=10)

2.2 巴戟天对小鼠肝组织中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响

从表2中可以看出，安静药物组肝组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均显著高于安静对照组（P＜0.05），MDA含量显著低于安静对照组（P＜0.05）；训练药物组肝组织SOD、GSH-Px活性显著高于训练对照组（P＜0.05），MDA含量显著低于训练对照组（P＜0.05）；恢复药物组肝组织 SOD、GSH-Px活性显著高于恢复对照组（P＜0.05），MDA含量显著低于恢复对照组（P＜0.05）.说明巴戟天不仅对安静状态和运动状态下产生的自由基都具有明显的清除能力，而且还促进小鼠在运动后的恢复，对肝组织具有明显的防御和保护作用，是一种很强的抗氧化剂.

表2 巴戟天对小鼠肝组织中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响(x±s,n=10)Tab.2 Effect of MOH on SOD，GSH-Px,MDA of mouse liver(x±s,n=10)

2.3 巴戟天对小鼠血清GPT、GOT活性的影响

从表3中可以看出，安静药物组小鼠血清GOT、GPT活性下降，且GPT的下降具有显著性意义（P＜0.05）；训练药物组小鼠血清GOT、GPT活性均显著低于训练对照组（P＜0.05）；经过24 h恢复后，恢复药物组小鼠血清GOT、GPT活性也显著低于恢复对照组（P＜0.05）.这研究结果显示巴戟天不仅具有保护肝组织和促进肝功能恢复的作用，而且巴戟天对心肌组织也具有保护作用.

表3 巴戟天对小鼠血清GPT、GOT活性的影响(x±s,n=10)Tab.3 Effect of MOH on GPT,GPT of mouse blood serum(x±s,n=10)

3 讨论与分析

3.1 巴戟天对小鼠力竭游泳时间的影响

运动能力的提高是机体抗疲劳能力加强的重要表现，反映运动能力最常用的指标是小鼠力竭游泳时间的长短[6].本实验结果显示：训练药物组小鼠力竭游泳时间显著长于训练对照组小鼠（P＜0.05）.这说明巴戟天可以提高小鼠的运动能力，具有明显的抗运动性疲劳作用.

3.2 巴戟天对小鼠肝组织中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响

肝脏是机体进行物质代谢的重要器官，肝组织自由基的代谢以及肝组织抗氧化酶活性的变化在运动中的变化最为显著，同时机体的运动能力也与肝组织的生理机能密切相关[7].SOD、GSH-PX是机体体内自由基清除体系中的重要抗氧化酶.MDA是机体脂质过氧化代谢的产物，它的含量可体现出自由基对机体组织造成损伤的程度[8].本实验结果显示：药物组小鼠肝组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均显著高于它们各自的对照组，MDA含量显著低于它们各自的对照组，由此可见巴戟天不仅可以清除小鼠运动过程中产生的自由基，而且对小鼠安静状态下产生的自由基也有清除作用，有很强的抗脂质过氧化能力.

3.3 巴戟天对小鼠血清GPT、GOT活性的影响

GPT和GOT活性是肝细胞损伤最敏感指标之一[9].GPT分布以肝脏中最高，GOT分布以心肌最高，其次为肝.但是如果肝细胞受损，则导致GPT和GOT从受损的肝细胞中逸出到血液，致使血清中GPT、GOT活性明显增加.本实验结果显示，药物组小鼠血清中GPT、GOT活性均显著低于他们各自的对照组.说明巴戟天不仅对肝组织细胞具有明显的保护作用，对心肌组织也有保护作用.

[1]熊正英,唐量.芦荟对训练小鼠骨骼肌自由基代谢及运动能力的影响[J].中国运动医学杂志,2003,22(2)：182-183.

[2]陈志霞,林励.巴戟天的研究进展[J].中药材,2001,24(3)：209-210.

[3]陈忠,涂涛,方代南.南药巴戟天水提液对小鼠造血功能的研究[J].热带农业科学,2002,22(5)：21-22,52.

[4]冯昭明,肖柳英,张丹.巴戟水提液对小鼠肝癌模型的作用[J].广州医药,1999,30(5)：65-67.

[5]龙碧波.绞股蓝提取物对小鼠运动能力的影响[J].中国应用生理学杂志,2010,26(3)：339-340.

[6]龙碧波.海南野生绞股蓝抗运动性疲劳的实验研究[J].现代预防医学,2009,36(4)：712-716.

[7]龙碧波,张新定,苏家文.绞股蓝对训练小鼠肝组织自由基代谢及血清酶活性的影响[J].海南师范大学学报：自然科学版,2008,21(2)：193-196.

[8]何江海,常波.不同药物对力竭游泳小鼠肾自由基代谢的影响[J].北京体育大学学报,2007,30(10)：1375-1377.

[9]张秀明,李健斋,魏明竟,等.现代临床生化检验学[M].北京：人民军医出版社,2001：1277-1288.