抑癌基因PTEN和基质金属蛋白酶-2在肾癌的表达及意义

胡晓晖 陈洪波 朱圣亮 廖兆林 赵纯雄

恩施州中心医院泌尿外科，湖北恩施 445000

肾癌即肾细胞癌，是常见的泌尿系统恶性肿瘤之一，其发病率占全身恶性肿瘤的3%，仅次于膀胱癌居泌尿系肿瘤的第二位[1-2]。肾癌常起源于肾小管上皮细胞，常于50～70岁高发。PTEN基因是一种肿瘤抑制基因，在1997年被发现，具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶双重活性，人类多种肿瘤细胞中伴有PTEN基因的突变或者缺失[3]，已知机制金属蛋白酶-2（MMP-2）主要降解细胞外基质（ECM），能够为肿瘤扫除物理屏障，本实验就是探讨抑癌基因PTEN蛋白和MMP-2蛋白在肾癌中的表达情况以及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

所有手术标本组织均取自2008年6月～2011年6月我院的住院患者，临床病理资料完整，所有患者术前均未接受化疗或放疗，所有病例病理诊断明确。65例肾癌标本均为透明细胞癌，其中，男 39例，女 26例，年龄 29～76岁，平均（56.9±5.31）岁；65 例正常肾脏组织来自非瘤（创伤、结石、炎症以及活检等）手术标本，其中，男29例，女36例，年龄9～65岁，平均（39.0±8.21）岁。标本所有标本均经10%福尔马林溶液固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。

1.2 试剂

兔抗人PTEN单克隆抗体、兔抗人MMP-2多克隆抗体均来自美国 SANTA CRUZ公司，SP9001试剂盒和DAB试剂盒均来自北京中杉生物工程公司。

1.3 结果判定

免疫组织化学染色采用链酶卵白素-生物素过氧化物酶法（SP法），染色步骤严格按说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照，细胞质或细胞核中呈现棕黄色染色颗粒为阳性细胞。光显色程度的判断方法，显色程度计分：无显色定为0分；浅黄色定为1分；棕黄色定为2分；棕褐色定为3分。本实验数据统一采用总积分＞1，即为阳性表达作为统计分析的标准。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件进行统计分析。计数资料采用χ2比较，并对频数资料做关联分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常肾脏组织和肾癌中抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达情况如表1所示，PTEN主要定位于癌细胞的胞质，呈棕黄色或棕褐色；MMP-2阳性表达也主要定位于胞质。两组进行χ2检验，差异有统计学意义（P<0.05）。

表1 正常肾脏组织和肾癌中PTEN和MMP-2蛋白的表达（例）

2.2 抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达与肾癌临床因素的关系

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达与肾癌临床病因素的关系：抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的异常表达与有无包膜、有无淋巴结转移、分化程度和TNM分期有关（P<0.05）；与年龄、性别以及肿瘤的大小无关（P>0.05）。见表2。

表2 抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达与肾癌临床因素的关系（例）

2.3 肾癌中抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白表达的相关性

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白表达共阳性表达8例，共阴性表达10例。经频数相关分析：r=-0.332，P=0.007，二者呈负相关。见表3。

表3 肾癌中PTEN和MMP-2表达的相关性（例）

3 讨论

国内外研究表明，抑癌基因PTEN参与多种细胞间信号调节，能使某些磷脂或蛋白激酶相应位点去磷酸化，调控细胞的黏附、迁移和分化等，并抑制细胞周期的运行，介导细胞凋亡。 已知在前列腺癌[4]、脑肿瘤[5]、膀胱癌[6]、黑色素瘤[7]以及神经内分泌瘤[8]等多种肿瘤中均为低表达。MMP-2蛋白可由肿瘤细胞和肿瘤周边间质细胞产生，几乎能降解细胞外基质的所有成分，在多种肿瘤组织中为高表达，如胃癌、喉癌等[9-10]。本研究与文献报道一致。本研究结果显示，MMP-2蛋白和抑癌基因PTEN蛋白的异常表达与有无包膜、有无淋巴结转移、分化程度和TNM分期有关，提示二者的异常表达可能与肾癌癌发生发展关系密切。 进一步研究显示，两蛋白表达有相关，提示二者异常表达可能有相互协调作用，联合检测抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表达可作为预测肾癌的转移趋势指标。

综上所述，笔者认为抑癌基因PTEN蛋白的低表达和MMP-2蛋白在肾癌中高表达可能与肾癌的发生、发展、侵袭和转移有密切的关系，联合检测二者的表达有助于深入的了解肾癌的发生发展，并为肾癌的诊治提供依据；更深入研究抑癌基因PTEN蛋白的表达水平还有助于肿瘤的早期诊断，推动肾癌的基因治疗，为肾癌的临床治疗提供新思路。

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