菟丝子粗提物抗疲劳作用研究

尹爱武，田 润，王 盼

（1.湖南科技学院，湖南永州 425100；2.湖南中医药高等专科学校，湖南株洲 412012）

菟丝子粗提物抗疲劳作用研究

尹爱武1，田 润2，王 盼1

（1.湖南科技学院，湖南永州 425100；2.湖南中医药高等专科学校，湖南株洲 412012）

目的：研究菟丝子的抗疲劳作用。方法：将昆明种小白鼠随机分为4组，分别为空白对照组、菟丝子低、中、高剂量组，分别灌胃给予蒸馏水、5、10、15g生药/kg·bw的菟丝子水提物，连续给药30d，测定小鼠负重游泳时间。采血、分离血清，测定乳酸脱氢酶（LDH）、血乳酸（BLA）含量，并取小鼠肝脏与后腿部肌肉，测定肝糖元（LG）、肌糖元（MG）的含量。结果：菟丝子低、中、高剂量组与空白组比较，能显著延长小鼠负重游泳时间，降低血乳酸水平，增加乳酸脱氢酶的活力及增加肝糖元、肌糖元的含量（p＜0.01）。结论：菟丝子具有显著的抗疲劳作用。

菟丝子，抗疲劳，乳酸，肝糖元，肌糖元

人体容易产生疲劳是机体处于亚健康状态的表现。由于人们生活方式与节奏的改变，研究开发提神抗疲劳产品已成为国内外食品营养行业关注的热点。疲劳的发生和消除与能量物质代谢、血清酶学变化、自由基等多种机制有关[1-3]。现代研究发现多种植物成分有抗疲劳作用，如双孢菇水提物[4]、人参蛋白[5]和鹿茸水提物[6]等。菟丝子中含有黄酮、多糖、生物碱及氨基酸等多类生物活性物质[7-11]。研究表明，菟丝子具有壮阳[12]、抗生殖损害[13]、增加冠脉流量与减少心肌耗氧量[14]、抗衰老[15]等作用。目前未见关于菟丝子抗疲劳作用的研究报道。本文对菟丝子抗小鼠运动性疲劳作用进行研究与探讨，为菟丝子用于抗疲劳产品的开发应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

菟丝子 湖南廉桥药材大市场；昆明种小白鼠160只，健康，雌雄各半，体重（22±2）g，湖南省动物实验中心；乳酸脱氢酶试剂盒、血乳酸试剂盒、肝糖元试剂盒、肌糖元试剂盒 南京建成生物工程研究所。

N-1000S-WA旋转蒸发仪 日本EYELA；塑料游泳箱（40cm×60cm×40cm）自制，水深30cm。

1.2 实验方法

1.2.1 菟丝子提取物的制备 称取一定量菟丝子，用8倍量洁净自来水浸泡30m in，在100℃下加热回流提取60m in，过滤，滤渣加7倍量洁净自来水加热回流提取60m in，过滤，合并滤液，减压浓缩，制成浓度为1g生药/m L药液。

1.2.2 小鼠负重游泳实验[16]

1.2.2.1 动物分组和给样 健康昆明种小白鼠，适应性饲养1周后，随机分为空白对照组、菟丝子高、中、低剂量组共4组，每组20只，雌雄各半。各组小鼠每天灌胃1次，连续灌胃30d，空白对照组给予蒸馏水，菟丝子高、中、低剂量组给药量分别为5、10、15g生药/kg·bw。

1.2.2.2 负重游泳时间测定 灌胃30d后，于末次灌胃30m in后在尾根部负荷小白鼠体重6%的铅皮，置于游泳箱中游泳，水深30cm，水温（30±1）℃，记录小白鼠自游泳开始至沉入水中8s不能浮起的时间，为小白鼠的负重游泳时间（s）。

1.2.3 生化指标的测定[17]动物分组和给样同“1.2.2.1”项。末次灌胃前小白鼠隔夜禁食不禁水12h，末次灌胃前小白鼠眼眶采血，离心，制备血清备用。灌胃30m in后，将小白鼠置于水温度为（30±1）℃的游泳箱中不负重游泳90m in，休息60m in后眼眶采血，离心，制备血清备用。取小白鼠肝脏和后腿部肌肉，用冰生理盐水洗去血渍，滤纸吸干备用。按照试剂盒说明测定乳酸脱氢酶（LDH）、血乳酸（BLA）、肝糖元（LG）、肌糖元指标（MG）。

1.2.4 统计分析 数值用X±SD表示，用SPSS 12.0统计分析，测定值采用单因素方差分析，并进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 菟丝子对小白鼠体重的影响

负重游泳实验中各组小白鼠隔天测体重一次，结果见表1。结果显示各组小白鼠体重没有显著差异（p＞0.05）。表明体重不会影响各组间生化指标的比较。

表1 菟丝子对小白鼠体重的影响（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

表1 菟丝子对小白鼠体重的影响（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

2.2 菟丝子对小白鼠耐力的影响

疲劳最直接的表现就是运动能力的下降。小白鼠负重游泳时间与小白鼠的运动能力呈正相关。表2表明菟丝子低、中、高剂量组能极显著地延长小白鼠负重游泳时间（p＜0.01）；菟丝子中、高剂量与低剂量组之间比较，中、高剂量组小白鼠负重游泳时间极显著延长（p＜0.01），结果说明菟丝子能显著提高小白鼠运动耐力，且有剂量反应关系，增大给药剂量小白鼠运动耐力增强。

表2 菟丝子对小白鼠负重游泳时间的影响（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

表2 菟丝子对小白鼠负重游泳时间的影响（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

注：*表示与空白组相比较p＜0.01；△表示与低剂量组比较p＜0.01。

2.3 菟丝子对小白鼠血乳酸的影响

机体长时间剧烈运动后，肌肉组织供氧不足，糖酵解产生的丙酮酸还原为乳酸。乳酸浓度增加使肌肉组织内pH下降，导致机体疲劳。乳酸脱氢酶催化分解乳酸，减少乳酸在肌肉组织的堆积。由表3可知，与空白对照组比较，菟丝子低、中、高剂量组小白鼠运动后血乳酸含量极显著降低（p＜0.01），乳酸脱氢酶活力显著增强（p＜0.01）。结果表明菟丝子可以减少机体运动后，血乳酸水平，从而达到抗疲劳的效果。

表3 菟丝子对小白鼠血乳酸及乳酸脱氢酶的影响（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

表3 菟丝子对小白鼠血乳酸及乳酸脱氢酶的影响（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

注：*表示与空白组相比较p＜0.01；表4同。

组别 血乳酸（mmol/L） 乳酸脱氢酶（U/L）游泳前 游泳30min后 游泳30min后空白 5.5±0.7 9.5±0.9 4529.6±583.0低剂量 5.6±0.6 7.2±0.5* 5904.8±604.7*中剂量 5.5±0.9 6.3±0.8* 6036.4±658.2*高剂量 5.8±1.0 6.2±1.1* 6173.4±675.9*

2.4 菟丝子对小白鼠运动后肌糖元与肝糖元的影响

肌糖元是机体运动最直接的能量来源，随着肌糖元的不断消耗，机体动用肝糖原以维持血糖水平稳定。因此，机体运动后肌糖元和肝糖元的水平能反映其抗疲劳能力。从表4可知，菟丝子低、中、高剂量组肌糖元、肝糖元的水平极显著高于空白组（p＜0.01）。表明菟丝子有显著的抗疲劳效果。

表4菟丝子对小白鼠运动后肌糖元与肝糖元的影响（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

表4菟丝子对小白鼠运动后肌糖元与肝糖元的影响（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

组别 肌糖原（mg/g） 肌糖元（mg/g）空白 0.75±0.16 5.2±0.54低剂量 0.96±0.20* 6.95±0.98*中剂量 0.97±0.21* 6.77±1.01*高剂量 0.97±0.18* 6.84±1.20*

3 结论

本研究用菟丝子水粗提物对小白鼠灌胃给药，从能量物质代谢、血清酶学变化探讨菟丝子的抗小白鼠疲劳作用。发现菟丝子水粗提物有显著的抗小白鼠疲劳作用，给药组小白鼠负重游泳时间显著延长，血乳酸水平降低，乳酸脱氢酶的活力增强，肝糖元、肌糖元的储备量增加。后期将对菟丝子水粗提物进行分离，进一步研究菟丝子中哪类物质产生抗疲劳作用，并进一步研究其抗疲劳机制。

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Study on anti-fatigue effect of Semen Cuscutae crude extracts

YIN Ai-wu1，TIAN Run2，WANG Pan1
（1.Hunan University of Science and Engineering，Yongzhou 425100，China；2.Hunan Traditional Chinese Medical College，Zhuzhou 412012，China）

Ob jective：To study the anti-fatigue effec tof Semen Cuscutae.Methods：Kunm ing m ice were random ly d ivided into 4 g roups.Blank control group was given d istilled water by intragastric adm inistration.Semen Cuscutae low-dose，m idd le-dose and high-dose g roup were given the extract 5，10，15g·（kg·bw）-1by intragastric adm inistration，respectively.Loaded swimm ing time was tested after successive adm inistration 30d，the b lood was collected and serum was separated，the content of lactate dehyd rogenase and lactic acid were determ ined.Then the content of liver g lycogen，musc le g lycogen were determ ined by m ice liver and the posterior leg musc les.Results：There was significant d ifference between Semen Cuscutae g roup and b lank control g roup（p＜0.01）.The result showed as follows：Semen Cuscutae could significantly p rolong sw imm ing time，reduce lactic acid level，inc rease lac tate dehyd rogenase vitality，increase liver g lycogen and musc le g lycogen content.Conc lusion：Semen Cuscuta had a remarkab le anti-fatigue effect.

Semen Cuscutae；anti-fatigue；lactic acid；liver g lycogen；musc le g lycogen

TS201.2

A

1002-0306（2012）14-0164-03

2011－12－05

尹爱武（1981-），男，博士，主要从事中药新药的研究与开发。

湖南省重点学科建设项目资助（2011-76）；湖南省高校科技创新团队支持计划资助（2012-318）。