动物“瘦肉精”快速检测方法

2012-11-23 03:49
中国畜牧兽医文摘 2012年2期
关键词:尿样瘦肉精试纸

姜 波 周 萌 王 涛

(1.山东省济南市畜产品质量安全监测中心,济南 250002;2.山东省济南市畜产品质量安全监测中心,济南 250002;3.山东省济南市动物卫生监督所,济南 250002)

畜产品质量安全已成为我国乃至世界共同关注的话题。如何控制药物残留,确保畜产品质量安全,保证人们吃到“放心肉”,监督和检测环节至关重要。畜产品质量安全包括“肉、蛋、奶”等多方面,其中“瘦肉精”的添加使用备受关注。国家对“瘦肉精”的控制使用、监督检查和检测方面都投入了大量人力、物力。监督检测部门需要更科学、高效、准确的检测方法来监督监测药物残留。下面介绍3种最常见的“瘦肉精”及其快速检测方法。

1 “瘦肉精”常见种类

“瘦肉精”包括很多种,一般最常见、最常添加的“瘦肉精”主要包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种,它们是一种人工合成的β-肾上腺素能兴奋剂,具有扩张支气管的作用。当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉淀减少。因此,将其俗称为“瘦肉精”。在畜牧业生产过程中,一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到动物饲料中,用以改善酮体的品质,同时也造成食物中“瘦肉精”的残留。当人们食用含有这些残留的产品后,会出现心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠等症状,严重的会出现瘫痪。

2 “瘦肉精”快速检测方法

2.1 原理

快速检测试纸分别是用盐酸克伦特罗单克隆抗体、莱克多巴胺单克隆抗体和沙丁胺醇单克隆抗体为基础,根据现代免疫学技术设计组装。待测尿样在层析过程中,样品中的“瘦肉精”与NC膜上的检测线(T线)上“瘦肉精”——蛋白偶联复合物共同竞争金标特异性抗体。以试纸上T线的颜色变化与质控线(C线)比较判定样品中的“瘦肉精”含量。

2.2 目的、用途

试纸条是一种快速筛选检测的方法,能快速检测出动物尿液中盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇,对监督检查“瘦肉精”工作提供了便利条件。为防止“瘦肉精”的非法使用,保证食品安全提供了一种高效的检测手段。

2.3 操作步骤

2.3.1 检测步骤

(1)取出所需试纸置于平面,并与样品对应编号;

(2)在试纸加样孔中加入100μL或3滴待检样品,开始记时;(3)5 min内观察记录结果,10 min以内判断结果。

2.3.2 结果判定

(1)T线和C线都出现棕红色条带,结果为阴性,样品中“瘦肉精”的含量小于其对应的检测灵敏度。

(2)T线不出现棕红色条带,C线出现一条棕红色条带,结果为阳性,样品中“瘦肉精”的含量大于或等于其对应的检测灵敏度,其阳性结果可用酶联免疫法进行进一步测定。

(3)若T线和C线都没有出现棕红色条带,说明操作不当或者是检测试纸失效。

注:盐酸克伦特罗的检测灵敏度:3 ng/ml(ppb);莱克多巴胺的检测灵敏度:8 ng/ml(ppb);沙丁胺醇的检测灵敏度:10 ng/ml(ppb)。

结果如图所示:

2.4 影响因素

(1)由于动物尿样样品的个体差异,受年龄、品种、性别和养殖环境的影响,抽取动物尿液样品有差异,在检测过程中,可能会影响检测线颜色偏淡,一般并不影响结果的判断,只要检测线出现条带,不论深浅,就可以判定为阴性。

(2)澄清的动物尿样样品不需要特殊的处理,可以直接用于检测;如果尿样中污染有杂物或呈浑浊状时必须经离心或者过滤后再用于检测,严重污染或浑浊者不可用于检测。

(3)检测时,检测温度、湿度和检测时间都会对实验结果有所影响。试验过程中,环境的温度尽量控制在20℃左右进行;试纸条从拆封到检测,时间尽量控制在每个样品10 min之内,以保证试纸条不受潮,减少对检测结果的影响因素。快速检测试纸条一般存放温度控制在4~30℃之内,密封、干燥、避光存放,严防受潮。

(4)如果动物尿液样品为冷冻状态,应使其化冻回温再进行检测,以免影响检测结果,必须保证尿液样品在常温之内。

(5)尿液样品吸管不可混用,以免交叉感染;如果尿样中污染有杂物或呈浑浊状时要经离心或者过滤后再用于检测,严重污染或浑浊者不可用于检测。

(6)由于各种原因,动物尿样样品检测时有可能会出现假阳性,对可疑样品或阳性样品,可重复实验(每支试纸只能使用1次),也可用酶联免疫法做进一步确定。实验后的废弃物要妥善处理。

2.5 优势和不足

动物尿液中“瘦肉精”快速检测的优势是动物尿样不需要特殊处理,可直接用于检测,监督检查人员和检测人员可进行现场检测,快速高效判断结果,节省大量人力、物力,提高了工作效率。但由于是快速检测,其结果受温度、湿度等环境和其他影响较多,若出现阳性或假阳性结果,还需做进一步实验确定。

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