西藏林芝某鸡场鸡新城疫抗体水平检测

徐业芬，商 鹏，王宏辉，田飞鹏，李 鹏，强巴央宗

（西藏农牧学院动物科学学院，西藏 林芝860000）

鸡新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，鸡群一旦传入该病常呈毁灭性流行，在短期内可使未免疫鸡全部感染发病而死亡，该病一年四季均可发生，危害极大，其主要特征是呼吸困难，严重腹泻，全身呈败血症变化，黏膜和浆膜出血，病程稍长的伴有神经症状［1－2］。接种疫苗是有效预防本病的有力措施，由于受多种因素影响，疫苗免疫有时不能取得理想的保护水平。为监测西藏林芝县百巴镇章巴养鸡场新城疫抗体水平，2011年4月～8月对该养鸡场的新城疫抗体进行血清学监测，以有效评估鸡群的免疫状态，报告如下。

1 材料与方法

1.1 血样采集 在西藏林芝县百巴镇章巴养鸡场经免疫接种的鸡群中随机抽样，翅下静脉采血，每只2mL，先后共采集血样121份，置于冰盒中2h内带回实验室。

1.2 血样处理 采集血样待血清析出后，2 000r／min离心10min，取上层血清编号，保存于干净的离心管中，置于4℃下保存，2d内完成检测。

1.3 仪器与试剂 96孔微量板、微量加样枪、微型震荡器、离心机、恒温培养箱；生理盐水、3.8%枸橼酸钠抗凝剂、1%鸡红细胞悬液为本实验室自制。鸡新城疫标准抗原、阳性血清，购自中国兽医药品监察所。

1.4 试验方法

1.4.1 配制1%红细胞悬浮液 随机选取1只成年鸡，从颈静脉采血20mL并与枸橼酸钠抗凝剂充分混匀后取10mL血液和90mL生理盐水共同加入一个大离心管中进行3 000r／min离心5min，弃上清液，以上操作重复3至4次。操作完毕之后，以微量加样枪吸取5μL的红细胞加入495μL生理盐水中，充分混匀，即制成1%红细胞悬浮液。

1.4.2 抗体效价的测定方法 血凝抑制试验（HI）：微量反应板的每一孔内加入生理盐水25μL，取4倍稀释的待检血清25μL，从第1孔开始，依次作倍比稀释至最后1孔，最后一孔弃除混合液25 μL。将鸡新城疫标准抗原（4U）25μL加入以上每孔中；同时，设抗原、阳性血清和稀释液3个对照，放微量振荡器上摇匀，混匀后置37℃培养箱内30 min后，每孔加入1%鸡红细胞25μL。再放微量振荡器上摇匀，置37℃培养箱内约30min观察。

1.4.3 结果判断 免疫后的HI效价≥5log2为阳性，判定为免疫合格；HI效价＜5log2为阴性，判定为不合格。免疫合格率在70%以上则可判定为免疫合格场。

2 结果与讨论

2.1 鸡新城疫抗体水平检测结果 在所检测的121份血样中，测得其效价范围为3～8 1og2，详细情况见表1。由表1可以看出该鸡场新城疫抗体效价≥6log2和≥7log2的分别达到24.79%和50.41%，抗体效价≥5log2为98.35%，说明该鸡场免疫合格。

表1 养鸡场2011年4～8月新城疫抗体水平血凝抑制试验检测结果

2.2 鸡场新城疫防制建议

2.2.1 免疫预防 接种疫苗可以提高禽群的特异免疫力，减少NDV强毒的传播，降低ND造成的损失。在林芝地区一般以6～10日龄首次接种为宜，可以用Ⅰ系苗滴鼻或点眼。在ND流行地区，可以提前1～3d接种，并将剂量加大0.5～1倍。当用ND弱毒疫苗免疫后15d或用油佐剂灭活疫苗注射后21d左右，应检测免疫效果，确定下一次免疫时间。若有如下情况之一者应及时加强免疫，当10%～20% 的鸡HI抗体水平低于1∶15；有呼吸啰音和排绿色粪便，采用抗生素治疗无效，又有ND可疑病变鸡。加强免疫的方法是：用2～3倍量的Ⅳ系疫苗或Ⅰ系疫苗饮水或肌肉注射，同时肌肉注射ND油佐剂灭活疫苗［3］。

2.2.2 加强日常管理 防制ND是一项十分艰巨和复杂的任务，要采取加强日常的科学管理，防止NDV强毒进入。如防止一切带毒动物（特别是鸟类、鼠类和昆虫）和污染物进入禽群；进出的人员和车辆及用具消毒处理；饲料和饮水来源安全；不从疫区引进种蛋和苗鸡，新购进的鸡隔离观察2周以上证明健康者，方可合群；科学的饲养管理制度，如全进全出等；禽场的选址、生产的规模等均有利于防止病原体进入［4］。

若发现病鸡要及时隔离，对病死鸡进行焚烧或深埋，全场立即消毒、清理粪便。此外，鸡舍在进鸡前应进行彻底消毒，而且进鸡后也要定期消毒，并注意如氢氧化钠等消毒药选用要科学，浓度恰当，药量充足，作用时间充分，方能达到彻底消毒的目的。应引起注意的是在用弱毒疫苗免疫前后10d内禁止作饮水消毒［3］。

3 结语

本次试验的结果表明，该鸡场为免疫合格鸡场，免疫合格率高于70%，说明在专业技术人员指导下该鸡场严格按照科学的免疫程序做好了鸡群的免疫，可以有效防止新城疫病毒的入侵。

［1］蔡宝祥.家畜传染病学［M］.北京：中国农业出版社，2001.

［2］郑明球.家畜传染病学实验指导［M］.3版.北京：中国农业出版社，2001.

［3］徐业芬，牛家强，曾群辉.鸡非典型新城疫的防制［J］.中国兽医杂志，2007，43（2）：67.

［4］徐宜为.最新禽病与防制［M］.北京：中国农业科学技术出版社，1993.