Fas/FasL系统在 RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义

何育英 蔡巧青

Fas/FasL系统在 RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义

何育英 蔡巧青

目的 探讨反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织Fas/fasL的表达和研究其临床意义。方法

采用免疫组化法检测33例反复自然流产患者绒毛组织Fas/FasL的表达水平，并以30例健康早孕组为对照。结果反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织FasL低于对照组，数据经统计学比较具有显著差异(P＜0.05)，蜕膜组织Fas数据经统计学比较具有(P＞0.05)，而绒毛组织却无显著差异。结论反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织的Fas/FasL失衡可能是反复自然流产的原因之一，需加以重视。

反复自然流产;蜕膜;绒毛组织;Fas/FasL

反复自然流产(RSA)是妇产科常见病，约40%～60%不明原因。近年来多数研究表明，正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以Th2体液免疫为主，而Th1细胞免疫过强极有可能导致流产。细胞凋亡已被公认为是引起免疫耐受的一个重要机理，其中致凋亡基因Fas和其配体FasL在细胞凋亡中起关键作用。妊娠期Th1/Th2型细胞因子失衡与Fas/FasL介导的细胞凋亡关系密切。本文主要研究本文研究RSA患者蜕膜和绒毛组织Fas、FasL表达水平，探讨Fas/FasL系统在RSA发病机制及对临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 从2010年10月至2011年10月在深圳市盐田区计生中心经过妇检，B超，尿HCG都正常无不孕，无死胎或流产史，要求人流的妇女30例为正常早孕组。年龄25～36岁，平均(29.5±2.6)岁，孕周7～10周，平均(9.1± 1.3)周，孕次2～4次，平均(2.5±1.2)次。同期经我中心排除因遗传，感染及血型不合，抗精子抗体阳性等因素，确诊为RSA的妇女33例为研究组。年龄26～37岁，平均(30.1± 3.1)岁，孕周9-11周，平均(10.2±1.7)周，孕次3～7次，平均(5.1±2.2)次。以上年龄，孕周，孕次比较，P＞0.05，无显著性差异

1.2 设备及试剂 采用艾美捷科技有限公司的鼠抗人 Fas单克隆抗体，鼠抗人FasL单克隆抗体S-P超敏法试剂盒，按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 标本收集和处理 ①两组于术后留取标本妊娠组织，置于10%中性甲醛溶液中固定8～24 h，低温石蜡包埋，制成蜡块，置-20℃冰箱干燥保存，待切片及免疫组化染色。②结果判读黄色颗粒为阳性标准，每张切片随机取5个高倍视野，阳性细胞比例＜10%，阴性。10%～25%，阳性(+)。25%～50%，阳性(++)。＞50%，阳性(+++)。③采用SPSS 13.0统计学处理软件包进行数据分析，计量资料采用均值±标准差(±s)表示，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组和研究组在滋养层细胞组织中的表达

2.2 对照组与研究组Fas、FasL在蜕膜和绒毛的表达比较，见表3。

表1 Fas在正常早孕、反复流产患者滋养层细胞组织中的表达

表2 FasL在正常早孕、反复流产患者滋养层细胞组织的表达(例)

表3 对照组与研究组蜕膜组织比较(例)

表4 对照组与研究组绒毛组织组织比较(例)

2.3 小结

2.3.1 就对照组而言，研究组滋养层细胞组织Fas表达无显著差异(P＞0.05)，而FasL表达下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.3.2 就对照组而言，研究组蜕膜组织中Fas表达增强，差异显著(P＜0.05)，FasL表达下降，差异显著(P＜0.05)。

2.3.3 就对照组而言，研究组绒毛组织中Fas表达无显著差异(P＞0.05)，而FasL表达下降。

3 讨论

Fas，为Ⅰ类膜蛋白分子，FasL为Ⅱ类膜蛋白分子，也称Apo-1或CD95，属于肿瘤坏死因子/神经生长因子受体家族之一。细胞凋亡的过程主要由Fas/FasL介导Fas与FasL之间的相互作用［1］。Reinhard等［2］证实，妊娠期 Th1/Th2型细胞因子失衡与Fas/FasL介导的细胞凋亡关系密切。妊娠期由于胎儿大量异体抗原进入母体机体，促使大量T淋巴细胞被激活，发生克隆扩增并发生免疫反应作用［3］，Th1型淋巴细胞表达大量Fas，机体FasL与其结合后凋亡，最终导致表达Fas的 Th1细胞大量凋亡，数目减少，具有胚胎毒性作用的Th1细胞功能下降，利于妊娠成功。研究发现，RSA患者与正常妊娠者在滋养层细胞组织，蜕膜组织组绒毛组织中，Fas/ FasL系统表达异常［4］，这与Minchevanilsson等［5］和赵亮［6］的结论一致。机体主要通过Fas/FasL信号诱导母体淋巴细胞的凋亡，使胎儿能够免疫逃避母体的溶细胞毒性，从而保证妊娠的顺利进行。而流产患者滋养细胞FasL表达下降，Fas表达增强。一方面由于FasL的表达下降，被异体抗原刺激而大量激活的Th1细胞不能通过Fas/FasL介导的AICD机制失活，从而使过度活化的Th1型T淋巴细胞高度表达Fas，导致Fas表达增强，另一方面，由于Fas/FasL介导的AICD机制失活，大量被激活的T淋巴细胞产生Th1型细胞因子，最终导致流产［7］。Fas/FasL系统表达异常使妊娠期Th1/Th2型细胞因子失衡、母-胎免疫排斥［8］，可能在反复流产免疫病因中起重要作用［9］。廖丹等［10］报道，RSA患者可通过免疫治疗后，促进机体向Th2淋巴细胞转化，或范舒舒［11］等主动免疫治疗可通过改变淋巴细胞Fas/FasL的表达水平，改善细胞免疫状态取得疗效。调节优势应答的类型，达到早预防，早治疗，达到妊娠成功的目标。

［1］ Green DR，Droin N，Pinkoski M.Activation-induced cell death in T cells．Immunol Rev，2003，193∶70-81．

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［6］ 赵亮，陈晓．Fas/FasL信号在免疫系统中的作用．国际免疫学杂志，2011，34(01):19-52．

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［10］ 廖丹，等．淋巴细胞免疫治疗反复早期自然流产53例．临床医学，2009，29(1):75-76．

［11］ 范舒舒，许红雁，江欢，马占忠.复发性自然流产患者主动免疫治疗前后外周血淋巴细胞Fas/FasL表达水平的研究．中国优生优育，2011，19(9):65-67．

The expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in RSA and study their clinical significance．

HE Yu-ying，CAI，Qiao-qing.Population and Famaily Planning Center of TanTian，Shenzhen 518000，China

Objective To discuss the expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in patient with RSA and study their clinical significance.MethodsThe level of Fas/FasL of the deciduas and the villus trophoblasts in 33 patient with RSA were measured by immunohistochenical.30 normal pregnant women made up the reference.Resultsthe level of FasL of the deciduas and the villus trophoblast in patient with RSA was significantly lower than the health group，the level of Fas of decidus was significantly different while the villus trophoblasts is no.ConclusionThe balance of Fas/FasL of the villus trophoblast is one of the important reason to the recurrent spontaneous abortion.We should pay more attention to it．

Recurrent spontaneous abortion;Deciduas;the villus trophoblasts;Fas/FasL．

518000深圳市盐田区盐田街道计生中心(何育英);深圳市北京大学深圳医院妇产科(蔡巧青)