Caspase-3蛋白在口腔白斑转化为口腔鳞状细胞癌中的作用

涂 平

（河南省郑州大学第一附属医院口腔科，郑州450052）

Caspase-3蛋白在口腔白斑转化为口腔鳞状细胞癌中的作用

涂 平

（河南省郑州大学第一附属医院口腔科，郑州450052）

目的 研究Caspase-3蛋白在口腔正常黏膜、口腔白斑（OLK）和口腔鳞状细胞癌中的表达，以了解Caspase-3在口腔癌前病变发生发展过程中的作用及临床意义，为癌变潜能监测提供诊断指标。方法 采用免疫组化技术SP法对标本进行Caspase-3蛋白染色，并计算它的阳性表达。结果 Caspase-3蛋白在口腔正常黏膜及不同病变的表达，经统计学分析，随着组织异常程度的增加，Livin蛋白阳性表达强度具有递减的趋势（P＜0.05）。结论 Caspase-3蛋白随着组织异常程度的增加有逐渐下降的趋势，提示Livin蛋白的低表达可能对OLK癌变的发展起重要作用。

Caspase-3；口腔白斑；口腔鳞状细胞癌

1 材料与方法

1.1 材料 所有标本均选自郑州大学医学院一附院病理科1995～2006年存档的蜡块和口腔科活检或手术切取的组织（经10%福尔马林固定，石蜡包埋）。选取12例单纯增生型口腔白斑，38例异常增生型口腔白斑（其中轻度11例，中度13例，高度14例），37例口腔鳞状细胞癌（其中Ⅰ级11例，Ⅱ级14例，Ⅲ级12例）。10例口腔正常黏膜作为对照组。共97例，其中男76例，女21例；年龄（56.84±6.32）岁；部位：颊（50例），舌（47例）。

1.2 方法 采用免疫组化技术SP法对所有标本进行Caspase-3蛋白染色，并计算它的阳性表达。

1.3 统计学方法 资料采用绝对数和相对数进行表示，使用SPSS13.0进行统计学处理。Livin的表达率的比较采用χ2检验或直接概率。

2 结果

caspase-3蛋白的阳性表达位于细胞质／核，呈棕黄色颗粒，弥散分布。在正常黏膜组织和单纯增生型OLK组织中，Caspase-3蛋白均高表达，在异常增生型OLK组织中Caspase-3蛋白的阳性表达明显降低，表达率为63.16%；caspase-3蛋白在OSCC组织中低表达或表达于细胞质中，其阳性表达率为43.24%，且主要为中等及弱阳性染色。经χ2检验：单纯增生型OLK组的阳性表达率与正常组比较无统计学意义（P＞0.05），异常增生OLK组和鳞癌组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

按组织异常程度将组织分为八个级别，依次分别是正常黏膜、单纯增生型OLK、轻度异常增生OLK、中度异常增生OLK、重度异常增生OLK、鳞癌Ⅰ级、鳞癌Ⅱ级、鳞癌Ⅲ级。Caspase-3蛋白表达阳性程度随组织异常程度的增加而降低，rs=-0.349，P＜0.05，见表1。

表1 caspase-3蛋白在不同病变组织中的表达 （n，%）

3 讨论

凋亡（apoptosis）是正常体细胞维持稳定的重要保护机制之一，是调节机体组织平衡的重要机制，其过程受到严密的控制。基因异常改变细胞凋亡受抑制，最终导致肿瘤的发生和演进［1］。Caspase蛋白酶家族（即含半胱氨酸的天冬氨酸特异性蛋白酶）是细胞凋亡的中心环节。

正常时Caspase均以无活性的酶前体的形式存在于细胞内，并不具有生物学功能。Caspase在细胞凋亡中的作用主要有3个：①灭活阻止细胞凋亡的细胞内物质。②通过对细胞结构的直接酶解而促进凋亡（如：核纤层蛋白的破坏）。③通过对一些细胞骨架调节相关蛋白质的酶解而改变细胞结构，包括凝集素、FAK和由P21激活的激酶Ⅱ（PAK2），因这些蛋白分解失活而导致细胞凋亡。

在正常黏膜组织和单纯增生型OLK组织中，Caspase-3蛋白均高表达，在异常增生型OLK组织中Caspase-3蛋白的阳性表达明显降低，表达率为63.16%；Caspase-3蛋白在OSCC组织中低表达或表达于细胞质中，其阳性表达率为43.24%，且主要为中等及弱阳性染色。经X2检验，Caspase-3蛋白在各组织中阳性表达率的差异有统计学意义（P＜0.05）。在单纯增生型OLK组的阳性表达率为83.33%，与正常组比较，无显著性差异（P＞0.05）；与异常增生OLK组、鳞癌组比较，差异有显著性（P＜0.05）。结果提示，当上皮出现增生，特别是出现重度异常增生时，Caspase表达加强来促进异常增生细胞凋亡，进而拮抗细胞的增殖，从而维持细胞数目的稳定。但是相对于细胞增殖速度的增加，上皮异常增生中细胞的绝对凋亡率是降低的，异常增生细胞不断累积，预示着重度上皮异常增生的高度危险性。鳞状细胞癌一旦发生，此时Caspase-3的表达强度减弱，可能是此期Caspase-3的生物合成已受到某些因素影响，再不能正常发挥促进细胞凋亡的作用。Caspase-3表达强度在高分化组明显高于低分化组，提示癌细胞分化程度高，细胞凋亡调控机制障碍程度轻，癌细胞增殖较弱，患者预后较好。Caspase-3的表达强度随组织分化程度增高而增强，表明Caspase-3在癌组织中通过促进癌细胞凋亡而使恶性程度降低；从另一个角度看，Caspase-3是正常分化细胞所具有的，正常细胞向癌细胞转化的过程中易失去某些表型，因而有理由认为Caspase-3随着分化降低而表达减少，是肿瘤异常分化的结果。

OLK病因复杂、发病机制不明，在临床上可无任何症状，因此治疗重点应是防止或减少其恶性转变，治疗方法包括药物治疗和非药物治疗（手术、激光、冷冻），中医药也可以作为OLK的可行性治疗措施之一，如中药复方冬菊对4NQO诱导的大鼠舌白斑癌变的中药干预组cy-clin D1的阳性表达率明显低于癌变模型组［2］。

因此，早期检测Caspase-3有助于辨明口腔OLK是否发展成为OSCC，具有早期诊断的价值。

［1］Steller H.Mechanisms and genes of cellar suicide［J］．Science，1995，267（5263）：1445-1449．

［2］葛姝云，周曾同．中药复方冬菊对鼠舌白斑癌变的阻断作用［J］．上海交通大学学报（医学版），2006，26（10）：1119-1121．

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.05.035

1672-2779（2013）-05-0053-02

苏 玲

2013-02-17）