鸡弓形虫病研究进展

龙 祥，舒 兰，陈雪娇，江 涛 （长江大学动物科学学院，湖北荆州434025）

弓形虫病是由刚地弓形虫 （Toxoplasmagondii）寄生于人、畜、野生动物、鸟类及一些冷血动物体内所引起的人畜共患病。该病不但威胁人类健康，亦严重影响畜牧业发展。弓形虫病在人类和动物之间广泛流行，人类通过摄取未充分加热熟透的食物，饮用被卵囊污染的水，或者偶然接触到自然界中的卵囊而被感染［1］。然而，只有一小部分弓形虫感染的人和动物会表现出临床症状。目前，人类还不确定弓形虫病的严重程度是否取决于宿主本身的免疫能力还是寄生虫的感染剂量，或者是其他的因素［2］。过去人们认为，弓形虫病主要为隐性感染，危害不严重。近年来，随着研究的深入，人们发现弓形虫病的流行表现出许多新的特点，其危害远远高出人们的估计。因此，弓形虫病应当引起高度重视。

1 弓形虫的危害

弓形虫被认为是孕妇宫内感染导致胚胎畸形的五大病原体之一，虫体在胎盘组织内呈散点状分布，可裂解被侵袭细胞，留下细胞残迹或呈絮状物，导致局灶性组织缺损、周围炎症细胞增殖等现象。先天性弓形虫病人80%的有精神发育障碍，50%有视力障碍。也可伴有全身表现，如在新生儿期有发热、腹泻、黄疽、肝脾肿大、皮疹、心肌炎等。获得性弓形虫病患者在免疫力低下时呈显性感染，如AIDS患者、器官移植和肿瘤病人等，严重时可致患者死亡［3］。

在全世界范围内，弓形虫在人类和动物之间广泛流行，据估计有25%的世界人口携带这种寄生虫［4］。在最近的全球报告中，通过观察自然感染弓形虫病的鸡的临床实验得出一个结论，临床弓形虫病在鸡中非常罕见。然而，在弓形虫的流行病学中，自由放养的鸡群被认为是最重要的宿主，对猫和人类来说是一种重要的传染源，猫是弓形虫的终末宿主，随猫粪便排出的卵囊被鸡啄食后，在鸡体内继续完成发育，人类通过接触病鸡或食用未煮熟的产品而感染弓形虫。另外，对于那些自由觅食的禽类 （如散养的鸡），其弓形虫的感染率可以较好地反映人们居住环境 （土壤，水等）中弓形虫卵囊的含量。因此，研究鸡弓形虫病具有重要的公共卫生学意义［5］。

2 鸡弓形虫病的发现

1939年，德国兽医Hepding最早报道了鸡弓形虫病临床变化［6］。2005年国外学者报道了以色列商品化散养鸡中的弓形虫感染情况，血清学阳性率为53．4%，其中96只鸡中有46．6%分离到了弓形虫，尼加拉瓜、巴西、智利等国也报道了鸡弓形虫病［7］。国内也有多起鸡群感染弓形虫的报道。1980年，阎长清等［8］在鸡的肝、脾、肺和淋巴结中检出弓形虫原虫，并通过小白鼠分离到呈新月形的虫株。与哺乳动物相比，鸡群与其他鸟类弓形虫感染较为普遍，存在多种基因型，是重要的弓形虫感染源。

尽管在禽类中，关于弓形虫病自发感染的报道不如其他种类的常见，但鸡携带弓形虫的几率很大，为弓形虫的传播提供了载体，弓形虫病在养鸡场中可以获得流行的机会［9］。在近代研究弓形虫种群的报告中显示弓形虫有多种基因型，在北美和欧洲主要发现弓形虫的克隆谱系有3种基因型I、II、III，在南美发现了更大的遗传多样性，包括大量基因隔离群，目前还发现不同的非典型基因型中的特殊等位基因存在于不同的遗传标记区域上［10］。

3 鸡弓形虫病的调查

自由放养的鸡和小型哺乳动物在弓形虫的生活史中起着非常重要的作用，因为被弓形虫感染的猫向自然界中散播的卵囊容易被它们采食。尽管鸡很容易被弓形虫感染，但临床症状表现并不明显。目前只有少数报告报道了临床上鸡的弓形虫病，鸡视神经交叉的坏死被看作是鸡弓形虫病的典型症状。在最近40a中，具有这种特征的鸡弓形虫的临床症状的病例报道没有在文献中出现过。由于前人没有留下足够的可供参考的材料，所以这些报道也许是关于鸡弓形虫研究的开始或者是没有被承认的推测［11］。在美国，曾有2篇文章报道过关于鸡弓形虫临床症状，Ostendorf等［12］报道在一个印第安纳州的农场中的鸡死于弓形虫引起的脑炎和脉络膜视网膜炎；Goodwin等［13］用免疫组织化学诊断出乔治亚州的3只鸡死于末梢神经炎，当然，这其中不能完全排除是孢疹病毒的可能性。

自1939年首先报告鸡弓形体病以来，随后一些国家和地区也陆续有所报道。我国陈义民等［14］1981年在甘肃靖远县某农场用IHA检查206只鸡，检出弓形虫抗体阳性鸡6只，阳性率为2．91%，同年刘雪筠等［15］在广东省佛山某畜牧场检出鸡弓形体病，2500只雏鸡中死亡287只，死亡率为11．48%。据任家琰［16］报道，山西省鸡弓形虫病阳性检出率为1．14%，吕元聪［17］报道我国14省的部分地区鸡弓形虫抗体的平均阳性率为15．69%，赵玉强等［18］调查显示山东省部分县市的鸡弓形虫感染率较低为2．00%，苑文英等［19］报道河北省鸡弓形虫病的平均阳性率为39．23%，陈才英［20］报道青海省大通县鸡场弓形虫抗体平均阳性率为10．6%，江涛等［21］报道荆州市市售鸡弓形虫的平均感染率为25．17%。由此看出，鸡群感染弓形虫比较普遍，可能是弓形虫感染其他动物和人类的重要潜在传染源，应当引起人们的高度重视。

4 弓形虫的检测

4．1 涂片法

采取肝和心血涂片，瑞氏染色，镜检，在血涂片上可发现视野中有多量的，呈一端较尖另一端钝圆、胞浆红色、中央有紫红色核，如香焦形、橘瓣形或椭圆形的弓形虫滋养体，大小不均。在血液涂片中极易查到，数量较多，一个视野少由1～3个，多则一簇簇，一般可见3～7个，而且基本都在血浆中，在个别红细胞内也有弓形虫存在，白细胞中尚未发现［22］。

4．2 改良凝集试验 （MAT）

Dubey等［23］曾通过改良凝集试验用8倍的稀释液检测鸟血清中的弓形虫抗体。将弓形虫速殖子通过静脉接种的方式感染35日龄的健康雏鸡，发现除感染杂菌死亡的1只以外，其余所有接种雏鸡通过改良凝集试验 （MAT）检测证实均感染了弓形虫，且在感染后第7天即有弓形虫特异抗体出现，一直持续到试验结束，其抗体最高峰出现在感染后21d（抗体滴度为1︰640）。

4．3 胶体金标记

王艳华等［24］利用胶体金标记弓形虫代谢分泌抗原，利用双抗原夹心法研制出了弓形虫抗体金标检测试纸条，在对弓形虫阴、阳性血清检测中，与弓形虫间接血凝试验 （IHA）检测结果符合率为82．4%，其中弓形虫IHA检测阳性的血清金标试纸条检测全部为阳性。该试纸条法的灵敏度明显高于IHA法，同时具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性，适用于弓形虫病早期检测和诊断，操作简单，特别适合在基层推广应用。

4．4 PCR检测

颜超等［25］用PCR方法对接种雏鸡体内的弓形虫DNA进行检测，发现最早在感染后14d于雏鸡心脏内检测出，并一直持续到感染后28d，将PCR检测结果为阳性的组织通过盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理，制作成组织悬液接种至小白鼠体内，并分离得到了弓形虫类似体。提取该生物的DNA，经特异PCR检测方法及测序证实分离到的弓形虫类似体为刚地弓形虫。对本次试验中雏鸡PCR检测阳性的组织进行统计分析，发现心脏是本次感染雏鸡检出率最高的组织，其次是肺、脑、脾，再次是眼，最后是肝脏。

除上述方法外，在实际操作过程中还有ELISA等方法［26］。

5 小结

人类感染弓形虫后通常不会表现出临床症状，但对于免疫功能不全的人，会继发导致其他严重的疾病，甚至会引起死亡。在妊娠期间，弓形虫会通过胎盘引起胎儿流产、小产或畸形。目前，认为鸡排放到自然界中的带有弓形虫卵囊的粪是重要的传染源。近几年，通过大量的实验研究，鸡弓形虫病诊断研究方面已取得较大进展，一些研究成果已经或正在对弓形虫病的防治产生积极影响。目前尚无治疗弓形虫病的理想特效药物，实践中应用较多是磺胺类药物。而此类药物在感染后期不能抑制虫体进入组织或细胞繁殖，该病多与其他细菌病或病毒病混合感染，故此在用药后不能完全制止病鸡死亡。无论弓形虫是单纯感染还是混合感染，早期诊断和治疗尤为重要，否则难以收到满意效果。加大对弓形虫病的研究，开展鸡群感染情况的调查以及此类感染在人弓形虫病和其他动物弓形虫病流行中的作用，对于提高我国弓形虫病防控具有重要意义。

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