木蝴蝶种子化学成分研究

魏晓楠，林彬彬，谢国勇，李建文，秦民坚

[摘要] 目的：研究紫葳科Bignoniaceae植物木蝴蝶Oroxylum indicum种子的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等手段进行分离纯化，通过化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果：从木蝴蝶种子的95%乙醇提取物中分离并鉴定了20个化合物，分别为木蝴蝶苷A（1）、木蝴蝶苷B（2）、白杨黄素（3）、黄芩苷元（4）、槲皮素（5）、芹菜素（6）、山柰酚（7）、槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷（8）、羽扇豆醇（9）、2α，3β-二羟基羽扇豆醇（10）、赤松素（11）、二氢赤松素（12）、胆甾-5-烯-3，7-二醇（13）、连翘环己醇（14）、异连翘环己醇（15）、zarzissine（16）、（E）-银松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、腺苷（18）、β-谷甾醇（19）、β-胡萝卜苷（20）。结论：化合物11～13，15～18为首次从木蝴蝶植物中分离得到，其中除化合物18外，其余6个化合物均为首次从紫葳科植物中获得。

[关键词] 木蝴蝶属；木蝴蝶；化学成分

木蝴蝶为紫薇科木蝴蝶属植物木蝴蝶Oroxylum indicum（L.）Vent 的成熟种子，原名千张纸，少数民族地区称之为“三百两银药”，主要分布于四川、贵州、云南、广西、海南、广东及福建。木蝴蝶性味苦、甘、凉，入肺、肝、胃经。有清肺、利咽、止咳、疏肝、和胃之功效，主治肺热咳嗽、喉痹、音哑、肝胃气痛、疮口不敛[1]。已有文献报道指出，在木蝴蝶成熟种子中含有大量的具有生物活性的黄酮类化合物，如黄芩苷、黄芩苷元、白杨黄素、槲皮素等[2]。现代药理研究表明，木蝴蝶药材所含有的成分具有抗微生物活性和抗炎作用，对烟曲霉、黑曲霉、念珠菌、黄曲霉等真菌有良好的抑菌活性，同时对多种致病细菌有抑制活性[3]。到目前为止对木蝴蝶的化学成分研究报道较少，药效物质基础有待进一步明确。为了进一步合理利用该药用资源，作者对木蝴蝶种子进行了化学成分的研究，从木蝴蝶种子的95%乙醇提取物中分离并鉴定了20个化合物，其中化合物11～13，15～18为首次从木蝴蝶植物中分离得到，其中除化合物18外，其余6个化合物均为首次从紫葳科植物中获得。

1 材料

Bruker ACF-500型核磁共振光谱仪，用TMS作内标。柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；薄层硅胶板（烟台江友硅胶开发有限公司）；凝胶Sephadex LH-20（Pharmacia product.）；所用试剂均为分析纯。

木蝴蝶种子于2011年购于安徽亳州市，经中国药科大学中药资源教研室秦民坚教授鉴定为紫葳科植物木蝴蝶O. indicum，凭证标本（No.Wei-061203）保存于中国药科大学中药资源学教研室。

2 提取和分离

木蝴蝶药材10 kg，粉碎并用95%乙醇加热回流提取，提取3次，每次2 h，提取液回收乙醇后浓缩成浸膏（700 g），将浸膏加适量硅胶拌样，进行硅胶柱色谱分离，以氯仿-甲醇系统（100∶1～1∶1）梯度洗脱，得到的20个流分（Fr.A～T）。Fr.E经硅胶（石油醚-乙酸乙酯40∶1～1∶1）柱色谱，Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物9（60 mg）；Fr.F经硅胶（石油醚-乙酸乙酯35∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物19（40 mg）；Fr.H经硅胶（石油醚-乙酸乙酯30∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物3（50 mg）；Fr.I经硅胶（石油醚-乙酸乙酯25∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物10（10 mg），11（12 mg），12（9 mg），13（10 mg）；Fr.G经硅胶（石油醚-乙酸乙酯20∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物4（50 mg），5（12 mg），6（15 mg）；Fr.H经硅胶（氯仿-甲醇25∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物20（19 mg），7（16 mg），8（10 mg），14（10 mg），15（8 mg）；Fr.I经硅胶（氯仿-甲醇20∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱纯化得化合物1（20 mg），16（10 mg），17（12 mg），18（10 mg），Fr.Q经硅胶（氯仿-甲醇8∶1～1∶1）柱色谱、Sephadex LH-20（甲醇）柱纯化得化合物2（18 mg）。

3 结构鉴定

化合物1 黄色粉末；ESI-MS m/z 433[M+H]⁺ ；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 5.01（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），7.02（1H，s，H-3），7.06（1H，s，H-8），7.57～7.64（3H，m，H-3′～5′），8.03～8.11（2H，dd，J=1.5，12.0 Hz，H-2′，6′），12.61（1H，s，5-OH），8.58（1H，s，6-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.4（C-2），104.7（C-3），182.5（C-4），146.5（C-5），130.8（C-6），149.2（C-7），94.4（C-8），151.6（C-9），106.1（C-10），130.6（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.9（C-4′），100.9（C-1″），73.1（C-2″），77.3（C-3″），69.7（C-4″），75.8（C-5″），60.6（C-6″）。以上数据与文献[4]一致，鉴定为木蝴蝶苷A。

化合物2 黄色粉末；ESI-MS m/z 595[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 4.22（1H，d，J=7.8 Hz， H-1），5.05（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），7.00（1H，s，H-3），7.14（1H，s，H-8），7.62（3H，m，H-3′～5′），8.10（2H，dd，J=1.9，8.1 Hz，H-2′，6′），8.51（1H，s，6-OH），12.58（1H，s，5-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.5（C-2），104.5（C-3），182.5（C-4），146.3（C-5），130.7（C-6），149.2（C-7），94.3（C-8），151.4（C-9），106.1（C-10），130.4（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.8（C-4′），103.6（C-1″），73.5（C-2″），76.8（C-3″），69.6（C-4″），75.6（C-5″），69.1（C-6″），100.8（C-1），73.1（C-2），77.1（C-3），70.2（C-4），75.6（C-5），61.1（C-6）。以上数据与文献[4]一致，鉴定为木蝴蝶苷B。

化合物3 淡黄色粉末；ESI-MS m/z 255[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.82（1H，s，5-OH），10.89（1H，s，7-OH），8.07（2H，dd，J=1.3，7.5 Hz，H-2′，6′），7.65（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.57（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），6.97（1H，s，H-3），6.22（ 1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.53（1H，d，J=2.0 Hz，H-8）. 以上数据与文献[5]一致，鉴定为白杨黄素。

化合物4 淡黄色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.70（1H，s，5-OH），8.06（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），7.58（3H，d，J=7.0 Hz，H-3′～5′），6.92（1H，s，H-3），6.63（1H，s，H-8）。以上数据与文献[6]一致，鉴定为黄芩苷元。

化合物5 黄色粉末；ESI-MS m/z 303[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.47（1H，s，5-OH），7.67（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），7.54（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′），6.18（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），6.40（1H，d，J=1.7 Hz，H-8）。以上数据与文献[7]一致，鉴定为槲皮素。

化合物6 淡黄色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.95（1H，s，5-OH），10.54（2H，br s，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.93（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.77（1H，s，H-3），6.19（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.48（1H，d，J=1.8 Hz，H-8）。以上数据与文献[8]一致，鉴定为芹菜素。

化合物7 黄色针晶（甲醇）；ESI-MS m/z 287[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.79（1H，s，5-OH），10.27（3H，br s，3，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.58（1H，s，H-6），6.74（1H，s，H-8）。以上数据与文献[9]一致，鉴定为山柰酚。

化合物8 棕黄色粉末；ESI-MS m/z 435[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（pry-d5，300 MHz）δ： 8.35（1H，d，J=2.1 Hz，H-2′），7.26（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），8.13（1H，dd，J=2.1，8.4 Hz，H-6′），6.70（1H，d，J=2.1 Hz，H-6），6.67（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.06（1H，d，J=5.7 Hz，Ara-H-1）。以上数据与文献[10]一致，鉴定为槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷。

化合物9 白色无定形粉末；ESI-MS m/z 427[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 4.54（1H，s，H-29a），4.68（1H，s，H-29b）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 150.1（C-20），109.5（C-29），18.9（C-30），39.2（C-1），28.0（C-2），76.7（C-3），39.5（C-4），54.8（C-5），17.9（C-6），35.0（C-7），42.3（C-8），49.8（C-9），37.5（C-10），20.4（C-11），24.6（C-12），38.2（C-13），42.5（C-14），27.1（C-15），36.6（C-16），43.0（C-17），47.7（C-18），47.3（C-19），29.1（C-21），40.1（C-22），28.0（C-23），15.6（C-24），15.8（C-25），15.7（C-26），14.3（C-27），17.7（C-28）。以上数据与文献[11]一致，鉴定为羽扇豆醇。

化合物10 白色无定形粉末；ESI-MS m/z 443[M+H]⁺；¹H-NMR（CDCl3，500 MHz） δ： 4.57（1H，s，H-29a），4.69（1H，s，H-29b），3.67（1H，m，H-2），2.97（1H，d，J=9.5 Hz，H-3）。以上数据与文献[4]一致，鉴定为2α，3β-二羟基羽扇豆醇。

化合物11 白色粉末；ESI-MS m/z 213[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.49（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.36（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.25（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.02（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.58（2H，d，J=1.6 Hz，H-2，6），6.27（1H，s，H-4）；¹³C-NMR（CDCl₃，75 MHz）δ： 140.2（C-1），138.3（C-1′），129.6（C-α），128.7（C-β），156.9（C-3，5），127.9（C-3′，5′），106.2（C-2，6），126.6（C-2′，6′），102.3（C-4），127.8（C-4′）。以上数据与文献[12]一致，鉴定为赤松素。

化合物12 白色粉末；ESI-MS m/z 215[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.28（2H，d，J=7.1 Hz，H-2′，6′），7.18（3H，t，J=8.9，7.6 Hz，H-3′～5′），6.24（2H，s，H-2，6），6.19（1H，s，H-4），2.85（4H，m，H-α，β）。以上数据与文献[13]一致，鉴定为二氢赤松素。

化合物13 白色粉末；ESI-MS m/z 403[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，500 MHz）δ： 5.72（1H，s，H-6），3.62（1H，m，H-7），3.28（1H，m，H-3）。以上数据与文献[14]一致，鉴定为胆甾-5-烯-3，7-二醇。

化合物14 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 4.20（1H，m，H-8），3.90（1H，m，H-4）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 70.0（C-1），36.1（C-2），31.7（C-3），69.8（C-4），31.8（C-5），36.1（C-6），45.1（C-7），58.8（C-8）。以上数据与文献[15]一致，鉴定为连翘环己醇。

化合物15 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 3.90（1H，m，H-4），4.20（1H，m，H-8）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 71.2（C-1），34.4（C-2），31.1（C-3），67.4（C-4），31.1（C-5），34.4（C-6），43.0（C-7），58.7（C-8）。以上数据与文献[15]一致，鉴定为异连翘环己醇。

化合物16 白色粉末；ESI-MS m/z 136[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.75（1H，br s，NH），8.11（1H，s，H-3），8.09（1H，s，H-6），7.04（2H，s，NH₂）。以上数据与文献[16]一致，鉴定为zarzissine。

化合物17 淡棕色粉末；ESI-MS m/z 375[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CD₃OD，500 MHz）δ： 7.52（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.33（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.23（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.07（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.67（1H，s，H-2），6.49（1H，t，J=2.1 Hz，H-4），6.84（1H，s，H-6），4.90（1H，d，J=7.4 Hz，H-1″），3.93～3.44（2H，m，H-2″，6″）；¹³C-NMR（CD₃OD，125 MHz）δ： 138.7（C-1），104.7（C-2），159.7（C-3），107.4（C-4），160.5（C-5），108.8（C-6），128.6（C-7），129.7（C-8），130.1（C-1′），129.6（C-2′，6′），127.6（C-3′，5′），140.9（C-4′），102.5（C-1″），74.9（C-2″），78.1（C-3″），71.5（C-4″），78.3（C-5″），62.6（C-6″）。以上数据与文献[17]一致，鉴定为（E）-银松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物18 白色粉末；ESI-MS m/z 268[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 8.34（1H，s，H-2），8.14（1H，s，H-8），5.88（1H，d，J=6.2 Hz，H-1′），7.30（2H，s，NH₂），5.41（1H，d，J=6.2 Hz，2′-OH），5.14（1H，d，J=4.7 Hz，3′-OH），5.38（1H，dd，J=4.6，7.2 Hz，5′-OH），4.61（1H，dd，J=6.1，5.2 Hz，H-2′），4.15（1H，dd，J=4.7，3.5 Hz，H-3′），3.97（1H，dd，J=3.3，3.5 Hz，H-4′），3.68（1H，m，H-5′a），3.56（1H，m，H-5′b）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，125 MHz）δ： 156.1（C-6），152.3（C-2），149.0（C-4），139.8（C-8），119.3（C-5），87.9（C-1′），85.8（C-4′），73.4（C-2′），70.6（C-3′），61.6（C-5′）。以上数据与文献[18]一致，鉴定为腺苷。

化合物19 白色粉末，mp 142～143 ℃，与β-谷甾醇对照品的混合熔点不下降。且经TLC多种体系检查，确定化合物19为β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物20 白色粉末，mp 290～293 ℃，与β-胡萝卜苷对照品的混合熔点不下降。且经TLC多种体系检查，确定化合物20为β-胡萝卜苷（β-daucosterol）。

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Chemical constitunents of seeds of Oroxylum indicum

WEI Xiao-nan， LIN Bin-bin， XIE Guo-yong， LI Jian-wen， QIN Min-jian*

（Department of Resources Science of Traditional Chinese Medicines， State Key Laboratory of Natural Medicines，

China Pharmaceutical University， Nanjing 211198， China）

[Abstract] Objective： To study the chemical constituents in the seeds of Oroxylum indicum. Method： Twenty compounds were isolated and purified by silica gel， and Sephadex LH-20 column chromatography， and their structures were determined by spectroscopic analysis including NMR and MS. Result： Twenty compounds were isolated and identified as oroxin A （1），oroxin B （2）， chrysin （3）， baicalein （4）， quercetin （5）， apigenin （6）， kaempferol （7）， quercetin-3-O-ara-binopyranoside （8）， lupeol （9）， lup-20（29）-ene-2α，3β-diol （10）， pinosylvin （11）， dihydropinosylvin （12）， cholest-5-ene-3，7-diol （13）， rengyol （14）， isorengyol （15）， zarzissine （16）， （E）-pinosylvin-3-O-β-D-glucopyranoside （17）， adenosine（18）， sitosterol （19） and daucosterol （20）. Conclusion： Compounds 11-13 and 15-18 were obtained from the genus Oroxylum for the first time， and except compound 18， the remaining 6 compounds were obtained from the family Bignoniaceae for the first time.

[Key words] Oroxylum； Oroxylum indicum； chemical constitunents

doi：10.4268/cjcmm20130212

[责任编辑 孔晶晶]