女性泌尿生殖道衣原体与支原体检测及药敏分析

韩婷梅 郭晓光 芦洁

沙眼衣原体和支原体是主要寄生于人类泌尿生殖道的原核细胞型微生物，是非淋菌性宫颈炎(NGU)的主要病原体，不仅可引起泌尿生殖道炎症，亦可导致自发性流产，新生儿体重不足，不孕不育等多种泌尿生殖道疾病［1，2］，其感染有逐年上升的趋势。近年来由沙眼衣原体(CT)和支原体所引起的泌尿生殖道疾病发病率呈上升趋势，加之支原体耐药株不断上升，给治疗效果带来困难，因此治疗前进行病原检测和药敏试验，根据药敏结果来选择用药，是提高治疗效果的有效手段。为了解本地区女性泌尿生殖道感染患者CT、支原体感染情况及支原体对抗生素的敏感情况，对967例疑似女性泌尿生殖道感染患者的标本进行了分析，现将结果分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 检测人群 2009年1月至2012年12月我院皮肤科、妇产科收治疑似为泌尿生殖道感染女性患者967例，受检者均严格按要求取材送检，所有患者取标本前一周均未使用过任何抗生素类药物。年龄均在18～61岁之间，平均年龄29.3岁。其中，20岁以下疑似患者89人，占9.2%;20～40岁疑似患者698人，占 72.2%;40岁以上疑似患者 180人，占18.6%。所有患者均有不同程度的泌尿生殖道感染症状，临床症状最短1周，最长2年，在治疗前采集标本。

1.2 标本采集 按常规操作，患者消毒外阴后，用阴道窥器扩引阴道，先用消毒棉拭子拭去宫颈口分泌物，再用另一无菌拭子伸入宫颈2～4 cm处，旋转2周，并至少停留20 s取宫颈分泌物及带柱状上皮细胞的材料的样本，均用配套的无菌容器立即送检。取样拭子不可碰阴道壁，轻轻取出。留取2份标本，分别送检CT和支原体。

1.3 试剂

1.3.1 沙眼衣原体检测为胶体金法，采用上海凯创生物技术有限公司生产的CT抗原检测试剂盒(产品标准编号YZS/国1774-2009)，严格按说明书进行操作。

1.3.2 支原体培养、鉴定采用贝瑞特生物技术(郑州)有限责任公司生产的Uu和Mh培养鉴定、计数、药敏剂盒(产品标准编号YZS/豫0096-2005)。

1.4 方法

1.4.1 CT实验 将所得第一份临床样品放入含有溶液A(含0.2 ml NaOH溶液)的样品处理管中，2 min后加入等量的溶液B(含0.2 ml HCl溶液)，充分混匀后滴2～3滴在检测试剂盒的加样空中，10 min判读结果(有些阳性样品可在1 min后出现结果，为确保阴性结果请勿在15 min后判断结果)。

1.4.2 支原体实验 将50 ul样本培养基试剂加入试剂条C-空白孔中，并将所得第二份临床标本立即接种于样本的液体培养基试剂中，棉拭子插入培养液中充分振洗并放置5 min，然后在瓶壁上挤干拭子，弃拭子后充分混匀接种了样本的培养基，用加样器分别准确量50 ul接种到试剂条余下各孔中(除C-)，然后再往试剂条的每一孔中加一滴无菌石蜡油(约50 ul)盖上盖子后将剩余培养液分两瓶连同试剂条一起置35℃ ～37℃的温箱中培养，解脲脲原体Uu培养计数24 h内完成，人型支原体Mh培养计数48 h内完成。

1.5 判断原则

1.5.1 沙眼衣原体判断 质控线(C)有一条红线，检测线(T)无红线出现为阴性;质控线(C)有一条红线，检测线(T)也有一条红线出现为阳性;质控线(C)不出现红线，结果无效。

1.5.2 支原体判断 空白孔应为阴性，否则试验无效。对照孔阴性报告Uu和 Mh培养为阴性;对照孔阳性，有 Uu和(或)Mh生长，24 h试剂由橙黄变红且清亮为阳性提示有Uu生长，颜色不变为Uu阴性;继续观察，48 h试剂由橙黄变红为Mh阳性。药敏结果判断，当有支原体生长时，高低浓度药敏孔黄色为敏感，如低浓度孔变为红色，高浓度为黄色，判为中介;高低浓度都变为红色为耐药。

2 结果

2.1 衣原体、支原体阳性检出率 967例标本中，检测出578例衣原体、支原体感染，检出率为59.8%。其中检出单纯解脲支原体(Uu)阳性349例(36.1%)，单纯人型支原体(Mh)阳性27例(2.8%)及Uu、Mh混合感染阳性105例(10.9%);同时检出单纯沙眼衣原体(CT)阳性49例(5.1%)，CT、Uu阳性16例(1.7%)，CT、Mh阳性 3 例(0.3%)，CT、Uu、Mh阳性5例(0.5%)。结果见表1。

2.2 患者年龄段分布 578例衣原体、支原体感染患者20岁以下的患者7例，占1.2%;20～40岁的患者416例，占72%;40岁以上的患者155例，占26.8%，结果见表2。

2.3 支原体药敏结果 505例中Uu对10种抗生素敏感率在80%以上的有强力霉素(90.96%)、美满霉素(89.86%)及交沙霉素(81.64%)三种。CT、Mh及混合感染患者对抗生素的敏感性普遍降低，但强力霉素、美满霉素、交沙霉素具有较强的体外抗菌活性。结果见表3。

表1 967例衣原体、支原体培养阳性阳性结果分布情况

表2 578例衣原体、支原体感染不同年龄段分布情况(例，%)

表3 505例支原体感染者药敏结果比较(例，%)

3 讨论

衣原体、支原体感染率随着性的性活动的增加呈上升的趋势。患者主要集中健康人性活跃期的中青年群体，年龄主要分布在20～40岁之间，而且多数病例有不洁性生活史，故应加强对青壮年的健康教育，提高人口文化素质，法制观念，性道德及性行为知识和自我保护意识。

支原体是能在人工培养条件下独立生存的最小微生物，支原体是一种介于细菌和病毒之间原核细胞型微生物，由于没有细胞壁，形态无定形，不能被革兰氏染液所着色，姬母染色也不能将支原体与标本中的碎片颗粒相区别，因此支原体不能进行镜下形态学检测。所以支原体培养是实验室诊断的主要方法。

由于支原体是一类无细胞壁的原核细胞型微生物，因而对β-内酰胺类抑制细胞壁合成的抗生素(青霉素、头孢菌素等)不敏感。临床上多采用大环内酯类、喹诺酮类、四环素类等干扰蛋白质合成的药物进行治疗。从药敏结果来看，治疗解脲支原体的首选药应为四环素类中强力霉素、美满霉素和交沙霉素;而在喹诺酮类中，司帕沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星耐药性较高，说明本地区喹诺酮类药物广泛用于泌尿道感染，而造成此类药耐药性较高，且混合感染患者的耐药率明显高于单纯Uu和单纯Mh感染者。另外支原体对强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素等的敏感性呈下降趋势，可能是近年来抗生素的滥用导致了大量耐药株的不断出现，使原来敏感的药物出现耐药［3，4］。因此尽可能进行支原体培养及药敏试验，监测抗生素耐药性的变迁，同时根据药敏试验结果选用药物，是减缓耐药株出现的最有效方法之一。

女性感染支原体后症状不明显，许多女性只会有轻度不适，易被患者忽视，所以没有及时就医，造成女性感染支原体阳性增高。另外很多患者未与性伴侣同时就医，或自己买药用药，造成了反复感染，迁延不愈或慢性感染。这是抗生素滥用、疗程不规范及随意使用抗生素作为预防用药造成支原体耐药菌株增多的重要原因。所以我们在治疗疑似支原体感的患者时，应对患者及早检测支原体和进行药敏试验，选择高效抗生素，实施足剂量，足疗程用药，同时还要掌握从低起点用药，品种不易更换频繁，用药时间不得随意延长等原则，必要时可采取联合用药，以减少耐药菌株的产生和流行［3］。

根据近几年研究资料显示，各型支原体感染率呈上升趋势。尤其是Uu+Mh混合感染率增高，其耐药率升高，可见耐药性在病原体之间传播的严重性［4，5］，因此定期检测泌尿生殖道支原体的感染情况及药敏情况是非常必要的。

［1］Walter G Gunter S，Stefan J，et al.Ureaplsma urealyticum Meningitis in an adult patient.J.C lin Microbiol，2008，46(3):1141-1143.

［2］Holmes KK，Per M.Sexually Transmitted diseasea.3thed.New York:McGraw-Hill Companise Inc，1999:533-275.

［3］黄金印，罗衬银.女性泌尿生殖道衣原体支原体检测及药敏分析.中国医药指南，2012，10(31):14-15.

［4］郭晓光，王海兰，韩婷梅.泌尿生殖道解脲脲原体和人型支原体感染情况及药敏分析.中华临床医师杂志(电子版)，2010，04(11):2300-2301.

［5］韩婷梅.396例慢性前列腺炎的性病病原体检测报告.中原医刊，2002，29(05):35.