雌孕激素对孕鼠肝脏、胎盘组织FXR/BSEP受体系统表达的影响研究

张利平 刘 建 黄楠

（南充市中心医院妇产科，四川 南充 637000）

雌孕激素对孕鼠肝脏、胎盘组织FXR/BSEP受体系统表达的影响研究

张利平 刘 建 黄楠

（南充市中心医院妇产科，四川 南充 637000）

目的 通过测定孕酮、苯甲酸雌二醇诱发的孕鼠肝内胆汁淤积症模型肝脏、胎盘组织中法尼醇受体（farnesoid X receptor，FXR）及胆盐输出泵（bile salt export pump，BSEP）的表达情况，探讨雌孕激素诱导妊娠期肝内胆汁淤积症（Intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）过程中FXR和BSEP的作用机制。方法 孕15dSD大鼠60只随机分成对照组、实验组（A组、B组），分别给予生理盐水，孕酮,苯甲酸雌二醇。于用药前、用药后测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆酸（TBA）总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）水平；测定胎鼠生长发育情况；H.E染色观察肝脏、胎盘组织形态学变化，免疫组化法测定肝脏及胎盘BSEP、FXR的表达情况。结果 用药后，实验组各项血清生化指标明显高于对照组水平（P＜0.05）；对照组用药前后各项血清生化指标无明显变化（P＞0.05）；实验组用药后各项血清生化指标较用药前显著升高（P＜0.05）实验组胎鼠体质量、死胎数与对照组相比较有显著差异（P＜0.05）。H.E染色观察到A、B组孕鼠肝脏出现肝内胆汁淤积典型表现。免疫组化法检测到，实验组肝脏FXR表达升高，BSEP表达降低，与对照组相比差异具有显著性（P＜0.05）。此外，在孕鼠胎盘也发现了少量FXR和BSEP的表达。结论 雌激素具有明确的诱发孕鼠肝内胆汁淤积症的作用，孕激素也可诱导孕鼠肝内胆汁淤积症。雌激素诱导的机制可能是通过上调肝脏FXR的表达及下调肝脏BSEP的表达来影响胆汁酸的合成与代谢，进而导致了肝内胆汁淤积的发生；孕激素引起ICP，可能因为某些孕酮代谢产物诱导了BSEP的传输抑制作用致胆汁酸淤积；同时孕酮代谢障碍造成非结合胆红素增高也是引起胆汁淤积的原因之一。孕激素可以强化雌激素诱导ICP的作用。

孕鼠；胆汁淤积；血清生化指标；胆盐输出泵；法尼醇受体

妊娠肝内胆汁淤积症（Intraheptic Cholestasis of Pregnancy ICP）是妊娠中晚期特有的并发症，临床以皮肤瘙痒和黄疸为特点，实验室以母、儿循环及羊水高胆汁酸水平为生化特征。母体胆汁酸升高、胎盘胆汁酸转运障碍、胎儿胆汁酸代谢异常，从而发生自发性早产、胎儿宫内窘迫、围生儿死亡、新生儿窒息等现象[1]。ICP的病因尚不明了，目前认为与激素、遗传、环境、免疫等有关。

ICP患者血中雌，孕激素随孕周增高，用大鼠复制肝内胆汁淤积的动物模型发现其肝脏和胎盘上雌，孕激素受体表达增强；现已成功用大鼠复制出了ICP雌激素模型。而有关孕激素的研究还处于探索阶段，孕激素代谢障碍，代谢产物的作用使胆汁酸在肝脏和胎盘淤积可导致ICP的发生；孕酮具有松弛胆囊平滑肌的作用也可能是引起淤胆的原因，但具体机制有待进一步研究。ICP患者血中孕激素水平增高与雌激素一致，在妊娠末期达180～300mmol/L。在ICP发病中它与雌激素的相互作用怎样？目前尚无报道。近年来，研究认为ICP的发病是母体肝脏、胎盘胆汁酸转运异常和（或）代谢过程障碍而致，是一种有关母体与胎儿体内的胆汁酸在通过肝脏、胎盘转运和代谢过程中发生了异常而产生的“胎儿-母体疾病”（Fetal-Maternal Disease），胆酸在肝脏、胎盘的代谢紊乱可能是ICP的发病机制[1]。

法尼醇受体（farnesoid X receptor，即人的FXR；大鼠的Fxr）是一种孤儿核受体，为核受体超家族成员之一。研究发现：FXR是一种内源性的胆汁酸受体，能被生理浓度的鹅脱氧胆酸、石胆酸、脱氧胆酸激活，继而活化或抑制相关靶基因的表达，发挥其对胆酸代谢的调节作用。FXR的主要功能为：①在胆汁酸的激活下，阻遏编码胆固醇7α羟化酶（cholesterol 7a-hydroxylase，CYP7A1）的基因转录，CYP7A1是合成胆汁酸的限速酶，使胆汁酸生成减少；②激活编码回肠胆汁酸结合蛋白（ideal bile acid binding protein，I-BABP）的基因，胆汁酸结合蛋白在回肠结合胆酸，从而抑制胆汁酸在回肠的重吸收；③促进有机阴离子转运多肽8（organic anion transporting polypeptide，OATP8）基因的表达，增加非结合型胆盐和有机阴离子在肝窦基侧膜的摄入[2]。FXR的表达水平与血清胆酸浓度密切相关。已有雌激素对FXR的具体调节机制的研究，但目前尚未有孕激素对FXR的表达影响研究的报道。胆盐输出泵（bile salt export pump，即人的BSEP；大鼠的Bsep）是一种对ATP具有依赖性的胆盐转运器[3-7]，在高胆酸部位如肝脏、胎盘、肠、肾脏等表达。在肝脏：BSEP主要位于肝毛细胆管膜侧，以微管结合囊泡的形式运输；在胎盘，BSEP往往在合体滋养层的顶侧膜上表达[3]，能转运各种结合型胆盐，参与胆汁的代谢和分泌。任何影响BSEP功能或数量的因素也可能影响胆酸的载体转运过程而导致肝内胆汁淤积，如激素水平、环境改变。BSEP在肝脏、胎盘的表达与雌激素的关系已有初步研究，孕酮代谢产物可以诱导BSEP的传输抑制作用在国外已有动物实验证实[4]。

因此，本实验通过设计孕激素诱导大鼠产生ICP模型，检测血清生化指标及观察肝脏、胎盘的病理组织学变化同时合用雌孕激素来诱导模型来了解雌孕激素的相互作用。从而探讨孕激素以及雌孕激素合用诱发ICP的机制，对ICP的发病机制作进一步探讨，为最终研究清楚ICP的发病机制打开新的窗口。

1 材料与方法

1.1 动物模型制备

SD妊娠大鼠60只，随机分成3组，每组20只。妊娠16d起，每日颈后皮下注射下列药物，对照组注射NS（生理盐水）2.5mL/kg，A组：注射孕酮225mg/kg，B组：注射苯甲酸雌二醇2.5mg/kg，连用5d。

1.2 标本的采集及处理

各组在用药前及用药后5d，分别采股静脉血2mL，测定AST、 ALT；LP；TPA；TBIL、IBIL、DBIL。于孕鼠自然分娩一胎鼠后，以拉断颈髓法处死母鼠，立即行剖宫产剥离盘状的胎盘。取新鲜母面胎盘组织1cm×1cm×0.5cm，用10%多聚甲醛固定，常规石蜡切片。取下孕鼠肝脏，剪肝脏右叶同上方法做石蜡切片，HE染色，光镜下观察肝脏及胎盘病理变化。同时各组孕鼠剖宫产分娩后取出的肝脏和胎盘，一份以10%中性福尔马林固定，入脱水机、包埋机进行脱水、透明、浸蜡、包埋、制成蜡块。另外一份保存于液氮中，以备制作冰冻组织切片。通过免疫组化的方法检测FXR及BSEP。

1.3 统计分析

所有指标数据录入excel表格，转SPSS8.1统计分析系统，结果以（）表示，检验水准取α＝0.05行双侧检验。

2 结 果

2.1 各组分娩胎鼠生理指标比较

A、B两组胎鼠的平均身长、尾长、体质量均有所降低，但和对照组相比较无统计学意义。而B组与对照组体质量相比较，差异有显著性（P＜0.05），而尾长、身长比较差异无显著性（P＞0.05），产仔数无明显差异，B组与对照组死胎率比较，差异有显著性（P＜0.05）。见表1。

2.2 各组孕鼠用药前后血清生化指标比较

2.2.1 用药前

各组间的血清生化指标比较差异无显著性（P＞0.05）。用药后：A，B组与对照组相比较，血清生化指标均有显著升高，行统计学检验差异具有显著性（P＜0.05）。见表2。

表1 各组胎鼠死胎率比较（单位：只）

表2 用药后各组孕鼠血清生化指标水平（）

表2 用药后各组孕鼠血清生化指标水平（）

注：#分别对各指标作单因素方差分析；A、B组和对照组比较：t检验P＜0.05

ALTASTALPTBATBILDBILIBIL对照组47.82± 8.28 2.6± 0.7 A组44.54± 6.82 57.99± 11.49 117.89 ±15.37 17.05± 4.66 5.48± 0.73 2.98± 0.72 2.52± 0.43 F值#31.0214.4725.6230.97105.6248.1542.67 P值＜0.005＜0.05＜0.001＜0.001＜0.05＜0.005＜0.05 2.7± 0.49 B组43.08± 10.78 57.24± 11.62 110.23 ±14.42 15.29± 3.02 5.4± 21.21 2.7± 0.93 57.2± 12.03 110.22 ±14.96 15.28± 2.99 5.28± 1.27 2.76± 1.03

2.3 各组孕鼠肝脏、胎盘组织病理学改变

2.3.1 肉眼见

对照组肝脏：表面光滑，外观色泽红润，边缘锐利规整；胎盘：中央厚边缘薄，母面呈暗红色，胎盘小叶排列紧凑，胎儿面被半透明的羊膜覆盖，光滑。A、B两组肝脏肿胀，呈暗红色，色泽灰暗，有棕黄色脂肪颗粒沉积，提示存在肝内胆汁淤积；胎盘中央部分较薄，胎盘小叶排列较松散，近胎盘边缘白色钙化点呈灶性分布，胎儿面羊膜混浊，光泽较暗；死胎的胎盘甚至可见母体面出血坏死灶。

2.3.2 光学显微镜下见

图1 对照组孕鼠肝脏

图2 A组孕鼠肝脏

图3 B组孕鼠肝脏

图4 对照组孕鼠胎盘

图5 A组孕鼠胎盘

图6 B组孕鼠胎盘

图7 对照组孕鼠肝脏FXR 的表

图8 A组孕鼠肝脏FXR 的表达

图9 B对照组孕鼠肝脏FXR 的表达

图10 对照组孕鼠肝脏BSEP的表达

图11 A组孕鼠肝脏BSEP的表达

图12 B组孕鼠肝脏BSEP的表达

图13 对照组胎盘FXR的表达

图14 A组胎盘FXR 的表达

图15 B组胎盘FXR 的表达

图16 对照组孕鼠胎盘BSEP的表达

图17 实验组孕鼠胎盘BSEP的表达

对照组肝脏形态结构大致正常，肝小叶完整，肝细胞结构清晰；胎盘结构正常、绒毛清晰、滋养层细胞边界完整，无明显增生。A、B组肝细胞肿胀，肝血窦变窄，少量细胞变性坏死，可见毛细胆管内有胆栓和毛细胆管显影。胎盘：实验组绒毛肿胀、增粗、间隙变窄、滋养层细胞增生、合体结节增多；近胎盘母面绒毛缺血性坏死增多，合体滋养细胞表面绒毛短少，空泡状结构增多，呈退行性变，出现水肿（图1～图6）。

2.4 各组孕鼠肝脏、肝脏FXR与BSEP的表达情况

对照组孕鼠肝脏，仅仅可见少量FXR的表达，而各试验组肝脏中则检测到大量FXR的表达；各组孕鼠肝脏中均检测到少量BSEP的表达；在对照组孕鼠肝脏，可检测到较多量的BSEP表达；而试验组肝脏仅仅可见微量BSEP的表达，甚至阴性表达。对照组孕鼠胎盘几乎无明显染色，即FXR仅有少量至微量表达，实验组孕鼠胎盘：FXR呈轻度阳性表达，主要表达于终末绒毛的滋养层细胞胞质内，各组表达差异不大。对照组孕鼠胎盘上存在少量的BSEP阳性表达，主要表达于绒毛滋养层细胞的顶侧面；试验组孕鼠胎盘BSEP的表达极少甚至阴性表达。见表3和图7～图17。

表3 各组孕鼠肝脏FXR、BSEP表达的 值比较（）

表3 各组孕鼠肝脏FXR、BSEP表达的 值比较（）

注：#分别对各指标作单因素方差分析，得出统计量。A、B组指标和对照组作比较：t检验P＜0.05

FXRBSEP对照组2.459±0.3431.935±0.346 A组2.592±0.3841.682±0.212 B组2.623±0.34261.635±0.394 F值#3.2353.184 P值0.01250.0169

3 讨 论

ICP的病因和发病机制还不清楚，研究证明与遗传、环境、激素水平增高等有关。以前大量研究了雌激素与ICP发病的关系。在近年的研究中，孕激素比雌激素似乎更引人注意。研究认为ICP的发生与妊娠血中孕激素水平过高或是对孕激素过于敏感有关。发病机制可能为：①孕酮代谢异常；a.代谢产物阻碍胆红素与葡萄糖醛酸结合后分泌到微胆管，引起血中非结合型胆红素浓度升高发病；b.硫酸化代谢产物大量增加，使肝脏相应的转运系统达到饱和，胆汁分泌硫化产物障碍而发病，这种典型的孕酮硫酸化代谢模式似乎是因ICP引起的；②孕激素可降低胆管膜Na+-K+-ATP酶的活性，减少酶依赖性的胆盐转运；③孕激素代谢改变可能发生载体竞争性抑制作用而导致胆汁淤积；④可以增加胆管树的通透性，使胆汁酸等有机阴离子返流增加；⑤可引起细胞膜流动性下降，阻碍载体移动；⑥引起肝细胞膜脂质成分异常，影响胆汁分泌或使胆汁回流增加，产生肝内胆汁淤积症的病理生理改变。

孕酮在肝内还原为孕烯醇酮和孕烷二醇，形成3α/β、5α/β四种同分异构体，并进一步羟基化及与葡萄糖醛酸或硫酸结合。ICP患者与正常孕妇相比：血浆和尿中孕酮的葡萄醛酸代谢物仍正常，但硫酸盐代谢物显著性增加，而粪和胆汁中排泄减少。分娩后硫酸孕酮代谢物迅速从血清中消失。此外，尿中双结合孕酮代谢物5α-孕烷-3α，20α-二醇-3-硫酸盐和20-N-乙酰葡萄糖胺（20-N-acetylgluc osaminide）也增高。由病毒性肝炎引起胆汁瘀积的孕妇未见这些变化，因此血浆中硫酸化类固醇增加及3α/3β的比例不同是ICP的一个特征。该变化早于临床诊断，可能是早期诊断ICP的最敏感和特异参数，具有病因学参考价值。

孕酮诱导ICP的机制尚待进一步研究。推测可能是：孕激素的某个代谢产物或在代谢过程中产生的某个蛋白具有影响与胆汁淤积症发病有关的基因的调控，或是使这些基因产生缺失或移位等突变，从而导致肝内转运蛋白系统的异常，最终导致了肝内胆汁淤积。

肝脏对胆汁酸盐和其他一些有机阴离子的摄取和分泌，是由位于肝细胞膜和胆管上皮细胞膜上的特殊转运蛋白介导的。位于肝细胞毛细胆管膜上的胆盐输出泵（即人的BSEP，鼠的bsep），是胆盐分泌的主要转运器，而结合输出泵（即人的MRP2，鼠的mrp2），则分泌多价阴离子复合物；此外，人多药赖药基因（MDR3）编码的P糖蛋白，也参与了肝细胞毛细胆管膜侧磷脂的分泌[5]。在雌激素诱导的胆汁淤积动物模型中发现钠/牛磺胆酸转运多肽（NTCP）、有机阴离子转运多肽（OATP）、多药耐药相关蛋白（MRP2）、胆盐输出泵（BSEP）在转录水平均降低；孕激素引起非结合胆红素（UCB）增高，Pascolo等用3H标记非结合胆红素（UCB）研究其在人滋养细胞BeWo细胞的转运机制发现UCB从胎儿循环吸收后借助多药耐药相关蛋白（MRPs）的作用排泄到母体血液循环中。UCB的异常升高使多药耐药相关蛋白（MRP2）、胆盐输出泵（BSEP）水平降低，从而引起胆酸的摄取、转运、分泌障碍。

FXR可促进小分子异源二聚体伴侣（SHP-1）的表达，而SHP-1与肝受体同源物-1（LRH-1）结合后，可抑制LRH-1的转录激活功能，使胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）基因的转录受到抑制，最终导致CYP7A1表达的降低，实现了胆汁酸代谢的自我反馈调节。FXR和视黄醇X受体（retinoid X receptor，RXR）结合形成异源二聚体，再结合到相应的DNA反应元件IR1（间隔一个核苷酸的反向重复序列）上，阻止LXR（α型肝脏X受体）与DR4的结合，也可抑制CYP7A1的表达。此外，FXR在胆酸的激活下，还可调节ATP结合位点（ATP-binding cassette，ABC）转运蛋白的表达，如BSEP、MRP2、MRP3等等，从而增加非胆盐依赖的胆汁酸排泄。动物实验也发现，FXR激动剂可以上调胆盐输出泵BSEP的表达，促进胆盐的排出。克隆人BSEP基因ABCB11，发现其启动子区顺序含有反转重复顺序IR-1，即它含有FXR的结合位点；用基因敲除技术处理的FXR/RXR缺失的小鼠发现BSEP的表达非常低，说明这种转录几乎都是FXR依赖性的。由此可见，法尼醇受体FXR具有调节多种核受体表达水平的作用，在胆固醇、胆汁酸代谢中发挥重要作用，任何影响其数量及功能的因素都可能会导致胆汁的合成与代谢发生改变，甚至导致胆汁淤积。

实验结果表明，实验组FXR的表达增加明显，而对照组FXR呈现一般水平的表达。研究发现，胆汁酸可作为配体激活FXR，促进FXR的转录。而FXR可通过多种孤儿核受体的作用，促进或抑止相关基因的活性，改变胆酸代谢相关蛋白质的表达，最终导致体内胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）降低，从而实现了胆汁酸代谢的自我反馈调节。孕激素本身不能作用于FXR，但本次实验仍见孕激素组FXR表达增强，可能是某个孕激素代谢产物的作用，还有待进一步研究。

本次实验还提示：雌、孕激素诱导了孕鼠肝内胆汁淤积时，孕鼠肝脏胆管细胞膜侧BSEP的表达降低。可能是雌激素，孕酮代谢产物及高浓度血清胆酸抑制了BSEP启动子的活性，导致BSEP表达降低；也可能是高表达的FXR反而抑制了BSEP的表达。用虫荧光素酶受体基因分析发现，胆盐、FXR可以浓度依赖的方式调节BSEP基因启动子，如FXR突变，则可强烈抑制对BSEP基因的诱导[3]说明FXR、胆酸在不同浓度下可以影响到BSEP的表达。

因此，在肝脏，胆汁酸转运存在着由激素/或激素代谢产物-胆汁酸-FXR核受体介导的精细调节。如能够设法通过干预这一过程，调节FXR的表达，增强BSEP启动子的活性，或者通过增加转运囊泡从高尔基体向胆管细胞膜侧的蛋白转运，就可以通过核受体超家族的介导，实现对肝脏胆酸代谢的调节。

本研究还显示，在孕鼠胎盘上存在着少量FXR和BSEP的阳性表达，主要位于滋养细胞的顶侧面，说明FXR和BSEP在胎盘上参与了胆酸从胎儿向母体侧的转运，其对胆酸代谢的调节过程可能与肝脏对胆酸的调节机制类似。除此之外，还发现，在鼠及人类胎盘上还存在有其它多种胆酸转运蛋白的表达，如OATP、MDR3等在胎盘上也出现不同程度的表达，这些转运蛋白同样参与了胆酸在合体滋养层基侧和顶侧面的转运，FXR在胆酸的激活下也可以调节胎盘OATP、MDR3的基因转录及表达，从而增加胆酸的转运，使血清胆酸降低。但Arrese进一步研究发现，胆淤孕鼠的胎鼠及新生鼠肝细胞对胆汁酸的摄取与对照组无差别，肝基底膜Ntcp及钠非依赖性有机阴离子转运多肽（OATP）的表达和功能不受影响，推测胎鼠血胆汁酸升高的程度不足以引起Ntcp及Oatp基因下调，认为可能存在其他因素影响肝小管膜对胆汁酸的分泌，如激素水平的变化导致胎鼠肝脏胆汁酸代谢异常。

当孕妇血清胆酸浓度轻微增加时，激活了胎盘FXR对靶基因的调节及改变相关蛋白的表达，如诱导BSEP大量产生而增加胎儿胆酸向母体侧的转运，维持了胎儿体内正常胆酸水平；而血清高浓度胆酸时，胎盘内出现胆汁淤积，滋养层细胞肿胀和绒毛间隙水肿[6]，胎盘血流灌注及供氧急剧减少，可能导致FXR对胆酸代谢的调节机制发生改变，使母儿间正常的跨滋养层胆汁酸代谢受损，引起胎儿体内胆汁酸浓度增加和胎儿预后不良。

综上所述，在正常妊娠时，轻微增加的胆酸诱导了FXR的适量表达，通过正反馈刺激BSEP分泌增加，排出胆酸而不发生胆汁淤积；而在ICP时，血中高雌，孕激素水平和高浓度胆酸诱导了肝脏、胎盘FXR的大量表达，而相反地BSEP的表达却有所降低。结合FXR对体内胆酸转运相关蛋白的调节机制分析，可能是由于血中高性激素水平和高浓度胆酸诱导大量表达的FXR反而抑制了BSEP的分泌，使胆酸代谢发生改变，结果导致胆汁淤积。已有研究表明，对ICP患者应用FXR的高效激动剂（如GW4064），则可增强FXR对胆酸代谢的调节作用[7]。因此，如果能进一步探讨FXR对BSEP的负反馈调节机制，有助于研究清楚在妊娠期高性激素环境下胆酸代谢的详细机制和ICP的发病原因。

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The Expression of Hepatocellular/placenta FXR and BSEP in Pregnant Rats with Progesterone/ Estradiol Benzoate Induced

ZHANG Li-ping, LIU Jian, HUANG Nan
(Department of Obstetrics and Gynaecology, Nanchong Central Hospital, Nanchong 63700, China)

Objective To study the expression level of FXR and BSEP in hepatocellular/placental tissue in late pregnancy rats with progesterone and or estradiol benzoate （EB）induced. Methods 60 SD rats pregnant for 15 days were randomly divided Into four group: control group, group A, group B. given the subcutaneously injection of estradiol benzoate（EB）, progesterone or appropriate volume of NS for 5 days. In control group, the rats were given NS, In group A, the rats were given progesterone; In group B, the rats were given EB; venous blood was sampled for the measurement of serum ALT, AST, ALP, TBA, TBIL, DBIL, IBIL level for twice（before given medication, before delivery）.Liver and placenta were taken for histological analysis with light microscope by H&E staining after delivery and the physiological index of the fetal rats has entering into statistic. The expression of FXR/BSEP in liver and placenta was analyzed by immunohistochemical method（SP）.Results The serum levels of ALT, AST, ALP, TBA, TBIL, DBIL, IBIL in the experiment group rats increased significantly（P＜0.05）and control group had no changes（P＞0.05）.The physical indexs of fetal rats were analyzed, and results indicated that control group was better than experiment group（P＜0.05）. In group A, B, there are obvious histopathological changes in liver indicated that intrahepatic cholestasis was induced by EB In pregnant rats. In experiment group, the degrees of FXR in the liver were significantly higher（P＜0.05）; but the BSEP were lower （P＜0.05）contrast with control group. In placenta, existed the expression of FXR /BSEP too. Conclusion Estradiol benzoate is the best candidate for inducing animal model of ICP, progesterone too. The augment of FXR expression in liver and down-regulating of BSEP by estrogen or progesterone may be the pathogenesis of intrahepatic homeostasis for pregnancy rats. Several progesterone metabolites are able to induce transinhibition of BSEP and the subsequent trans-inhibition of BSEP and thesubsequent toxicity induced by the accumulation of BAs, which may play a role in the etiopathogenesis of ICP. Progesterone metabolism disorder may cause concentration of UCB raised, may be involved in the aetiology of ICP, Progesterone can reinforcement action of estradiol benzoate.

Pregnant Rat; Intrahepatic Cholestasis; Bile salt export pump（BSEP）; Farnesoid X receptor（FXR）; Serum chemistries

R714.25

B

1671-8194（2013）27-0009-04