乙型肝炎病毒DNA定量与血清学标志物检测的相关分析及临床意义

王笑石

（沙洋县人民医院检验科，湖北 荆门 448200）

乙型肝炎病毒DNA定量与血清学标志物检测的相关分析及临床意义

王笑石

（沙洋县人民医院检验科，湖北 荆门 448200）

目的 分析HBV-DNA定量与血清学标志物定量检测之间的相关性及临床意义。方法 采用ELISA检测386例HBV感染者的HBV血清学标志物，同时采用PCR-荧光探针法定量检测HBV-DNA拷贝值。比较大三阳组（HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性）与小三阳组（HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性）的HBV-DNA定量平均对数值；并分析血清学标志物与HBV-DNA定量的相关性。比较慢性肝炎、重型肝炎和肝硬变者HBV-DNA定量平均对数值的差异。结果 大三阳组与小三阳组的HBV-DNA定量平均对数值分别为（7.82±1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）；HBsAg、HbeAg与HBV-DNA定量呈正相关，而HbeAb、HBcAb与HBV-DNA定量无相关。慢性肝炎、重型肝炎和肝硬变者HBV-DNA定量平均对数值为分别为（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）。结论 HBV血清学标志物结合DNA定量检测对于评价传染性有意义，但对分析临床类型无意义。

乙型肝炎病毒；荧光定量PCR；酶联免疫吸附试验

乙型肝炎病毒（HBV）的血清标志物能反映机体对HBV的免疫反应状态，但是较难以反映HBV在体内的复制水平、传染性以及治疗效果[1]。而目前公认乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）是HBV复制情况及传染性最可靠和最直接的指标，并且对于疗效、耐药性及复发状况进行动态监测[2]。但目前对于HBV-DNA定量与血清学标志物定量检测之间的相关性，以及二者检测对于HBV感染的临床类型分类研究尚不充分，因此本研究回顾分析HBV感染者的HBV-DNA定量、血清标志物与临床类型之间的关系进行了比较分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组

选取2008年1月至2011年9月我院就诊的HBV感染患者386例，作为研究对象进行回顾性研究，其中男203例，女183例，平均年龄（32.2±8.6）岁。诊断标准依据符合2000年全国病毒性肝炎和肝病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》。临床类型：慢性肝炎患者198例、重型肝炎患者72例、肝硬变患者116例。所有患者在本研究2月前，均无应用抗病毒、激素或免疫抑制剂史。

按照HBV血清学标志物，分为两组：大三阳组，即HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性；小三阳组，即HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性。

1.2 HBV血清学标志物的检测

按照试剂盒（购自英科新创科技有限公司）操作说明书进行检测乙肝5项，其中HBsAg、HBeAg、HBeAb和HbcAb的结果。

1.3 血清HBV-DNA定量检测

采用PCR-荧光探针法定量检测血清HBV-DNA，严格按试剂操作说明书操作。设立空白、阴性、临界阳性和强阳性对照，以检测试剂和操作过程中的污染情况以及检测的灵敏度，同时检测低值和中值室内质控物进行质量控制。所有标本均在同一条件下同一批检验，其阳性截止值为≥2×106copy/L。

1.4 统计学处理

应用SPSS 15.0统计软件进行统计检验，计量资料数值以（）表示，两组数据比较采取组间t检验，多组数据比较采取ANONVA检验，组间比较应用SNK检验。相关性采用直线回归分析，以P＜0.05为存在统计学差异。

2 结 果

2.1 传染性不同的血清HBV-DNA定量分析

大三阳组与小三阳组的HBV-DNA定量平均对数值分别为（7.82± 1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）。

2.2 血清HBV-DNA定量与血清学标志物相关性

HBsAg、HbeAg与HBV-DNA定量呈正相关，r值分别为0.002、0.007；而HbeAb、HBcAb与HBV-DNA定量无相关，r值分别为0.085、0.033（表1）。

表1 血清HBV-DNA定量与血清学标志物相关性

2.3 临床类型与血清HBV-DNA定量比较

慢性肝炎、重型肝炎和肝硬变者HBV-DNA定量平均对数值为分别为（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）（表2）。

表2 临床类型与血清HBV-DNA定量比较

3 讨 论

临床上确诊HBV感染有赖于病原学诊断，主要的检测方法是应用免疫血清学方法检测HBV血清学标志物以及应用分子生物学方法检测HBV-DNA。HBV血清学标志物主要反映的是人体对乙肝病毒的免疫状态，而HBV-DNA是病毒复制活动最直接，也是最可靠的实验标志物，也是HBV感染最为直接的证据[3]。既往认为HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性，即“大三阳”患者，传染性最大，而HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性，即“小三阳”患者，HBeAg转阴且产生HBeAb，表明HBV病毒的复制水平减少，拷贝数减少，因此传染性减弱，病变趋于静止状态。从本研究结果来看，“大三阳”患者的血清HBV-DNA定量明显较“小三阳”患者高，这证实了临床的观点。但是也有临床证据显示，由于HBV存在pre-c基因变异，进而出现虽然HBeAg阴性且HBeAb阳性，但是病毒复制仍然活跃的情况，因此临床上不能仅根据免疫血清学的结果来对“小三阳”患者的病毒复制水平以及传染性进行判断，而应该结合血清HBV-DNA定量分析来综合评价，最佳方法是进行动态监测。

本研究分析血清HBV-DNA定量与血清学标志物相关性，显示HBsAg和HBeAg值与血清HBV-DNA定量呈正相关，而HbeAb、HBcAb与HBV-DNA定量无显著相关性[4]。因此，测定血清中HBsAg和HbeAg水平可以间接反映血清HBV-DNA的量，这对于基层医疗机构快捷判断抗病毒药物治疗疗效和预后判断均有很好的临床意义。在分析不同临床类型与血清HBV-DNA定量的相关性中，本研究显示慢性肝炎、重型肝炎以及肝硬变的血清HBV-DNA定量并无明显差异，这一点与国内的报道有不一致[5]。因此需要进行大规模、多中心临床研究来判断。

[1] 陈小晶,王奕忠,郑映玉,等.乙肝病毒载量与血清标志物定量的相关性[J].广东医学,2009,30(2):239-241.

[2] 杨婷,谢亚荣,王波.乙肝病毒携带产妇血清和乳汁中HBV-DNA定量检测及其临床意义[J].实用医技杂志,2008,15(24):3213-3214.

[3] 蔡惠兴,吴英,梁鹏.乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果分析[J].国际医药卫生导报,2010,16(2):218-219.

[4] 温旺荣,苏芳,昊勇,等.乳汁处理方法对检测HBV-DNA结果的影响[J].临床检验杂志,2007,25(1):31-33.

[5] 周平,张木森,蔡庆,等.定量聚合酶链反应检测HBV感染者血清HBV-DNA的临床意义[J].空军总医院学报,1997,13(4):193-195.

R512.6+2

B

1671-8194（2013）27-0176-02