乳腺癌患者血清VEGF和P53的表达及临床病理意义

韩桂兰 李伟 尚培中 张华东

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，严重的影响了女性的生活质量，同时也造成了一定程度的社会经济问题。因而，早期诊断、早期治疗成为临床和基础研究的重点。如今，已有多种肿瘤标志物用于乳腺癌检测的研究，如 CA-742、CEA、CA153、CA199 等［1，2］，但特异性和敏感性不高。本研究通过检测乳腺癌患者血清中VEGF、P53抗体表达水平，探讨两者在乳腺癌诊疗及预后判断中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集尚义县医院乳腺癌70例，乳腺腺病组织标本45例，乳腺癌患者年龄22～75岁，平均47岁，术前均未接受放化疗及激素治疗。乳腺癌组织中肿瘤直径≤2 cm者9例，＞2 cm者61例;局部腋窝淋巴结转移阴性21例，阳性49例。组织学分级：Ⅰ级15例，Ⅱ级35例，Ⅲ级20例。孕激素受体(PR)阳性35例，阴性35例;雌激素受体(ER)阳性30例，阴性40例;人表皮生长因子受体-2(HER-2)阳性32例，阴性38例。45例乳腺腺病患者年龄18～48岁，平均32岁。所有患者均无妊娠、感染、肝肾功能不全、代谢性疾病和心脑血管疾病等并发症。

1.2 样品的制备 取受试对象清晨空腹静脉血2.0 ml，静置后分离出清亮血清，置洁净试管中，在-70℃低温保存待测。分离时采用3 000 r/min，离心15 min。所有标本采用深圳晶美生物公司提供的VEGF ELISA试剂盒和奥地利Bender公司提供的P53 ELISA试剂盒。操作步骤严格按照说明书进行，采用Bio-RAD680酶标仪进行比色定量分析。

1.3 结果判定 血清VEGF和P53抗体浓度的95%医学参考值范围分别为 ＜78.7 pg/ml和 ＜0.47 U/ml［3］，据此，本实验把血清VEGF＞78.7 pg/ml的病例定为阳性，反之为阴性;血清P53＞0.47 U/ml的病例定为阳性，反之为阴性。

1.4 统计学分析应用SPSS17.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者血清VEGF和P53含量比较 乳腺腺病组患者血清VEGF、P53含量明显低于乳腺癌组，差异有统计学意义(P ＜0.01)。见表1。

表1 2组患者血清VEGF、P53含量比较±s

表1 2组患者血清VEGF、P53含量比较±s

P值 ＜0.01 ＜0.01

2.2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗体与临床病理因素的关系 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗体的表达与年龄、肿瘤直径、组织学分级及HER-2的状态差异无统计学意义(P＞0.05)，而与患者淋巴结转移、ER及PR差异有统计学意义(P＜0.01)。见表2。

表2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗体与临床病理因素的关系例(%)

3 讨论

VEGF主要由癌细胞产生，在肿瘤的生长、转移中起着重要作用，是目前公认的最关键的促血管形成因子。不仅如此，它还能上调纤溶酶系统的表达，诱导内皮细胞产生间质胶原酶，蛋白水解酶和组织因子等，这更有利于肿瘤细胞脱落进入脉管或向邻近组织扩散，为肿瘤的浸润、转移创造条件［4］。本研究结果显示，血清VEGF在乳腺腺病中的表达明显低于乳腺癌中的表达，表明在恶性病变中VEGF呈过表达，一定程度上反应了病情的状态。与李菊梅等［5］研究结果相同。通过分析VEGF与乳腺癌临床病理因素的关系发现，血清VEGF的水平与患者年龄、肿瘤直径、组织学分级及HER-2的状态无关，而与患者淋巴结转移、ER及PR有关。这进一步表明，受VEGF刺激生成的血管可以满足肿瘤生长所需的营养，加强了肿瘤细胞远处转移的能力。有资料表明，VEGF是一种性激素反应因子，异位内膜中VEGF与ER均呈正相关，提示异位内膜中VEGF可能与ER存在相互促进的依存关系［6］。但在乳腺癌中VEGF与ER、PR之间的具体调节及诱导机制还有待进一步研究。

P53基因定位于人染色体17P13.1，是一个肿瘤抑制基因，具有阻止不正常细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，突变的P53基因不仅丧失了其抑癌的功能，而且还获得了致癌性。研究发现P53抗体出现与P53蛋白异常以及P53基因突变有明显相关性，因而可以相对简单地由血清中P53抗体的状态推测机体有无P53基因突变［7，8］。本研究结果表明，血清P53在乳腺腺病中的表达低于乳腺癌中的表达，显示出癌症患者血清中有高水平突变的P53，其水平越高越能表明患者的预后。在临床病理因素中，血清P53的水平与患者淋巴结转移、ER及PR有关，而与其他因素无关。有文献报道，突变的P53基因增强了蛋白激酶C对VEGF表达的诱导，两者呈显著的正相关，其相关性亦有非常显著的意义，从而说明VEGF的表达可能受P53调控［9］。但VEGF不仅是促血管形成因子，而且又是性激素反应因子，其这两项功能也许使P53与ER、PR之间有某种联系。文献显示，乳腺癌患者血循环中P53癌基因蛋白含量与癌组织ER、PR表达存在负相关，同时认为P53阳性肿瘤对环磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶联合化疗有一定抵抗性，对含蒽环类药的联合化疗却敏感［10］。据此可知，P53不仅与乳腺癌患者的预后有关，还可指导临床治疗方案的选择。

综上所述，血清VEGF、P53在乳腺癌患者中呈高表达，且与患者淋巴结转移、ER及PR有关，因而，检测两者在一定程度上能反映患者的病情状况，除此之外，还能为临床的治疗及方案的选择提供有价值的帮助。

1 龙志华.血清CA72-4检测在乳腺癌诊断中的临床应用.北方药学，2011，8：67-68.

2 龚春芳.血清CA125、CA199、CEA及VEGF联合检测在卵巢癌诊断中的意义研究.中国当代医药，2011，18：35-36.

3 唐怀民，黄根池.血清VEGF和p53抗体与非小细胞肺癌的相关性研究.实用心脑肺血管病杂志，2011，19：1469-1470.

4 宋亚辉，刘青云，张林.VEGF和p53蛋白在宫颈癌中的表达.现代生物医学进展，2010，10：313-315.

5 李菊梅，韩建军，郭梅艳.VEGF和TNF-α在乳腺癌中的表达及临床意义.河北医药，2009，31：2377-2378.

6 陈琼华，曲军英，邱娜璇，等.VEGF、ER、PR在异位和在位子宫内膜中的表达.厦门大学学报(自然科学版)，2005，44：870-873.

7 Chang SC，Lin JK，Liang WY.Genetic alteration of P53，but not overexpression of intrtumoral P53 protein，or serum P53 antibody is a prognosis factor insporadic colorectal adenocarcinoma.International Journal of Oncology，2005，26：65-75.

8 Luts W，Nowakowska-Swirta E.Gene P53 mutation，proteinP53，and anti-P53 antibodies as biomarkers of cancers process.Int JOccup Med Evioren Health，2002，15：209-218.

9 朱颖蔚，成金罗，钱科卿，等.胃癌患者血清VEGF、P53的表达及意义.现代肿瘤医学，2007，1：375-376.

10 瞿峰.乳腺癌组织中VEGF的表达与CD44v6、MMP-2的相关性研究.河北医药，2012，34：808-810.