9 种润肺止咳中药对小鼠镇咳作用的比较研究

★ 凌珊 易炳学 龚千锋 (江西中医学院 南昌330006)

咳嗽是因外感六淫，脏腑内伤，影响于肺所致有声有痰之证。“咳谓无痰而有声，肺气伤而不清也;嗽是无声而有痰，脾湿动而为痰也。咳嗽谓有痰而有声，盖因伤于肺气动于脾湿，咳而为嗽也”。中医学治疗咳嗽有宣肺止咳、清肺止咳、润肺止咳、肃肺止咳4 大方法。所谓润肺止咳药以治疗肺支气管疾病引起的咳嗽为主，包括急性和慢性炎症、结核、支气管扩张、肿瘤等。对上呼吸道感染后较顽固之咳嗽也能使用，但其中大多数药不用于感冒后咽痒而咳嗽者。润肺止咳之中药以药效温润，安全性高为特色，一般可长期使用并作茶饮。本实验主要以润肺止咳中药为研究对象，选取其中较常用的9 味中药，并包含生品与炮炙品，进行镇咳作用及安全性的比较研究。以期从中筛选镇咳疗效好，毒性相对小的药物，为中医临床用药提供更多理论依据。

1 实验仪器与材料

1.1 试验动物 小白鼠，昆明种，体重18 －22g，均由江西中医学院动物中心提供，合格证号:SCXK －2005 －0001。

1.2 试验药材 款冬花、蜜炙款冬花、蜜炙紫菀、蜜炙百部、蜜炙枇杷叶、鼠曲草、紫金牛、天浆壳、浙贝母、川贝母。实验中药材均购自江西樟树天齐堂中药饮片有限公司。

1.3 试验试剂 25 ﹪氨水，江西洪都生物化学有限公司产品，生产批号101101;枸橼酸喷托维林片，天津药业焦作有限公司产品，生产批号11022221。

1.4 仪器设备 超生雾化引咳装置(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司生产);电子分析天平ARll40/C(奥豪斯上海公司生产);电子天平(常州万泰天平仪器有限公司生产);GZX －9070MBE 数显鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂生产);智能恒温电热套(巩义市予华仪器有限责任公司生产);HH－S 恒温水浴锅(江苏省金坛市医疗仪器厂生产);BCD－179K 冷藏冷冻箱(青岛海尔股份有限公司生产)药典筛(浙江上虞市道墟张兴纱筛厂生产);一次性使用无菌注射器(江西三鑫医疗器械集团有限公司)。

2 实验方法

2.1 实验分组 设款冬花组、蜜炙款冬花组、蜜炙紫菀组、蜜炙百部组、蜜炙枇杷叶组、鼠曲草组、紫金牛组、天浆壳组、浙贝母组、川贝母组、空白组;枸橼酸喷托维林组为阳性对照，生理盐水组为阴性对照。

2.2 小鼠引咳实验(浓氨水喷雾法)［1，2，3］昆明种小鼠，体重18 －22 g，雌雄各半，置于特制的玻璃钟罩内，使用超声雾化喷雾器进行25 ﹪浓氨水定量喷雾，10 秒后立即取出，记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期，以及2 分钟内的咳嗽次数。喷雾后2 分钟不咳嗽者舍弃。合格小鼠2 天后按照上述分组方法随机分组(空白组于引咳实验前随机选出分组，不进行浓氨水喷雾)。每组分别按表1 中各对应剂量连续灌胃5 天，空白组与阴性对照组给以等量生理盐水，并于每日给药前称重并记录。于末次给药后1 小时，分别接受25 ﹪浓氨水定量喷雾，10 秒后立即取出。记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期及2 分钟内的咳嗽次数，2 分钟内未见咳嗽者其潜伏期以120 秒记。

2.3 药物的制备及给药方法 称取生款冬花50g，加蒸馏水浸泡1 小时，然后加500mL 和300mL 蒸馏水煮沸2 次，每次1 小时，合并水煎液，浓缩至水煎液浓度0.25g 生药/mL。给药量6.2g/kg，给药0.25mL/10g。其他各组煎煮方法及给药方法同上，仅川贝母组、浙贝母组、蜜炙百部组，给药方法略有不同，川贝母组给药量为2.1g/kg，浙贝母组与蜜炙百部组给药量为3.1g/kg。

2.4 数据处理 数据用SPSS17.0 软件处理，组间比较用t 检验。

3 结果

3.1 各组润肺止咳药物对小鼠的镇咳作用 结果见表1。在末次给药后1 小时，各润肺止咳中药组对小鼠咳嗽潜伏期均有一定的延长作用，其中生款冬花组、蜜炙款冬花组、紫金牛组、川贝母组、浙贝母组、蜜炙百部组、蜜炙枇杷叶组、蜜炙紫菀组与阴性对照组相比，均有显著性差异，且其中生款冬花组、川贝母组、蜜炙枇杷叶组、蜜炙紫菀组效果最佳。

在减少小鼠咳嗽次数方面，各给药组与阴性对照组比较，均有显著性差异。其中炙紫菀组与阳性对照组、阴性对照组相比均有显著性差异。

表1 各组润肺止咳药物对小鼠的镇咳作用 (¯x±s)

3.2 各组药物对小鼠体重的影响 见图1。结果表明，阳性对照组、生款冬花组、蜜炙款冬花组、天浆壳组小鼠体重呈下降趋势。其他组小鼠体重总体呈增长趋势。由表2 可知，生款冬花组小鼠体重下降最多，显著低于空白对照组(P ＜0.01)。蜜炙款冬花组、鼠曲草组与空白对照组相比也有降低(P ＜0.05)。

空白组动物一般形态外观、行为活动、饮食、皮毛、运动功能等均无异常。生款冬花组，阳性对照组小鼠表现为活动减少，皮毛无光泽，摄食量减少，以25 mL·kg－1每日灌胃给药，生款冬花组小鼠5 天内死亡3 只，其他组小鼠未见死亡。

表2 各组药物对小鼠体重的影响 (¯x±s)

图1 各组小鼠体重变化曲线图

4 讨论

通过对咳嗽潜伏期、咳嗽次数两指标的测定，根据各润肺止咳药物组是否与阴性对照组有显著性差异，初步可得出各组药物镇咳效果的强弱。综合考察以上指标，各润肺止咳药物组对浓氨水诱导的小鼠咳嗽，均有明显镇咳作用。尤以蜜炙紫菀组镇咳效果最为明显，与阳性对照组相比亦表现显著性。现代药理研究表明，紫菀水煎剂具有祛痰作用，但无明显镇咳作用［4］，本实验中紫菀镇咳效果显著，其原因可能是经蜂蜜炮炙后，其药性转泻为润，以润肺止咳力胜，能泻肺气之壅滞，故镇咳作用加强。

给药期间小鼠体重变化的测定结果显示，生款冬花组小鼠活动减少，皮毛无光泽，摄食量减少，5天内死亡3 只。该现象可能与款冬花中所含的吡咯里西啶生物碱(如千里光宁(senecionine)、肾形千里光碱(senkir kine)、千里光非灵(seneciphylline)、全缘千里光碱(integerrimine)等［5］)的肝毒性有关。初步分析这类生物碱对肝脏的损伤导致小鼠免疫力下降，进而表现出体重降低，及以上外观表征。此外，与生款冬花相比，蜜炙款冬花组小鼠体重略有降低，但未见死亡。两者在降低小鼠咳嗽次数与延长咳嗽潜伏期方面，与阴性对照组相比均有显著性差异;咳嗽抑制率显示，生品与蜜炙品分别为87.2%、82.8%，差异不大。可能是由于蜂蜜味甘性平，熟品性偏温，以补脾气、润肺燥之力胜。经甘润滋补的蜂蜜炮炙后，补脾益气作用增强，故蜜炙款冬花组小鼠体重降低情况较生品组少，且未出现外观及活动异常。至于蜜炙是否能够降低款冬花的肝毒性以及其具体作用机制，需进行进一步的研究与观察。建议我国医药卫生行政部门应根据我国的实际用药情况，对款冬花等药材中的肝毒性吡咯里西啶生物碱作出限量规定，以提高用药安全性。此外，可从配伍研究入手，寻找款冬花减毒增效药对，从而使款冬花这一润肺下气、止咳化痰之要药能够更好的应用于临床，造福广大人民群众。

［1］陈奇.中药药效研究思路与方法［M］. 北京:人民卫生出版社，2005.

［2］王四旺，施新猷，黄传贵，等. 中药药效学研究与评价［M］. 第1版.西安:陕西科学技术出版社，2005:125.

［3］白芥子提取物的镇咳、祛痰、平喘作用研究［J］.中草药，2003，34(7):635 －637.

［4］LIZ，FAN BL，YU QH，etal. Experimental studies on the antitussive and expectorant effects of Ligularia fischeri Turca.and Aster tataricus L.［J］.J Shenyang CoilPtulrm(沈阳约学院学报)，1987，4(2):136－139.

［5］濮社班，徐德然，张勉，等.中药款冬花中肝毒吡咯里西啶生物碱LC/MSn 检测［J］.中国天然药物，2004，2(5):293.