针刺调节焦虑障碍免疫功能紊乱的机制

黄文琴 周奇志 余曙光 蔡定均 何 薇 张潇丹

(成都中医药大学针灸推拿学院，四川 成都 610075)

根据《精神疾病诊断与统计手册-第5版(DSM-5)》诊断标准，焦虑障碍(AD)是指过度的恐惧和焦虑，及相关行为障碍为特点的病症，它的亚型包括广泛性焦虑障碍(GAD)、惊恐障碍(PD)等〔1〕。该病发病极为常见，据新近流行病学调查显示，我国山东、浙江、青海、甘肃四省焦虑障碍的患病率为5.6%〔2〕。AD不仅可以削弱患者的工作效率、生活能力，而且可导致中度至严重伤残〔1〕。目前认为，情绪的紊乱还可导致免疫系统的损伤〔3〕。针刺已广泛地用于AD的临床治疗，并取得良好的效果〔4，5〕。研究证明，针刺对机体免疫功能具有良好、整体调整作用〔6〕，且对AD免疫功能的损伤也体现出调整优势〔3〕。在以往报道中，针灸在调节机体免疫功能方面文献颇丰，但在调节AD免疫功能紊乱方面报道零星，为此，本文就有关焦虑障碍的免疫功能紊乱、针灸调节机体免疫和AD免疫功能紊乱方面进行总结分析，探讨针刺对AD免疫功能紊乱的调节机制。

1 AD免疫功能的紊乱

临床研究发现，AD患者存在免疫功能的紊乱。早期研究发现，GAD患者较正常健康人血清免疫球蛋白(Ig)IgG，IgM水平有明显升高〔7〕。与正常男性大学新生组比，有亚临床焦虑症状的男性大学新生有更多的焦虑情绪，且其淋巴细胞对促细胞分裂剂伴刀豆球蛋白A(Con A)的增殖反应以及循环中的白细胞介素(IL)-1β水平均明显降低〔8〕。随后有研究显示，AD患者(包括GAD、PD)外周血中淋巴细胞对植物凝集素(PHA)的增殖反应以及血清IL-2水平也明显降低〔9〕。有20年军队服役经历的越南退伍军人中，与不伴AD的老兵比较，伴GAD的老兵，其淋巴细胞总数及T-细胞计数均明显升高〔10〕。研究还发现，GAD组患者血清IL-2浓度均明显大于抑郁性神经症组和健康组〔11〕；CD8+T细胞计数减少，外周血清CD4+/CD8+比值明显升高〔12〕。另有不同结果的文献显示，GAD患者较正常人血浆IL-2含量却明显降低〔13〕。近期研究还表明，焦虑妇女的淋巴细胞趋化、吞噬、增殖和自然杀伤细胞(NK细胞)活性明显减少，淋巴细胞亚群值明显升高〔3〕。伴AD与不伴AD的妇科肿瘤患者相比，血清T淋巴细胞亚群CD3+、CD8+数目、NK细胞数目、IL-2水平明显降低；而血清CD4+/CD8+比值、IL-6水平又有明显升高〔14〕。患有AD的男性，与正常对照组比，外周血C-反应蛋白(CRP)水平明显升高〔15〕。

体外培养实验发现，AD患者的免疫功能紊乱多表现在T细胞功能紊乱上。近期研究发现，GAD患者与健康正常对照组比，体外细胞培养中的T细胞的活化减少，细胞因子谱中显示Th1(调节细胞免疫)和Th2(调节体液免疫)存在缺陷；Th17分泌的细胞因子可增强细胞免疫和体液免疫的损伤，特别是取自GAD个体的已活化的T细胞的细胞培养中，肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-17的水平显著升高〔16〕；且多巴胺(DA)能提高GAD患者体外细胞培养的T细胞中Th17细胞因子的生成量〔16〕。若加入P物质(SP)，SP能显著放大GAD患者多种T细胞功能失调〔17〕。

动物实验也发现，AD模型动物也表现免疫功能紊乱。研究发现，高焦虑大鼠的玫瑰花环形成细胞数量显著降低〔18〕。慢性心理应激小鼠，与相对应的非应激对照组比较，其胸腺指数明显下降，NK细胞活性及淋巴细胞转化率均明显下降，胸腺细胞凋亡率升高，胸腺组织病理损伤加重〔19〕。近期研究表明，慢性附属性移居刺激(CSC)造成的慢性社会心理应激Wistar大鼠模型，体重和胸腺绝对质量减少，轻度结肠屏障缺陷和肠道免疫活化的减少〔20〕。

可见，不管是临床研究还是基础实验研究，均发现AD患者或焦虑模型动物的免疫功能均表现紊乱，且涉及免疫器官、免疫细胞和免疫分子多个不同层面的功能紊乱。

2 针刺对免疫功能的调节效应和机制

2.1针刺对免疫功能的调节效应 临床研究发现，针刺能调节抑郁症患者的细胞因子水平。如，电针刺激抑郁症患者百会穴和随证配穴，随抑郁症状的缓解，针刺后血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低，至第6周末基本恢复至正常〔21〕。在近期研究中，电针刺激抑郁症患者太冲、三阴交、内关、神门，也得到类似的结果，针刺可使血清中IL-1β、IL-6水平明显降低〔22〕；另外，针刺还可调整慢性疲劳综合征(CFS)患者Ig等水平。如针刺章门、中脘、膻中、膈俞等八会穴〔23〕，或百会、关元、气海等穴〔24〕，分别都能明显提高CFS患者外周血IgA和IgG的水平。

动物实验研究证明，分别用手法和电针刺激“膻中”、“玉堂”、“紫宫”等穴干预长期捆绑刺激应激的小鼠，与模型组比，手针和电针两组脾和胸腺组织中NK细胞和IL-2的活性明显提高〔25〕；针刺游泳训练模型小鼠“足三里”穴后，也可使血清补体C3、C4的含量明显升高〔26〕。针刺慢性应激抑郁模型大鼠“百会”、“太冲”穴发现，血清IL-2、IL-6和TNF-α含量明显降低〔27〕；对束缚-冷泳慢性疲劳大鼠，于“百会”、“肾俞”、“后三里”施予针刺，血清IL-2及TNF-α水平都明显升高〔28〕。近期研究发现，电针刺激大强度运动应激大鼠“足三里”、“百会”、“关元”穴区，可使外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+数量和NK细胞水平明显增高〔29〕；针刺肺俞、心俞、肝俞等背俞穴可使束缚-冷泳慢性疲劳大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+含量明显升高，CD8+含量明显降低，CD4+/CD8+比值略有升高〔30〕，而血清IL-1β、CRP、TNF-α水平明显降低〔31〕。

由上可知，针刺对免疫功能的调节效应研究，涉及免疫功能相关的多个环节上，但研究多集中在针刺对免疫分子调节，其次是对免疫细胞的调节。

2.2针刺对免疫功能的调节机制 免疫功能作为机体整体功能的一部分，其功能行使与神经、内分泌的调节紧密相关，因此已构成了神经-内分泌-免疫的复杂网络，且涉及机制十分复杂。目前关注热点在下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴相关激素免疫调节上。如研究发现，慢性心理应激可导致显著的先天性和适应性免疫应答改变，这种改变主要是由HPA 轴等神经内分泌介质所介导的〔32〕。免疫细胞上有促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)的受体〔10〕；ACTH释放激素(CRH)可以诱导腹腔巨噬细胞分泌 TNF-α、IL-6、IL-10等细胞因子〔33〕；外源性ACTH导致小鼠NK细胞活性、T细胞转化活性受抑制〔34〕；COR能抑制人外周血淋巴细胞对丝分裂原刺激的增殖〔35〕。较深入的研究，还体现在糖皮质激素(GC)对胸腺T细胞的影响上。如皮下注射大量外源性皮质酮(CORT)可抑制大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴(HPAT)，不仅可使下丘脑室旁核CRH阳性神经元及垂体前叶ACTH阳性细胞等数量减少、肾上腺皮质明显萎缩外，而且还可见胸腺皮质明显萎缩、胸腺细胞及胸腺小体减少；血浆ACTH、CORT含量明显降低；此外，淋巴细胞增殖反应、IL-2、γ-INF诱生能力也显著降低〔36〕；足底电击后，在小鼠血清CORT水平升高的同时，胸腺细胞GR的表达水平升高，胸腺细胞的总数量明显减少〔37〕。此外，进一步研究显示，GC在某种程度上，还可通过作用于滤泡树突细胞(FDC)调节生发中心、影响体液免疫反应〔38〕。

针刺对免疫功能的调节作用有赖于神经系统和内分泌系统的完整性，且与HPA轴的联系更甚〔39〕。在对CFS患者的针刺治疗中发现，针刺可调节CFS的免疫功能〔23，24〕，其作用可能是通过提高CFS患者的血清ACTH、COR水平、调整了HPA轴相关激素的分泌而实现的〔40〕。而电针刺激慢性疲劳大鼠，可使模型大鼠T细胞及细胞因子的水平恢复正常〔31〕，同时可使升高的ACTH、CORT和CRH浓度明显降低〔41〕。此外，有研究发现，电针对泼泥松导致的多种免疫反应的降低有上调作用，而摘除双侧肾上腺的动物，电针对免疫反应的调节作用被消除，说明垂体-肾上腺轴在免疫反应中的重要地位〔42〕。由上，神经内分泌中HPA 轴及其相关激素影响和调节免疫功能，可能为针刺调节免疫功能的重要作用途径之一。

3 针刺对AD免疫功能的调节作用及机理探讨

近期一项研究显示，手法运针刺激焦虑妇女后溪、少海、通里、内关等穴位，分别于针刺72 h后和1个月后取血，与针刺前比，外周血中中性粒细胞趋化、吞噬作用明显增强，淋巴细胞趋化、NK细胞活性明显增强，过高的淋巴细胞增殖明显降低，过低的淋巴细胞增殖明显升高〔3〕。结果表明，针灸明显提高了焦虑妇女受损的免疫功能，并且明显降低了过高的免疫指标，使免疫指标接近健康对照组，对免疫系统有较好的调节作用〔3〕。

依据上述AD存在免疫功能的异常，针刺对CFS或应激模型等的免疫功能的调节效应及机理，以及针刺对AD患者受损的免疫功能调节的相关研究成果，均提示针刺有可能通过调整神经内分泌特别是HPA轴系统来发挥调节AD的免疫功能。然而目前有关针刺对AD免疫功能的调节机制研究尚未见报道。结合本实验室前期研究，发现焦虑障碍的发生和HPA轴功能紊乱关系密切〔43〕。慢性情绪应激焦虑模型大鼠的HPA轴被激活，血清CORT的含量升高，电针能降低血清CORT的含量〔44〕。故此，本文提出针刺调节AD免疫功能紊乱的机制可能为：一方面，针刺通过抑制AD模型动物下丘脑室旁核CRH和垂体ACTH的释放，减少GC的分泌，从而抑制HPA轴的活性，影响免疫分子(免疫球蛋白、细胞因子等)功能。另一方面，针刺通过降低GC的水平，减少胸腺细胞GC受体的活性，进而阻止GC对胸腺T淋巴细胞免疫的抑制作用；或改变FDC对体液免疫的影响，最终发挥针刺对AD免疫功能损伤的调节作用。

综上所述，本文从AD免疫功能的紊乱、针刺对免疫功能的调节效应和机理，以及针刺对AD免疫功能的调节三方面论述，探讨针刺调节AD免疫功能紊乱的可能机制，为阐明针灸抗焦虑、调节免疫损伤的作用机制研究提供科学的理论依据和设计思路。

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