战 英 张培军 赵一晖 陈俊竹
吉林省卫生监测检验中心,吉林 长春 130062
医学检验
高效液相色谱法测定安神补脑片中淫羊藿苷含量
战 英 张培军 赵一晖 陈俊竹
吉林省卫生监测检验中心,吉林 长春 130062
目的分析高效液相色谱法在安神补脑片中淫羊藿苷含量测定中的应用价值。方法采取Kromasil C18柱,乙腈:水(35:65)为流动相,在270 nm波长下对安神补脑片中淫羊藿苷含量进行检测。结果淫羊藿苷质量浓度在5.01~50.1 ug/ml之间存在良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为99.62%,RSD值为1.32%。结论采取高效液相色谱法对安神补脑片中淫羊藿苷含量进行测定,操作简单、灵敏,结果准确可靠、重现性好,值得推广。
高效液相色谱法;安神补脑片;淫羊藿苷;含量测定
本次研究中出于对安神补脑片的质量进行有效控制的目的,采取高效液相色谱法对安神补脑片中淫羊藿苷含量进行了测定,现汇报结果如下。
本次实验中所需实验仪器包括Agilent 1100型高效液相色谱仪,AG245型电子天平,UV-2401PC型紫外分光光度计。淫羊藿苷对照品、安神补脑片,乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。
2.1 方法
(1)色谱条件:色谱柱为:Kromasil C18柱,规格为250 mm×4.6 mm,5 um;流动相为乙腈:水(35∶65),流速为0.7 ml/min;柱温为30℃;进样量为10 ul;检测波长为270 nm;(2)溶液制备:①对照品溶液制备:精密称定适量淫羊藿苷对照品,置于100 ml容量瓶中,利用甲醇定容并摇匀,精密吸取上述溶液2 ml,放置在20 ml的容量瓶中,利用甲醇定容并摇匀,得10 ug/ml的对照品溶液。②供试品溶液制备:取3片供试品并研细,精密称量后置于100 ml容量瓶中,经甲醇溶解后超声处理30 min,冷却至室温,经甲醇定容至刻度,滤过后精密量取续滤液1 ml,放置在10 ml的容量瓶中,经甲醇定容至刻度作为供试品溶液。取不含有淫羊藿药材的阴性样品按照上述方法制成阴性对照品溶液;(3)取(2)中所配对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液在相应色谱条件下进样检测。
2.2 结果
取供试品溶液并对淫羊藿苷含量进行测定,结果发现样品中淫羊藿苷质量浓度为10.57%,含量为3.52 mg/片。
2.3 方法学考察
(1)线性关系考察。精确称取10.06 mg淫羊藿苷对照品,在100 ml容量瓶中经甲醇溶解后定容,分别精密吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 ml,在20 ml容量瓶中经甲醇定容至刻度,摇匀后在上述色谱条件下进样检测,以峰面积作为纵坐标,淫羊藿苷质量浓度作为横坐标,绘制标准曲线,得到线性回归方程Y=29.551X+2.3551,r=0.9997,RSD值为0.13%(n=5),证实仪器精密度良好;(2)稳定性实验:取供试品溶液,分别在0、4、8、16、24 h后进样检测,计量淫羊藿苷的峰面积。结果发现峰面积RSD值为1.02%(n=5),证实供试品溶液在24 h内具有良好的稳定性;(3)重复性实验:取供试品溶液连续进样6次,记录淫羊藿苷的峰面积,结果得到峰面积的RSD值为0.63%(n=6),证实该方法具有良好的重复性;(4)加样回收实验:分别称定适量已知含量的样品,精密加入适量对照品,称量供试品溶液,在2.1所示条件下进样检测。计算回收率。结果详见表1。
目前现行的安神补脑片药品标准中并不存在对处方中淫羊藿展开质量控制的指标[1-2]。本次实验中出于对安神补脑片中淫羊藿苷含量进行测定的目的,采取2.1所示高效液相色谱法展开了含量测定,结果发现,该方法具有灵敏、简便、准确等优势,重现性和分离度均能达到含量测定要求,可准确测出淫羊藿中有效成分淫羊藿苷的含量,能对处方中其他药材所含成分的干扰进行有效排除,专属性号,为安神补脑片的质量控制提供了可靠的参考依据,值得关注。
表1 淫羊藿苷加样回收实验结果统计
[1]于文静,侯放,王焕群.高效液相色谱法测定藤黄健骨丸中淫羊霍苷的含量[J].中国药品标准,2009,12(3):222-223.
[2]赵满靖,郑国平.高效液相色谱法测定麟生颗粒中淫羊藿苷的含量[J].海峡药学,2010,13(10):24-25.
R286
B
1674-9316(2014)15-0068-02
10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.15.042