原发免疫性血小板减少性紫癜的遗传学研究进展＊

徐颜美，邓立彬综述，王小中△审校

（1.南昌大学第二附属医院检验科 330006；2.南昌大学转化医学研究院 330006）

原发免疫性血小板减少性紫癜（primary immune thrombocytopenic，ITP）是一种获得性自身免疫性疾病，主要由血小板生成减少和血小板破坏增多引起，临床表现为全身皮肤黏膜及内脏出血。目前，研究广泛认为遗传因素在ITP发病过程中起至关重要的作用，但其具体分子机制仍不清楚。最新流行病学数据显示ITP的家族发病率为2.57%（12／466）。基于样本量和研究方法的局限，既往研究大多采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR－RFLP）和酶联免疫吸附实验（ELISA）等方法从基因和蛋白水平寻找ITP致病因素。迄今为止，研究者发现至少63种基因与ITP存在关联，为深入阐释其发病机制提供了重要线索。本文主要从免疫和DNA甲基化两个方面对ITP的遗传学研究进展进行简要综述。

1 免疫相关基因

ITP是一种自身免疫性疾病，因此免疫方面相关基因成为研究ITP遗传的重点。研究主要集中在细胞因子、分化抗原簇、Fcγ受体及人类白细胞抗原（HLA）等方面的基因。

1.1 细胞因子

1.1.1 白细胞介素（interleukin，IL） IL由淋巴细胞、巨噬细胞等产生，主要对T、B细胞的成熟、活化及其生物学功能的调节起作用。IL－1参与B淋巴细胞整个发育过程。研究报道IL－1RN VNTR和IL－2－330多态性与巴西人群ITP有显著性相关，IL－1RA A1／A2多态性与土耳其ITP有关联［1－2］，而IL－1β（－511C／T和＋3953T／C）多态性与日本ITP人群的关联结果不一致，结果提示IL－1可能是ITP的致病基因之一，但仍需要进一步研究证实［3］。IL－3参与巨核细胞发育成熟全过程，直接影响血小板生成。IL－4、IL－6、IL－10主要由 Th2细胞产生，通过调控Th1／Th2极化参与ITP发病机制。Wu等［4］报道IL－4intron3和IL－10（－627）基因多态性与儿童慢性ITP存在显著关联，与IL－6无关。然而，Chen等［5］发现IFN－γ＋874A／T和IL－4intron 3VNTR多态性与中国ITP人群无关。因此，IL－4intron3基因多态性与中国ITP的关联性仍有争议。

1.1.2 其他细胞因子 Ruchira等［6］应用全基因组DNA芯片对ITP进行基因表达谱分析，发现ITP组IFN基因表达增高，提示IFN基因异常可能引起ITP致病。Pehlivan等［2］对多种细胞因子与土耳其ITP的关联性进行多态性分析，发现TGF－β（codon10）TT基因型频率在病例组显著降低（P＝0.016），TNF－α（－308）AG基因型和IFN－γ（＋874）TT基因型频率显著增高（P＜0.05），提示以上细胞因子在ITP发病机制中起着重要作用。

1.2 分化抗原簇（cluster of differentiation，DC） CD分子中CD70或CD11a有助于T、B淋巴细胞生存，从而间接增强ITP患者血小板破坏的功能。研究发现ITP组CD70和CD11a mRNA水平显著高于健康组。有研究认为抑制CD47／SIRPα信号来调控血小板吞噬是ITP的发病机制之一［7］。CD41和CD61作为巨核细胞表面特异性标记分子，在巨核细胞形成和血小板产生过程中起至关重要的作用。CD72是B细胞的抑制性受体，有文献报道急性ITP患者CD72mRNA表达水平显著低于对照组（P＝0.0296）［8］，提示CD72可能通过增强B细胞受体信号参与ITP发病。此外，CD86可能通过CD86／CD28共刺激途径参与ITP发病机制。血小板表面Toll样受体（TLRs）是新近发现的天然免疫受体，识别并结合病原微生物，激活信号传导途径，诱导某些免疫效应分子的表达。儿童ITP患者存在天然免疫的缺陷，由于某些未知机制使CD86表达增高，获得性免疫应答过强导致一系列细胞因子失调，进而导致ITP的发生。

1.3 FcγR相关的易感基因 研究表明由FcγR介导的抗血小板抗体致敏的血小板被巨噬细胞吞噬破坏为ITP致病的主要原因。在加拿大、埃及和澳大利亚等不同国家研究者发现FcγRⅡA－131H／R和FcγRⅢA－158F／V基因多态性与ITP有关联［9－11］。然而，日本研究者表明 FcγRⅡA－131R／H 基因多态性与ITP无关，而FcγRⅢA－158F／F基因多态性与ITP存在弱相联，且FcγRⅢA－158V／V基因多态性可能影响ITP的治疗疗效［12］。此外，有研究表明FCGR2C－ORF基因在自身免疫性疾病中过表达，且34%的急性ITP患者发现有开放阅读框ORF等位基因，提示FCGR2C－ORF通过活化和抑制免疫细胞的FcγR，从而导致自身免疫疾病的发生［13］。最近，我国研究者发现FcγRⅡB－232基因多态性与ITP存在显著关联（P＝0.024）［14］。基于以上研究结果的一致性提示FcγR相关的易感基因作为ITP最具潜力的候选基因，有望成为目靶基因应用于ITP的诊断和治疗。

1.4 HLA相关基因 早在1995年，中国阮长耿院士就采用PCR－RFLP方法对HLA－DPB1等位基因和ITP的关联性进行病例对照研究，结果发现 HLA－DPB1＊1301和 HLA－DPW2抗原纯合子增强了ITP的易感性，而HLA－DPW2抗原杂合子可能对罹患ITP具有保护作用。随后，Wang等［15］报道HLADRB1＊17与儿童ITP相关（P＜0.05）。此外，日本和埃及研究者均发现HLA－DRB1与ITP有显著性关联［16］。尽管有多项研究表明HLA－DRB1与ITP具有显著性关联，然而在北印第安ITP人群中却发现 HLA－DRB1与ITP无关，且 HLADRB1与类固醇激素治疗疗效也无关［17］。由于受HLA基因多态性、种族地域、样本大小、实验方法等多种主客观因素的影响，国内外的研究报道结果不一致，但是也证实了HLA与ITP存在一定程度的关联。

1.5 其他易感基因 B细胞活化因子（B cell activating factor，BAFF）是肿瘤坏死因子家族的一个配体，在B细胞生长、抗体产生过程中起重要作用。BAFF过表达能破坏B细胞免疫耐受，导致自身免疫性疾病的发生。Emmerich等［18］发现高加索人群中急性ITP患者血清BAFF的水平显著高于正常对照组（P＜0.01），且BAFF－871多态性基因频率比正常组高，提示BAFF基因多态性与高加索人ITP发病有关。中国和埃及研究者也都证实 BAFF－871C／T 与ITP有关联［19－20］。以上研究显示BAFF基因多态性与ITP的关联在多个种族中得到验证，提示BAFF基因可能作为ITP的可靠致病基因之一。PTPN22是一种编码在T细胞受体信号在传播途径上起调节作用的蛋白酪氨酸磷酸酶，主要存在于淋巴细胞内。研究发现高加索ITP人群存在PTPN22 1858C／T突变［21］。中国研究者报道PTPN22 1123G＞C基因多态性频率显著性高于对照组（P＝0.034），其结果进一步支持PTPN22基因作为一种常见的自身免疫性疾病基因。细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte－associated antigen－4，CTLA－4）是 T细胞上的一种跨膜受体，参与免疫反应的负调节。尽管有研究报道CTLA－4exron1（49A／G）多态性与多种自身免疫性疾病有关联，但在中国和高加索人群中这一结果未得到验证［22－23］。

2 DNA甲基化相关的易感基因

DNMT3B是一种DNA甲基化过程中的关键转移酶，DNMT3B基因多态性影响DNA甲基化转移酶的活性，从而引起一些疾病的发生。由于地域、种族等的差异，DNMT3B基因在不同种族中ITP的关联结果不一致。中国研究表明，DNMT3B基因多态性与中国ITP无关［24］。Khorshied等报道DNMT3B－579TT基因型与埃及ITP有关，然而Shaheen等发现DNMT3B基因多态性与埃及儿童ITP无关，因此，DNMT3B多态性与埃及ITP的关联性至今仍有争议。最近，Pesmatzoglou等［25］在德国人群中发现DNMT3Brs2424913基因多态性与儿童ITP有关（P＝0.03）。

3 展 望

虽然许多研究者采用候选基因法对ITP进行大量遗传学研究，发现许多有意义的致病基因，但由于研究方法局限和样本量不足等缺陷，某些基因与ITP的关联性结果在不同种族甚至同一种族间仍有很大的争议。近年来随着高通量技术的飞速发展，在全基因组水平上寻找复杂疾病的致病基因已成为国际研究的热点，并且也取得了相当显著的成绩，极大地促进了人类遗传学的发展。值得深思的是，迄今为止尚未有研究报道采用无偏移的全基因组关联研究方法对ITP疾病进行遗传学分析。因此，为全面深入阐释ITP病因学发病机制，使用可靠的无偏移的高通量技术手段在全基因组水平上寻找ITP致病基因迫在眉睫。

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