葡萄霜霉菌发生过程超微形态观察

邵信儒，姜自军，徐 刚，朱俊义

(1.通化师范学院 制药与食品科学学院,吉林 通化134002；2.国家果酒及果蔬饮品质量监督检验中心；3.通化师范学院 生命科学学院,吉林 通化134002,吉林 通化134000)

霜霉病为鞭毛菌亚门真菌，是葡萄栽培过程中发生最普遍的病害之一[1]．霜霉病在东北地区的发病高峰在6月下旬至8月中旬，高温高湿通风不良的条件发病较重[2]．病菌以卵孢子在枝芽病叶、主干老皮和土壤中越冬，第二年春季在适宜条件下萌发，产生孢囊梗和孢子囊，借助于雨水传播和反复侵染．该病主要危害叶片，也能害新梢、花蕾和幼果．叶片发病初期出现水渍状黄色斑点，后扩展为黄褐色不规则斑点，叶背产生灰白色霉层，后期霉层变为褐色，病叶逐渐枯死脱落．幼果感病初期，病部变成淡绿色，后期病斑变深褐色下陷，产生一层霜状白霉，果实变硬萎缩、脱落，成熟果不发病．发生后，光合作用效率降低，叶片极易脱落，影响物质的积累，对次年的产量影响较大[3-7]．本文利用扫描电镜观察了葡萄霜霉菌的超微形态特征，有助于进一步了解霜霉菌的生物学特性．

1 材料和方法

葡萄品种为双优，取自通化市鑫园葡萄酒股份有限公司葡萄栽培基地，海拔460 m．取材时间为2013年6月30日．采集的双优葡萄病害叶片，用FAA固定液固定．

在体视镜下选取适于观察的材料，在无水乙醇中脱水30min，换入丙酮内30min，再放入醋酸异戊酯内20min，而后进行临界点干燥．把样品固定在样品台上，进行离子溅射镀金膜，用HITACHI S-3000N型扫描电子显微镜观察、拍照[8]．

2 实验结果

葡萄霜霉菌的越冬卵孢子，首先传播到寄主叶片上，形成大量的菌丝，进行营养生长．之后再进行繁殖生长，在气孔处形成丛生的管状孢囊梗(图版I，1～3,9)，孢囊梗上端向上生长(图版I，4～6)，并形成分枝(图版I，7～10)，分枝的孢囊梗顶端膨大形成大量孢子囊，孢子囊球形(图版I，11～14)，大量孢子囊聚集在叶片表面形成“霜粉层”(图版I，15)．

3 讨论

图版I 葡萄霜霉菌发生过程电镜观察

1～3.游动孢子在气孔处萌发；4～6.游动孢子萌发形成大量菌丝；7～9.菌丝上开始形成孢子囊；10～14.孢子囊梗形成大量孢子囊；15.由孢子囊形成的“霜粉层”

湿度对霜霉菌侵入的影响最大，霜霉菌孢子囊需要在水滴里进行萌发生长，湿度高对病原的侵入有利,在高湿度下,气孔开张度大,水孔泌水多而持久，保护组织柔软,从而降低了植物抗侵入的能力[9]．所以，在气孔处容易观察到丛生的霜霉菌孢囊梗．葡萄霜霉病菌的孢子囊在13～24℃时萌发所需的时间是1h，在28℃时所需时间为6h以上，而在4℃时则需要12h，说明温度也是葡萄霜霉菌孢子囊萌发的重要因素[9]．高温高湿是葡萄霜霉病菌发生的重要条件．

参考文献：

[1]肖志坚,纪艳,刘德江,等.高寒地区山葡萄优质丰产栽培模式研究[J].北方园艺,2010(18):72-73.

[2]李晓红,宋润刚,杨义明,等.山葡萄霜霉病的研究现状及防治对策[J].北方园艺,2010(13):189-192.

[3]赵奎华.葡萄病虫害原色图鉴[M].北京:中国农业出版社,2011.

[4]宋润刚,李晓红,路文鹏,等.东北山葡萄霜霉病防治技术研究[J].中外葡萄与葡萄酒,2001(3):15-16.

[5]张仁,颜有明.葡萄霜霉病暴发原因及防治对策[J].福建农业科技,2011(4):60-62.

[6]黄文萍,孙之巍.葡萄霜霉病的发生及防治[J].河北林业科技,2011(4):84-85.

[7]朱俊义,邵信儒.通化地区山葡萄病害特点及其综合防治[J].通化师范学院学报,2012(12):47-49.

[8]迟杰,邵信儒,姜自军,等.双优葡萄花器官发育及农药使用[J].通化师范学院学报,2013(12):64-65.

[9]刘延琳.葡萄霜霉病的流行病生物学[J].葡萄栽培与酿酒,1994(3):24-25.