正交设计优选依沙吖啶溶液的处方及制备工艺

王芳芳 (解放军175医院/厦门大学附属东南医院药学科，福建 漳州 363000)

依沙吖啶(商品名：利凡诺)溶液外用于杀菌防腐，对G+菌及少数G-菌有较强的杀灭作用[1]，对球菌尤其是链球菌的抗菌作用较强，可用于创伤、黏膜感染及急性、亚急性皮炎、湿疹等皮肤病糜烂渗出期的治疗，也可用于含漱。本品刺激性小，在临床上使用较广，但因其稳定性差，遇高温、高压、光照会逐渐变质，产生黄棕色沉淀，所以配制后应避光、密闭保存。在临床使用中，常因质量下降或变质而给医院造成经济损失。

按照《中国医院制剂规范》配制的依沙吖啶溶液以硫代硫酸钠作为抗氧剂[2]。但有文献报道称，硫代硫酸钠与依沙吖啶存在配伍禁忌[3]。对乙氧基苯胺是一种被国内外广泛研究的抗氧剂[4]，可用于生产解热镇痛药非那西丁、安痨息和消毒防腐药依沙吖啶，虽然一定量的对乙氧基苯胺具有急剧毒性，但充当外用溶液的抗氧剂时浓度极低，远未达到中毒量，具有一定的生物安全性。故本实验将以对乙氧基苯胺为抗氧剂，探索其对依沙吖啶稳定性的影响。

笔者应用正交设计试验对依沙吖啶溶液进行稳定性考察和处方优选，以期为医院配制依沙吖啶溶液提供更经济有效的方案。

1 仪器与试药

1.1仪器 RHS-3C精密酸度计(厦门分析仪器厂)；2550型紫外分光光度计(Shimadzu公司)；HH-W420恒温水浴箱(金坛市科析仪器有限公司)；KQ-300DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；氮气(林德气体)。

1.2试药与试剂 乳酸依沙吖啶(药用，辽源市迪康药业有限责任公司)；对乙氧基苯胺(Sigma Aldrich Corp，批号：33943)；乳酸和乙醇(化学纯，西陇化工股份有限公司)；浓硫酸(化学纯，三明市三元化学试剂厂)；纯化水(解放军175医院自制)。

2 方法与结果

2.1正交表设计及因素水平试验 拟定影响依沙吖啶溶液稳定性的3个因素，即pH值、抗氧剂和惰性气体，其因素水平见表1。

表1 处方因素水平表

2.2依沙吖啶溶液的配制及加速试验 在100 ml棕色容量瓶中加入现配的1%依沙吖啶溶液，按表1正交实验表L9(33)设计，以适量乳酸调节pH值后，加入定量现配的5%对乙氧基苯胺母液，再用1%依沙吖啶溶液定容，混合均匀，最后通氮气，密封即得。每组方案做3个平行实验。

采用初匀速法[5]，将已配制好的依沙吖啶溶液分装于30 ml的棕色塑料瓶，分别置于40、45、50、55、60、65和70℃恒温水浴锅中，依次分别用水温维持6.0、5.5、5.0、4.5、4.0、3.5和3.0 h。然后精密量取水浴前后的依沙吖啶溶液各2 ml，置于100 ml容量瓶中，再用0.05 mol/L硫酸液稀释配得供试品溶液。

2.3紫外分光光度法测定含量并计算残存率 以0.05 mol/L硫酸液为空白，供试品溶液在波长362 nm处有最大吸收，故本实验选在此处测得溶液置水浴前、后的吸光度A0及A。

按下式计算水浴后供试品中依沙吖啶的浓度:

C=(A/A0)C0

再以C0为100%将C换算成残存率(%)。数据处理列于表2。

表2 依沙吖啶溶液加速实验后的残存率(%)

2.4室温贮存有效期预测 分别以依沙吖啶溶液在不同条件下分解初速度的对数lg[(100-C)%/t]对温度的倒数1/T回归，得出9种组合条件的直线方程，再将T=298.2K代入方程，分别推算室温25℃的贮存期(表3)。

表3 不同条件下的依沙吖啶溶液的室温贮存期

2.5正交试验结果分析 正交试验及方差分析结果见表4、表5。

表4 正交试验L9(34)及结果

根据分析结果可知，惰性气体对试验结果有显著影响，pH值对结果也有较大影响，而抗氧剂对乙氧基苯胺对结果的影响相对较小。优化处方为A1B3C3，即在pH 4.0，0.10%对乙氧基苯胺+通氮

气2 min时，依沙吖啶溶液的稳定性最好，贮存期最长达16.1个月。

表5 正交试验方差分析

F0.05(2,2)=19.00

进一步分析发现，处方A2B1C3依沙吖啶溶液的稳定性仅次于处方A1B3C3，贮存期为15.6个月。而且处方A2B1C3未添加抗氧剂，pH值更接近人体，溶液刺激性较小，同时考虑到生产成本及操作难易等问题，处方A2B1C3最佳，即维持在pH 4.5+通氮气2 min。

3 讨论

本试验数据显示，抗氧剂对实验结果的影响较小，但不能否定其作用。因为，惰性气体已将溶液中的部分氧除去，相对于未通氮气的情况，抗氧剂的抗氧化优势不易体现。

对乙氧基苯胺极易氧化，实验中本品母液需做特殊处理，如通氮气去氧、现配现用等。

本试验采用乳酸调节溶液的pH值，为避免每次配制溶液都调节酸碱度，操作烦琐导致依沙吖啶溶液及抗氧剂对乙氧基苯胺迅速氧化变质。笔者通过预实验确定依沙吖啶溶液达到指定pH值所需的乳酸量基本稳定。在实际操作中，直接量取预定量的乳酸加入混匀，调节pH值后再加抗氧剂，可简化操作程序，提高贮存的稳定性和重现性，降低因抗氧剂造成的系统误差。

影响依沙吖啶溶液稳定性的还有许多其他因素。王劲等[6]认为，依沙吖啶的不稳定现象与生产所用水质有极大关系。注射用水制备的依沙吖啶溶液稳定性优于纯化水。张又才、王之训等[7,8]的实验结果显示，光线对依沙吖啶溶液的分解有很大影响。光照时间越长，含量下降越多，故要注意避光贮放，且棕色玻璃瓶的遮光效果及密闭性优于棕色塑料瓶。同时，温度对依沙吖啶溶液的影响也较大[13]，温度越高，分解反应速度越快，故应将药品贮存在阴凉处。

综上所述，pH值、抗氧剂及惰性气体对依沙吖啶溶液稳定性都有增强作用，3种因素对依沙吖啶溶液稳定性的影响程度为惰性气体>pH值>抗氧剂。为了继续发挥依沙吖啶溶液刺激性小的优势，并且综合考虑医院制剂生产成本等经济效益问题，选择只通氮气、不添加抗氧剂、呈酸性而较为缓和的处方A2B1C3作为本实验得出的最优选择。实验后期还应设计补充性实验，寻找医院配制依沙吖啶溶液的最优方案。

【参考文献】

[1] 白瑞芝．利凡诺在外科换药中的应用[J]．临床合理用药，2009，2(9)：13．

[2] 中华人民共和国卫生部药政局．中国医院制剂规范[M]．2版．北京：中国医药科技出版社，1995：23-24．

[3] 胡晓波，饶 丹．依沙吖啶溶液处方中加入硫代硫酸钠的合理性的考察[J]．贵州医药，2007，31(8)：736．

[4] Pambor MA.p-phenetidine containing antioxidant as an occupational eczematogenic agent in the manufacturing of special feed mixtures[J]．Berufsdermatosen，1971，19(6)：285-291．

[5] 任飞宇，赵常青．利凡诺溶液的稳定性考察[J]．西北药学杂志，2009，24(6)：485-486．

[6] 王 劲，杨天燕，张靖贤．不同水质对依沙吖啶溶液稳定性的影响[J]．医药导报，2003，22(9)：642．

[7] 张又才，程义琳．依沙吖啶溶液稳定性考察[J]．中国药师，2003，6(2)：88．

[8] 黄之训，张惠芳．不同载体及配方的乳酸依沙吖啶溶液稳定性考察[J]．中国医院药学杂志，2006，26(8)：1023-1024．

[9] 颜宏生，杨艺华．乳酸依沙吖啶溶液沉淀原因探讨[J]．临床合理用药，2009，2(13)：112．