麦冬提取物“抗肿瘤Ⅰ号”小鼠体内抑瘤作用

张桂贤，刘大卫，胡人杰

(天津市医药科学研究所，天津 300020)

癌症在当今社会仍然是一个生命健康的杀手，是严重威胁人类的一种疾病。目前市场上已存在不少种类的抗癌药物，但由于存在药物毒性、作用差异和交叉耐药等问题难以解决，开发新型抗肿瘤药物一直是新药研发的热点。植物来源的抗肿瘤药物的发现及抗癌机理的研究是最活跃的研究领域之一，目前多种抗肿瘤天然药物已用于临床治疗。

1 实验材料

615小鼠、C57小鼠、裸小鼠(BALB/c,nu/nu)，SPF级；其中615小鼠由中国医学科学院血液病研究所实验动物室提供；其余均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，生产许可证号SCXK(京)2012-0001。麦冬提取物，褐色固体，无明显气味,微溶于水(实验时以1%羧甲基纤维素钠为助溶剂进行配制)，由北京同仁堂股份有限公司提供；环磷酰胺注射剂(CTX)，为瓶装粉针剂，200 mg/瓶，江苏恒瑞医药股份有限公司生产，H32020857，产品批号：12041025。L615，由中国医科院血液病研究所细胞库提供；PG，由北京大学医学部病理系细胞库提供；Lewis肺癌，由本所传代保存。电子天平,T500型，d=0.1 g，美国双杰兄弟(集团)公司，常州常熟双杰测试仪器厂生产。电子精密天平，PB303-N型，d=0.001，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司生产。

2 实验方法

2.1 动物模型的建立 1)L615的接种：615小鼠具有其特殊性，本次试验中先将L615细胞(由中国医学科学院血液病研究所提供)接种于615小鼠腋下(2只)作为瘤源,6 d后取其中1只断颈处死，取其脾(本模型特点为动物形成巨脾)，放入玻璃研磨器按1∶3(g/mL)比例加入适量生理盐水研磨成细胞悬液后，接种于615小鼠的右前肢腋皮下,0.2 mL/只。此种动物模型接种部位不形成肿瘤，而是形成白血病模型。接种后，对照组动物7 d左右陆续出现死亡，观察实验组动物给药后生存期是否延长，以评价药效[1]。2)C57小鼠Lewis肺癌[2]接种、裸鼠[3]PG的接种:取生长良好的7～10 d 的实体瘤荷瘤鼠2只，剔除包膜和坏死部分，将完好的瘤块置于玻璃匀浆器内研磨，与生理盐水1∶3(g/mL)制成匀浆，调整细胞数为5×106/mL，制成细胞悬液，接种于小鼠的右前肢腋皮下，0.2 mL/只(含细胞数1×106/mL)。整个过程均在无菌条件下操作。

2.2 给药方案 预实验时，采用常规给药方法，连续给药7 d，实验结束时，显示出较高的抑瘤率及病死率，遂决定采用大剂量突击疗法，即高剂量给药3 d，中剂量2 d，低剂量1 d。经预试后，获得较满意结果。给药剂量：预实验结果显示，样品LD50在4～5 g/kg之间，设其1/5 LD50为给药剂量，高剂量组以1 g/(kg·d)连续3 d，中剂量组以1 g/(kg·d)连续2 d，低剂量组以1 g/(kg·d)仅给1 d。共分5组：空白对照组(生理盐水，灌胃)、环磷酰胺对照组(50 mg/kg,0.1 mL/10 g,腹腔注射)、样品高剂量组、中剂量组和低剂量组(灌胃)。于肿瘤细胞接种后24 h开始给药。

抗肿瘤活性分别以肿瘤抑制率和动物生命延长率评价。[4]

3 结果

3.1 抗肿瘤1号对实体型肿瘤的抑瘤作用 实验结束时，对照组平均瘤质量在1 g以上，最小瘤重均大于0.4 g。环磷酰胺组和抗肿瘤1号给药组平均瘤质量和抑瘤率与阴性对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

抗肿瘤1号的抑瘤作用见表1、2。Lewis肺癌抑瘤作用可达61.98%，PG抑瘤作用可达73.54%。

表1 Lewis肺癌抑瘤作用

注：与空白对照组比较，#P<0.05，##P<0.01

表2 裸鼠PG抑瘤作用

注：与空白对照组比较，#P<0.05，##P<0.01

3.2 对白血病小鼠的作用 抗肿瘤1号能明显提高对615小鼠的生存质量,延长615小鼠的带瘤生存时间，生命延长率可达到68.42%，见表3。

表3 L615白血病小鼠生命延长作用(n=10)

注：与空白对照组比较，#P<0.05，###P<0.001

4 讨论

各组动物移植瘤生长情况良好，试验模型成立。抗肿瘤Ⅰ号具有明显的体内抗肿瘤活性。而且，该样品不论是对荷瘤鼠的抑瘤率还是对鼠的生命延长率均显示出抗肿瘤活性。随着给药剂量的增加，实体瘤的抑瘤率随之增加，腹水瘤的存活时间延长，体现出一定的量效关系。

[1]Yihong Huang,Bing Du,Kailin Xu etd.同基因混合G-CSF动员的异基因骨髓移植物诱导的抗白血病效应[J].中德临床肿瘤学杂志(英文版),2008,7(9):549-554.

[2]陈学彰,田华琴,黄志庆,等.肺积方对Lewis肺癌小鼠抑瘤率及EGFR、TNF-α表达的实验研究[J].中西医结合研究,2013,5(1):17-20.

[3]顾丹琳,舒琦瑾,王彬彬.南方红豆杉水提物对肺癌裸鼠抑瘤作用及生活质量影响的研究[J].浙江中医杂志,2013,48(11):853-854.

[4]胡钊,李永生,赵诚.粉防己碱联合阿霉素对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞裸鼠移植瘤抑瘤率影响的研究[J].现代泌尿生殖肿瘤杂志,2013,5(1):41-44.