蒙成药扎冲十三味丸对预处理急性脑梗死大鼠的影响

陶 春 林 琳 宋葆华 强 欣 张 娟 汤文莉 刘月英

(内蒙古民族大学医学院，内蒙古 通辽 028000)

蒙成药扎冲十三味丸是蒙医治疗脑血管病的常用药物，在蒙医临床脑梗死的治疗中，发挥着极为重要的作用。本研究用大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血(MCAO)模型，对模型行扎冲十三味丸预处理，比较模型组和扎冲十三味丸组大鼠神经功能行为评分，比较脑组织梗死区重量及梗死区重量/全脑重量的大小，观察脑缺血组织光镜下病理结构变化特点，探讨蒙成药扎冲十三味丸对脑缺血缺氧损伤的保护作用，进一步明确其临床疗效，以指导临床正确使用此药。

1 材料与方法

1.1动物与分组 清洁级Wistar大鼠36只，体重220～260 g，雌雄不拘，由吉林大学实验动物中心提供〔许可证：SCXK(吉)，2011-0004〕，动物分笼饲养(环境温度24℃～26℃，湿度60%～70%)，自由饮水，术前12 h禁食。将大鼠随机分为3组，即正常组、模型组、扎冲十三味丸组。

1.2试剂与仪器 扎冲十三味丸由内蒙古民族大学附属医院提供，TTC溶液购于美国Sigma公司，水合氯醛为天津市河北区海晶精细化工厂产品。多聚甲醛购于上海凌风化学试剂有限公司，PBS溶液购于博士德公司。

1.3方法

1.3.1给药方法 扎冲十三味丸以蒸馏水配制成2%浓度，经灌胃给药，实验前给药，按5 ml/kg给药。模型组均给予同量的蒸馏水。正常组在同一环境下饲养。

1.3.2模型建立 采用线栓法Zea-Longa〔1〕制备大鼠MCAO模型。将大鼠以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，40倍显微镜下手术，颈正中切口，分离右侧胸锁乳突肌，暴露右颈总动脉(CCA)和颈外动脉(ECA)显露，沿着CCA向上分离，见分叉处，向内行走分叉为ECA，向外下行走的为颈内动脉(ICA)。结扎ECA，结扎CCA近心端，在距分叉处约1 cm的血管壁上剪一小口，沿切口插入栓线，将栓线送进ICA。距离分叉处约2 cm，有阻力感，停止进入。缝合皮肤，剪去暴露在外的栓线，术后注意保暖，大鼠麻醉清醒后进行神经行为学观察。

1.3.3模型成功标志 大鼠苏醒后按Zea-Longa的5分评分标准进行神经功能缺失评分。0分：无明显神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：行走时向对侧旋转；3分：行走时向对侧倾倒；4分：不能自发行走，意识丧失。

1.3.4指标检测 在造模清醒后，全部选择行走时向对侧旋转的模型大鼠为有效模型，评分为2分的大鼠，观察期内，没入选及死亡的大鼠予以剔除，剩余每组6只，在手术后24 h处死前再次评分。

1.3.5脑梗死体积测定 每组6只大鼠，在手术后24 h，麻醉后处死，快速取出脑组织，放入-20℃冰箱中冷冻15 min， 自额极向后冠状面切成2 mm厚切片，放入1%TTC溶液中，避光，37℃水浴箱中孵育30 min，PBS液冲洗后置4%多聚甲醛固定。

1.3.6取脑组织做HE染色 取4%多聚甲醛中固定的脑组织，HE染色，光镜下观察其病理变化特点。

2 结 果

2.1扎冲十三味丸预处理对大鼠神经功能缺损的影响 MCAO造模手术结束后， 除正常组外，选择所有在术毕清醒后向对侧旋转的脑缺血大鼠，神经功能缺损症状均为2分，造模成功，24 h后，处死前再次评分，结果如下：模型组：3分的有3只，4分的有2只，2分的有1只，平均神经功能缺损为(3.167±0.408)分；扎冲十三味丸组，1分的有5只，2分的有1只，平均神经功能缺损评分为(1.167±0.753)分。经过预处理，扎冲十三味丸组神经功能缺损症有5只明显好转，有1只没有明显改变，模型组都有不同程度的严重，3只3分，2只4分，1只变化不明显。

2.2扎冲十三味丸对脑梗死重量的影响 正常组脑组织显示为红色，未现苍白色区域；模型组右侧半球见部分白色的梗死组织，左侧为红色，见图1，扎冲十三味丸组虽然也出现梗死，但梗死体积明显小于模型组，吸去标本水分，分离白色区域和红色区域，分别称重，经统计学比较，扎冲十三味丸组脑梗死区重量及梗死区/全脑重量均较模型减少，与模型组比较，均存在显著性差异(P<0.05)。见图1，表1。

表1 扎冲十三味丸预处理后大鼠脑梗死重量

图1 各组大鼠脑梗死组织

2.3扎冲十三味丸预处理对脑梗死病理学的影响 模型组大鼠脑组织水肿，结构疏松，染色变浅，细胞稀疏，胞质色浅，水肿空泡形成，大量神经元变性，且见其内有大小不等的圆形或类圆形空泡，可见较多的坏死神经元，神经元结构模糊或破坏，细胞核结构模糊、固缩、碎裂、扎冲十三味丸组上述症状均有明显改善，神经元存活的数量增多，结构清晰且完整。正常组大鼠脑组织无病理学改变。见图2。

图2 各组大鼠脑梗死病理学观察(HE，×100)

3 讨 论

大脑中动脉是人类脑梗死最易发部位，大鼠的大脑中动脉的解剖分布与人类相似，因此我们采用线栓法制作大鼠局灶性大脑中动脉，阻断血流，造成脑梗死模型，可模拟人类脑梗死的发病过程。线栓法因为无须开颅，创伤小，不影响缺血后脑水肿和颅内压变化等自然过程而成为应用最广泛的局灶性脑缺血模型〔2〕。

蒙成药扎冲十三味丸(又名嘎日迪十三 )是蒙医临床常用的传统方剂之一，此药出自《蒙医经典》〔3〕,由诃子、制草乌、石菖蒲、木香、麝香、珊瑚(制)、珍珠(制)、丁香、沉香、禹粮土、磁石(煅)、甘草、肉豆蔻 13 味药组成，主要功能为祛风通窍、舒筋活血、镇静安神，在蒙医临床主治半身不遂、左瘫右痪、口眼歪斜、四肢麻木、腰腿不利、言语不清、筋骨疼痛、神经麻痹等症〔4〕。蒙医临床广泛用于脑中风、脑偏瘫等多种脑血管疾病，据报道有减轻神经和认知功能障碍的功能的作用〔5，6〕，在以前的研究中我们发现，扎冲十三味丸能减少脑组织缺血大鼠细胞凋亡的作用〔7〕。本研究证实扎冲十三味丸可明显促进大鼠局灶性脑梗死后神经功能恢复，减小脑梗死体积，改善脑梗死后的病理损伤。

4 参考文献

1Zea Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，etal.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats〔J〕.Stroke，1989；20(1)：84-91.

2张綦慧，张允岭，陈志刚，等.脑缺血动物模型研究进展〔J〕.辽宁中医杂志，2010；(8)：1618-20.

3国家药典委员会.中国药典〔S〕.北京：化学工业出版社，2005：190.

4林 琳，陶 春，汤文丽，等.扎冲十三味丸的药理与临床研究概况〔J〕.内蒙古民族大学学报(自然科学版)，2010;25(1)：10-1.

5李月玲，杨玉梅，张 东，等.扎冲十三味片对大鼠局灶性脑缺血的保护作用〔J〕.中国民族医药杂志，2009；15(8) ：55-6.

6张浩楠，张 东，杨玉梅，等.扎冲十三味不同工艺处方对脑缺血的保护作用〔J〕.包头医学院学报，2011；27(1) ：91-2.

7陶 春，翟景波，刘 鑫，等.蒙成药扎冲十三味丸对大鼠脑缺血组织细胞凋亡的影响〔J〕.中风与神经疾病杂志，2013；7(30)：642-4.