Ki67表达对非小细胞肺癌淋巴结转移的诊断价值

卢家奇 赵 松 杨 洋 齐 宇 张春敭

(郑州大学第一附属医院胸外科，河南 郑州 450052)

肺癌是当今导致死亡的主要恶性肿瘤之一，目前5年生存率仅有15%，90%以上的患者死于肺癌侵袭和转移的相关并发症〔1〕。肺癌的生物学特征复杂，预后因素较多，目前已发现一些能预测肺癌患者的生存以及指导辅助治疗的独立预后因素。Ki67抗体能识别增殖细胞上的抗原，能明确反映瘤细胞的增殖率，已被广泛用于评估各种肿瘤病灶的生长分数〔2,3〕。虽然关于Ki67已有大量研究，但Ki67的预后价值仍存在争议〔4～10〕。本研究通过对非小细胞肺癌小活检组织进行Ki67的检测，拟分析其与淋巴结转移的相关性和诊断价值。

1 资料与方法

1.1临床资料 我院2012年1月至2013年12月接受纤支镜或穿刺活检并检测其中Ki67表达的非小细胞肺癌患者68例，其中男40例，女28例，平均年龄58.9岁，有吸烟史35例，腺癌47例，鳞癌21例，淋巴结有转移者20例(N1转移4例、N2转移16例)，Ⅰ期36例、Ⅱ期15例，Ⅲ期17例。入选标准：①我院接受包括系统纵隔淋巴结清扫在内的肺癌根治术；②术后病理证实为非小细胞肺癌；③术前经纤支镜检查或肺穿刺活检并行Ki67检测；④病案信息中有相关信息记录。排除病理类型不为鳞癌、腺癌、大细胞癌者；活检病理与术后病理不一致者。

1.2检测方法 采用Envision系统二步法(试剂由DAKO公司提供)。标本经甲醛固定的，石蜡包埋，常规脱蜡，水化，抗原修复后用蒸馏水、磷酸盐缓冲液(PBS)清洗，滴加3%过氧化氢，孵育10 min，再次用蒸馏水、PBS清洗，滴加一抗(即用型)，放入冰箱4℃过夜。PBS清洗3遍，5 min/遍，二抗孵育45 min。再次用PBS清洗3遍，5 min/遍，孵育，光镜控制显色。复染，脱水，中性树胶封片。用各种一抗要求的组织分别进行阳性对照，PBS替代一抗作为阴性对照。

评定标准：两位病理科医生阅片审核。高倍镜下随机计数至少1 500个癌细胞，细胞核着色的细胞数占20%以下的为阴性组，阳性细胞数超过20%的为阳性组。

1.3统计学方法 应用SPSS17.0软件进行分析，进行单因素非条件Logistic回归分析。

2 结 果

单因素非条件Logistic回归分析显示，淋巴结转移与Ki67的表达呈正相关(P<0.05)，不受性别、年龄、吸烟史、组织学类型的影响，见表1。灵敏度80%，特异度45.8%，约登指数0.258，符合率57.4%，阳性预测值39.5%，阴性预测值88%。阳性似然比1.57，阴性似然比0.33。

表1 单因素非条件Logistic回归结果分析

3 讨 论

肺癌的病理学诊断往往由纤支镜和肺穿刺活检获得，然而是否进行进一步的免疫组化检验仍有不同意见。Ki67是一种细胞增殖标志，能可靠地反映恶性肿瘤的增殖率、恶性程度及侵袭力，有研究〔11〕表明，Ki67表达阳性为临床预后较差的指标，认为Ki67指数与患者生存时间呈反比，细胞分化程度以及浸润转移与Ki67蛋白的表达有相关性，但这些研究大都针对术后标本或与小活检组织一并分析，本研究说明无明显选择偏倚，因此Ki67是淋巴结转移的危险因素。Ki67的检测对非小细胞肺癌淋巴结转移的有一定诊断价值，临床中应结合其他检查。另外，Ki67的表达也许能够反映非小细胞肺癌的侵袭性，具有评估非小细胞肺癌预后的价值。

4 参考文献

1孙 燕，赵 平，吴孟超，等. 临床肿瘤学进展〔M〕．北京：中国协和医科大学出版社，2005：193．

2Hall PA, Richards MA, Gregory WM,etal. The prognostic value of KI67 immunostaining in non-Hodgkin's lymphoma〔J〕. J Pathol,1988;154(3):223-5.

3Walker RA, Camplejohn RS. Comparison of monoclonal antibody Ki67 reactivity with grade and DNA flow cytometry of breast carcinomas〔J〕. Br J Cancer,1988;57(3):281-3.

4Soomro IN, Whimster WF.Growth fraction in lung tumours determined by Ki67 immunostaining and comparison with AgNOR scores〔J〕. J Pathol, 1990;162(3):217-22.

5Scagliotti GV, Micela M, Gubetta L,etal.Prognostic significance of Ki67 labelling in resected non small cell lung cancer〔J〕. Eur J Cancer, 1993;29A :363-5.

6Hommura F, Dosaka-Akita H, Mishina T,etal.Prognostic significance of p27KIp1 protein and ki-67 growth fraction in non-small cell lung cancers〔J〕. Clin Cancer Res, 2000;6(10):4073-81.

7Nguyen VN, Mirejovski T, Melinova L,etal.Expression of cyclin D1, Ki67 and pCNA in non-small cell lung cancer: prognostic significance and comparison with TTF-1and bcl-2〔J〕. Acta Histochem,2000;102(3):232-8.

8Maddau C, Confortini M, Bisanzi S,etal.Prognostic significance of p53-1and Ki-67 antigen expression in surgically treated non-small cell lung cancer: immunocytochemical detection with imprint cytology〔J〕. Am J Clin Pathol,2006;125(3):425-31.

9Ishida H, Irie K, Itoh T,etal. The prognostic significance of P53-1and bcl-2 expression in lung adenocarcinoma and its correlation with Ki-67 growth fraction〔J〕.Cancer, 1997;80(6):1034-45.

10Martin B, Paesmans M, Mascaux C,etal. Ki-67 expression and patients survival in lung cancer: systematic review of the literature with meta-analysis〔J〕. Br J Cancer, 2004;91(12):2018-25.

11Cheang MC,Chia SK,Vodue D,etal.Ki67 index,HER2 status,and prognosis of patients with luminal B breast cancer〔J〕.J Natl Cancer Inst,2009;10(10)：736-50.