TGF—β1对糖尿病肾病的早期诊断价值

张卫群等

【摘要】 目的 通过对不同时期糖尿病肾病（DN）患者血清和尿中转化生长因子（TGF-β1）的检测， 探讨TGF-β1在DN早期诊断中的意义。方法 根据24 h尿白蛋白排泄率（UAER）分为单纯糖尿病（DM）组（T1组）32例， 早期DN组（T2组）41例和晚期DN组（T3组）13例， 并与23例正常人（C1组）作比较。用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测各组血清pTGF-β1和尿液中uTGF-β1水平， 比较各组之间两项指标的差异， 以正常组单侧95%的上限值（X±1.64S）为正常值高限， 确定阳性判定标准， 并以UAER为金标准， 进行T1组和T2组的诊断性能评价。同时用相应方法检测各标本中尿微量白蛋白（mAlb）， 最后确定TGF-β1对DN早期诊断的价值。结果 T1、T2、T3组pTGF-β1、uTGF-β1、mAlb较C1组明显升高， 差异有统计学意义（P<0.05）。相关分析显示pTGF-β1、uTGF-β1与UAER正相关， pTGF-β1和uTGF-β1的异常比UAER出现更早， 检测pTGF-β1和uTGF-β1水平可作为早期发现DN的敏感指标之一， 其中以uTGF-β1的临床灵敏度更高。结论 uTGF-β1联合尿mAlb能早期诊断DN， 并提高诊断的性能。

【关键词】 糖尿病肾病；转化生长因子；尿微量白蛋白

【Abstract】 Objective To explore the clinical significance of transforming growth factor beta-1 （TGF-β1） in the early diagnosis of diabetic nephropathy （DN）， through detections of plasma TGF-β1 （pTGF-β1） and urinary TGF-β1 （uTGF-β1） levels in different periods of DN patients. Methods According to 24 h urinary albumin excretion rate （UAER）， patients were divided into diabetes mellitus （DM） group （T1 group， n=32）， early DN group （T2 group， n=41）， and advanced DN group （T3 group， n=13）. These groups were compared with healthy people （C1 group， n=23）. Enzyme linked immune sorbent assay （ELISA） was used to detect levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 in all the groups. The differences between the two indexes of the groups were compared. The upper limit value of normal group unilateral 95 % （X±1.64S） was set as maximum normal value to determine positive decision standard， and UAER was taken as golden standard to assess the effects of T1 and T2 groups. Urinary microalbuminuria （mAlb） levels were detected in all groups to determine the early diagnostic value of TGF-β1 for DN. Results Levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 and mAlb significantly increased in T1， T2 and T3 groups， compared with that in C1 group. and the difference was statistically significant （P<0.05）. Correlation analysis showed that pTGF-β1 and uTGF-β1 were positively correlated with UAER. The changes of pTGF-β1 and uTGF-β1 appeared earlier than UAER， thus the detection of pTGF-β1 and uTGF-β1 could be one of the sensitive indexes of early DN， and uTGF-β1 had the higher clinical sensitivity. Conclusion Combination of uTGF-β1 and mAlb can provide early diagnosis of DN and improve diagnostic performance.

【Key words】 Diabetic nephropathy； Transforming growth factor； Microalbuminuria

TGF-β1是一种分子量为25 kD的多肽， TGF-β1是对细胞生长、分化和多种生理、病理过程起重要调节的细胞因子， 可抑制肾小管、肾小球上皮细胞生长。在糖尿病肾病中起重要作用， 它可以导致肾脏的多种病理形态的改变[1， 2]。作者通过检测2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1并确定指标， 提高对DN的早期诊断水平。endprint

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2013年3～11月本院内分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年龄35～75岁， 根据UAER分为三组：T1组为单纯DM组， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2组为早期DN组， 41例（出现持续性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3组为晚期DN组， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月门诊体检者23 例为正常对照组（C1组）， 其中男10例， 女13例， 年龄42～56岁， 为空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血压正常， 无心、肝、肾等重要脏器疾病， 无内分泌及遗传代谢性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取静脉血， 离心分离血清， 收集24 h尿液， 准确记录尿量， 混匀后取5 ml， -70℃保存待测。血、尿TGF-β1采用双抗体夹心ELISA 法， 定量检测。mAlb采用免疫增强比浊法， 使用日立7600-020全自动生化分析仪。

1. 3 统计学方法 研究所得数据采用SPSS15.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。相关分析应用Person相关分析。

2 结果

2. 1 各组TGF-β1、mAlb检测结果见表1。

2. 2 Person相关分析 L1AER与pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 结果正性相关。

2. 3 TGF-β1对DN的诊断性能以以C1组单侧95%的上限值（X±1.64S）为正常值高限， 确定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml为阳性。据此进行DN的早期诊断， 结果见表2。

由表2可知， T1组pTGF-β1对DN 诊断的阳性率为53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的阳性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常时UAER阳性率分别为28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可见pTGF-β1， uTGF-β1的异常较UAER早。以UAER为金标准， 进行pTGF-β1对DN 诊断的性能评价， pTGF-β1灵敏度为85.36%， 特异度为46.87%；uTGF-β1灵敏度为90.24%， 特异度为43.75%。

3 讨论

DN的发生是隐蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的诊断和干预。近年来也有研究发现， UAER<30 mg/24 h时， 其肾脏也可存在较严重的损害[3， 4]。因此作为一种反映肾小球损害的非侵入性指标， UAER也有一定的局限性， 出现持续性蛋白尿、高血压、水肿及肾功能不全表现时， 虽诊断明确， 但肾病已达2级以上， 属不可逆性变， 已失去了预防和有效治疗时机[5， 6]。

本研究结果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1较正常人明显升高， 在微量蛋白尿组血清pTGF-β1、uTGF-β1较正常人升高， 差异有统计学意义（P<0.05）。相关分析显示pTGF-β1、uTGF-β1与UAER正相关， pTGF-β1和uTGF-β1的变化比mAlb出现更早， 检测pTGF-β1和uTGF-β1水平可作为早期发现DN的敏感指标之一， 其中以uTGF-β1的临床灵敏度更高。提示过度表达TGF-β1是糖尿病肾病发生进展的一个重要机制。

参考文献

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 苏琴， 朱关则.尿微量白蛋白在糖尿病肾损伤早期诊断中的价值.中华检验医学杂志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖妩. 2型糖尿病尿微量白蛋白与大血管病变的相关关系研究.中国基层医药， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜国良. TGF-β1在糖尿病肾病早期诊断中的应用. 放射免疫学杂志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2013年3～11月本院内分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年龄35～75岁， 根据UAER分为三组：T1组为单纯DM组， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2组为早期DN组， 41例（出现持续性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3组为晚期DN组， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月门诊体检者23 例为正常对照组（C1组）， 其中男10例， 女13例， 年龄42～56岁， 为空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血压正常， 无心、肝、肾等重要脏器疾病， 无内分泌及遗传代谢性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取静脉血， 离心分离血清， 收集24 h尿液， 准确记录尿量， 混匀后取5 ml， -70℃保存待测。血、尿TGF-β1采用双抗体夹心ELISA 法， 定量检测。mAlb采用免疫增强比浊法， 使用日立7600-020全自动生化分析仪。

1. 3 统计学方法 研究所得数据采用SPSS15.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。相关分析应用Person相关分析。

2 结果

2. 1 各组TGF-β1、mAlb检测结果见表1。

2. 2 Person相关分析 L1AER与pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 结果正性相关。

2. 3 TGF-β1对DN的诊断性能以以C1组单侧95%的上限值（X±1.64S）为正常值高限， 确定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml为阳性。据此进行DN的早期诊断， 结果见表2。

由表2可知， T1组pTGF-β1对DN 诊断的阳性率为53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的阳性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常时UAER阳性率分别为28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可见pTGF-β1， uTGF-β1的异常较UAER早。以UAER为金标准， 进行pTGF-β1对DN 诊断的性能评价， pTGF-β1灵敏度为85.36%， 特异度为46.87%；uTGF-β1灵敏度为90.24%， 特异度为43.75%。

3 讨论

DN的发生是隐蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的诊断和干预。近年来也有研究发现， UAER<30 mg/24 h时， 其肾脏也可存在较严重的损害[3， 4]。因此作为一种反映肾小球损害的非侵入性指标， UAER也有一定的局限性， 出现持续性蛋白尿、高血压、水肿及肾功能不全表现时， 虽诊断明确， 但肾病已达2级以上， 属不可逆性变， 已失去了预防和有效治疗时机[5， 6]。

本研究结果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1较正常人明显升高， 在微量蛋白尿组血清pTGF-β1、uTGF-β1较正常人升高， 差异有统计学意义（P<0.05）。相关分析显示pTGF-β1、uTGF-β1与UAER正相关， pTGF-β1和uTGF-β1的变化比mAlb出现更早， 检测pTGF-β1和uTGF-β1水平可作为早期发现DN的敏感指标之一， 其中以uTGF-β1的临床灵敏度更高。提示过度表达TGF-β1是糖尿病肾病发生进展的一个重要机制。

参考文献

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 苏琴， 朱关则.尿微量白蛋白在糖尿病肾损伤早期诊断中的价值.中华检验医学杂志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖妩. 2型糖尿病尿微量白蛋白与大血管病变的相关关系研究.中国基层医药， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜国良. TGF-β1在糖尿病肾病早期诊断中的应用. 放射免疫学杂志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2013年3～11月本院内分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年龄35～75岁， 根据UAER分为三组：T1组为单纯DM组， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2组为早期DN组， 41例（出现持续性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3组为晚期DN组， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月门诊体检者23 例为正常对照组（C1组）， 其中男10例， 女13例， 年龄42～56岁， 为空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血压正常， 无心、肝、肾等重要脏器疾病， 无内分泌及遗传代谢性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取静脉血， 离心分离血清， 收集24 h尿液， 准确记录尿量， 混匀后取5 ml， -70℃保存待测。血、尿TGF-β1采用双抗体夹心ELISA 法， 定量检测。mAlb采用免疫增强比浊法， 使用日立7600-020全自动生化分析仪。

1. 3 统计学方法 研究所得数据采用SPSS15.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。相关分析应用Person相关分析。

2 结果

2. 1 各组TGF-β1、mAlb检测结果见表1。

2. 2 Person相关分析 L1AER与pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 结果正性相关。

2. 3 TGF-β1对DN的诊断性能以以C1组单侧95%的上限值（X±1.64S）为正常值高限， 确定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml为阳性。据此进行DN的早期诊断， 结果见表2。

由表2可知， T1组pTGF-β1对DN 诊断的阳性率为53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的阳性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常时UAER阳性率分别为28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可见pTGF-β1， uTGF-β1的异常较UAER早。以UAER为金标准， 进行pTGF-β1对DN 诊断的性能评价， pTGF-β1灵敏度为85.36%， 特异度为46.87%；uTGF-β1灵敏度为90.24%， 特异度为43.75%。

3 讨论

DN的发生是隐蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的诊断和干预。近年来也有研究发现， UAER<30 mg/24 h时， 其肾脏也可存在较严重的损害[3， 4]。因此作为一种反映肾小球损害的非侵入性指标， UAER也有一定的局限性， 出现持续性蛋白尿、高血压、水肿及肾功能不全表现时， 虽诊断明确， 但肾病已达2级以上， 属不可逆性变， 已失去了预防和有效治疗时机[5， 6]。

本研究结果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1较正常人明显升高， 在微量蛋白尿组血清pTGF-β1、uTGF-β1较正常人升高， 差异有统计学意义（P<0.05）。相关分析显示pTGF-β1、uTGF-β1与UAER正相关， pTGF-β1和uTGF-β1的变化比mAlb出现更早， 检测pTGF-β1和uTGF-β1水平可作为早期发现DN的敏感指标之一， 其中以uTGF-β1的临床灵敏度更高。提示过度表达TGF-β1是糖尿病肾病发生进展的一个重要机制。

参考文献

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 苏琴， 朱关则.尿微量白蛋白在糖尿病肾损伤早期诊断中的价值.中华检验医学杂志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖妩. 2型糖尿病尿微量白蛋白与大血管病变的相关关系研究.中国基层医药， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜国良. TGF-β1在糖尿病肾病早期诊断中的应用. 放射免疫学杂志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint