BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量评价

卢少芬++++++陈志忠++++++李结敏++++++陈馥如++++++何玉冰++++++林雪梅++++++皮燕

[摘要] 目的 评价BBS 926全自动医用低速离心机制备的冰冻解冻去甘油红细胞的质量。 方法 BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞完成后，立即留取样本，检测其血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量等质量监测指标。 结果 血红蛋白含量为（23±5）g/L、游离血红蛋白含量为（0.43±0.25） g/L、白细胞残留量为（0.6±0.3）×107个、甘油残留量为（3.6±2.5）g/L、细菌培养试验阴性。 结论 BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞各项检测指标均达到国家质量标准，能有效地保障临床输血安全。

[关键词] BBS 926；制备；冰冻解冻去甘油红细胞；质量评价

[中图分类号] R446.11+3 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）10（c）-0087-03

随着临床成分输血的开展，临床用血对Rh（D）阴性血的需求量日益增加，如何保障Rh（D）阴性血型系统患者医疗急救用血是一个十分迫切的问题[1]，特别是事故抢救和产妇大出血，短时间内需求的血量较多[2]，临时招募献血者很难做到，稀有血型急诊患者的生命因此受到威胁，另一方面，血站街头、献血屋采集的Rh（D）阴性血液往往因采集后保存期有限，临床无需求而造成浪费[3]，越来越多的血站通过甘油化冷冻保存技术保存稀有血型冰冻红细胞[4]。目前国内多采用手工方法制备和ACP 215型细胞处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞，但是手工方法复杂，时间长，这与人员操作手法及经验有很大关系。本站于2012年底购置了一台由四川南格尔生物医学股份有限公司制造的BBS 926全自动医用低速离心机，用于制备冰冻解冻去甘油红细胞，到目前为止，使用该机器制备冰冻解冻去甘油红细胞共28 U，并应用于临床输注，无一例出现输血反应，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

9%氯化钠溶液：北京博德桑特输采血器材科技开发中心；0.9%氯化钠溶液500 ml：四川南格尔生物医学股份有限公司；0.9%氯化钠溶液1000 ml：四川南格尔生物医学股份有限公司；250 ml×3洗涤多联血袋：费森尤斯卡比（广州）医疗用品有限公司；一次性使用单采血浆分离器P-1000B：四川南格尔生物医学股份有限公司。

1.2 设备

BBS 926全自动医用低速离心机：四川南格尔生物医学股份有限公司；离心机：日立CR7；无菌接驳机：费森尤斯卡比（广州）医疗用品有限公司；血浆解冻箱JXH-I：广州市金铉映电子科技开发有限公司。血细胞分析仪：瑞士奥菲Orphee Mythic 22；全自动细菌培养检测系统BACTEC 9120（美国）。

1.3 方法

1.3.1 制备方法 ①将冰冻红细胞从成品库领出，放入已预温39～40℃的血浆解冻箱进行解冻，解冻完通过无菌接管机与一次性塑料转移袋连接，平衡称重，放置于离心机内杯中以2500 r/min、4℃、离心12 min，去上清液及白膜层，待去甘油化处理；②BBS 926全自动医用低速离心机去甘油化处理：开机、自检、选择去甘油化程序、安装耗材、连接各洗涤液，然后打开所有管路夹子，连接已解冻的冰冻红细胞血袋并将其放置于摇摆机上，预冲管路后，按确认系统进入自动洗涤阶段，当洗涤流程完毕后，进行产品收集流程，卸下耗材，去甘油化完成；③去甘油化的后处理：用无菌接管机将收集的成品血袋与250 ml×3洗涤多联血袋连接，以4℃，3500 r/min，离心9 min，离心后根据上清液的颜色、透明度等适当增减洗涤的次数，最后1次洗涤上清液无明显溶血迹象，再滴加0.9%氯化钠溶液至容量符合《全血及成分血质量要求（GB 18 469-2012）》[5]，并按要求进行留样。

1.3.2 冰冻解冻去甘油红细胞质量检测方法 将冰冻解冻去甘油红细胞留取的样品采用血细胞分析仪检测血红蛋白含量、比色法检测游离血红蛋白、显微镜下计数白细胞残留量、GPO-PAP法检测甘油残留量、全自动细菌培养检测系统进行细菌培养和检测。

2 结果

1 U×28袋冰冻解冻去甘油红细胞各项质量检测指标即甘油残留量、血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、无菌试验均达到国家标准——《全血及成分血质量要求GB 18469-2012》（表1）。

3 讨论

BBS 926全自动医用低速离心机作为目前中国第一台由南格尔自行研制的全自动、功能封闭式的红细胞处理设备，可用于红细胞的甘油化及去甘油化，虽然去甘油化洗涤时间与美国血液技术公司生产的ACP 215全自动细胞处理系统相比稍长，据文献报道ACP 215全自动细胞处理系统去甘油洗涤仅需50～60 min[6]，而BBS 926全自动医用低速离心机去甘油化洗涤时间为75～90 min（传统手工操作则需3～4 h），技术上基本实现全自动化（除更换液体）、程序化，最大程度减少人为差错事故的发生，保证产品质量；自动化操作降低了劳动强度，克服了手工洗涤操作步骤多、所需时间长、工作效率低、人为影响因素大等诸多问题[7]。BBS 926全自动医用低速离心机无菌接驳血袋和耗材，整个过程均为密闭式，耗材还串联了无菌滤器，降低了血液污染的概率，制备的产品细菌培养试验阴性；同时配备独创360°医用双轴摇摆机和连续流动洗涤系统，通过控制血液泵的快慢，实现对各种洗涤液加入的精准调节，将去甘油化程序分解成多个子程序，每个子程序的加液量和加液速度不同，保持渗透压变化在红细胞的承受范围内，减少对红细胞的影响，保证了红细胞的回收率和较低的游离血红蛋白含量，但其仍存在不足之处，表现在以下几个方面：①系统程序没有记忆功能，因某一原因需要关闭电源重新开机时，无法恢复到原来的工作程序；②最终产品的容量无法达到国家标准，需要作去甘油后处理；③虽配备独创360°医用双轴摇摆机，减少对红细胞的影响，但在血液回输或添加洗涤液时仍需要人为地提高或平放血袋，以便于袋中的红细胞全部回流至离心杯，减少红细胞的损失。这些有待于南格尔公司进一步完善和改进。endprint

从表1可以看出，BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，其制品质量符合《全血及成分血质量要求GB 18469-2012》的要求。其制备的冰冻解冻去甘油红细胞形态上虽有轻微改变，但不影响携氧等功能，且由于多次洗涤，白细胞、血小板、抗凝剂、细胞外钾、游离血红蛋白等物质几乎被洗去，所以输注时患者输血不良反应大大减少[8]。-80℃冰冻保存红细胞具有保存时间长、保存效果好的特点，是目前最有效的红细胞长期保存方法[9]，是稀有血型输血以及自身输血的重要手段。冷冻保存红细胞既争取了抢救时间，又极大地方便了临床用血，近年来机器制备冰冻解冻去甘油红细胞在我国已逐步取代手工制备，本站自2013年3月份开始正式使用BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，至今共制备28 U，并应用于临床输注，无一例出现输血反应。随着临床医疗水平的不断提高，肇庆市稀有血型血液的临床供应量也逐年增加，BBS 926全自动医用低速离心机作为国内性价比较高的全自动洗涤机，克服了手工洗涤操作步骤多、时间长、效率低，人为因素影响大等问题[10]，在一定程度上缓解了临床稀有血型急诊患者的应急供血，为患者赢得了抢救时间，也为临床提供了更符合国家质量标准的血液产品，更有效地保障了临床输血安全，机器制备是有效保证血液质量的前提[11]。

[参考文献]

[1] 陈均.深低温保存Rh（D）阴性血冷冻血库的建立及其临床应用[J].临床血液学杂志·输血与检验版，2007，4（2）：66-68.

[2] 唐秋民.稀有血型血液冷冻血库的建立及临床意义[J].广西医学，2008，30（9）：1400-1401.

[3] 罗昭玲.冰冻解冻去甘油红细胞的制备方法及效果评价[J].齐齐哈尔医学院学报，2011，32（17）：2748-2750.

[4] Valeri CR，Ragno G，Pivacek LE，et al.An experiment with glycerol frozen red blood cells stored at -80 degrees C for up to 37 years[J].Vox Sang，2000，79（3）：168-174.

[5] GB18469-2012.全血及成分血质量要求[S].

[6] 杨冬燕，段恒英，王娟娟，等.全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞的关键控制点及效果评价[J].重庆医学，2009， 37（9）：1078-1082.

[7] 邱玉霞，张静涵，张晓芙.M115细胞系统洗涤技术的改良及应用[J].山东医药，2006，46（32）：65.

[8] 浑守水，游敏，高新谱，等.Rh（D）阴性冷冻红细胞的临床应用[J].临床输血与检验，2002，4（1）：29.

[9] 靳鹏，刘安，曹伟，等.新型冰冻红细胞洗涤机洗涤效果的研究[J].中国输血杂志，2005，18（3）：212-213。

[10] 李梦秋，李冬梅.冰冻红细胞去甘油方法学评价[J]. 医药论坛杂志，2010，31（18）：74-75.

[11] 王惟.不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量研究[J].中国实用医药，2013，8（26）：274-275.

（收稿日期：2014-08-05 本文编辑：许俊琴）endprint

从表1可以看出，BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，其制品质量符合《全血及成分血质量要求GB 18469-2012》的要求。其制备的冰冻解冻去甘油红细胞形态上虽有轻微改变，但不影响携氧等功能，且由于多次洗涤，白细胞、血小板、抗凝剂、细胞外钾、游离血红蛋白等物质几乎被洗去，所以输注时患者输血不良反应大大减少[8]。-80℃冰冻保存红细胞具有保存时间长、保存效果好的特点，是目前最有效的红细胞长期保存方法[9]，是稀有血型输血以及自身输血的重要手段。冷冻保存红细胞既争取了抢救时间，又极大地方便了临床用血，近年来机器制备冰冻解冻去甘油红细胞在我国已逐步取代手工制备，本站自2013年3月份开始正式使用BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，至今共制备28 U，并应用于临床输注，无一例出现输血反应。随着临床医疗水平的不断提高，肇庆市稀有血型血液的临床供应量也逐年增加，BBS 926全自动医用低速离心机作为国内性价比较高的全自动洗涤机，克服了手工洗涤操作步骤多、时间长、效率低，人为因素影响大等问题[10]，在一定程度上缓解了临床稀有血型急诊患者的应急供血，为患者赢得了抢救时间，也为临床提供了更符合国家质量标准的血液产品，更有效地保障了临床输血安全，机器制备是有效保证血液质量的前提[11]。

[参考文献]

[1] 陈均.深低温保存Rh（D）阴性血冷冻血库的建立及其临床应用[J].临床血液学杂志·输血与检验版，2007，4（2）：66-68.

[2] 唐秋民.稀有血型血液冷冻血库的建立及临床意义[J].广西医学，2008，30（9）：1400-1401.

[3] 罗昭玲.冰冻解冻去甘油红细胞的制备方法及效果评价[J].齐齐哈尔医学院学报，2011，32（17）：2748-2750.

[4] Valeri CR，Ragno G，Pivacek LE，et al.An experiment with glycerol frozen red blood cells stored at -80 degrees C for up to 37 years[J].Vox Sang，2000，79（3）：168-174.

[5] GB18469-2012.全血及成分血质量要求[S].

[6] 杨冬燕，段恒英，王娟娟，等.全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞的关键控制点及效果评价[J].重庆医学，2009， 37（9）：1078-1082.

[7] 邱玉霞，张静涵，张晓芙.M115细胞系统洗涤技术的改良及应用[J].山东医药，2006，46（32）：65.

[8] 浑守水，游敏，高新谱，等.Rh（D）阴性冷冻红细胞的临床应用[J].临床输血与检验，2002，4（1）：29.

[9] 靳鹏，刘安，曹伟，等.新型冰冻红细胞洗涤机洗涤效果的研究[J].中国输血杂志，2005，18（3）：212-213。

[10] 李梦秋，李冬梅.冰冻红细胞去甘油方法学评价[J]. 医药论坛杂志，2010，31（18）：74-75.

[11] 王惟.不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量研究[J].中国实用医药，2013，8（26）：274-275.

（收稿日期：2014-08-05 本文编辑：许俊琴）endprint

从表1可以看出，BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，其制品质量符合《全血及成分血质量要求GB 18469-2012》的要求。其制备的冰冻解冻去甘油红细胞形态上虽有轻微改变，但不影响携氧等功能，且由于多次洗涤，白细胞、血小板、抗凝剂、细胞外钾、游离血红蛋白等物质几乎被洗去，所以输注时患者输血不良反应大大减少[8]。-80℃冰冻保存红细胞具有保存时间长、保存效果好的特点，是目前最有效的红细胞长期保存方法[9]，是稀有血型输血以及自身输血的重要手段。冷冻保存红细胞既争取了抢救时间，又极大地方便了临床用血，近年来机器制备冰冻解冻去甘油红细胞在我国已逐步取代手工制备，本站自2013年3月份开始正式使用BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞，至今共制备28 U，并应用于临床输注，无一例出现输血反应。随着临床医疗水平的不断提高，肇庆市稀有血型血液的临床供应量也逐年增加，BBS 926全自动医用低速离心机作为国内性价比较高的全自动洗涤机，克服了手工洗涤操作步骤多、时间长、效率低，人为因素影响大等问题[10]，在一定程度上缓解了临床稀有血型急诊患者的应急供血，为患者赢得了抢救时间，也为临床提供了更符合国家质量标准的血液产品，更有效地保障了临床输血安全，机器制备是有效保证血液质量的前提[11]。

[参考文献]

[1] 陈均.深低温保存Rh（D）阴性血冷冻血库的建立及其临床应用[J].临床血液学杂志·输血与检验版，2007，4（2）：66-68.

[2] 唐秋民.稀有血型血液冷冻血库的建立及临床意义[J].广西医学，2008，30（9）：1400-1401.

[3] 罗昭玲.冰冻解冻去甘油红细胞的制备方法及效果评价[J].齐齐哈尔医学院学报，2011，32（17）：2748-2750.

[4] Valeri CR，Ragno G，Pivacek LE，et al.An experiment with glycerol frozen red blood cells stored at -80 degrees C for up to 37 years[J].Vox Sang，2000，79（3）：168-174.

[5] GB18469-2012.全血及成分血质量要求[S].

[6] 杨冬燕，段恒英，王娟娟，等.全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞的关键控制点及效果评价[J].重庆医学，2009， 37（9）：1078-1082.

[7] 邱玉霞，张静涵，张晓芙.M115细胞系统洗涤技术的改良及应用[J].山东医药，2006，46（32）：65.

[8] 浑守水，游敏，高新谱，等.Rh（D）阴性冷冻红细胞的临床应用[J].临床输血与检验，2002，4（1）：29.

[9] 靳鹏，刘安，曹伟，等.新型冰冻红细胞洗涤机洗涤效果的研究[J].中国输血杂志，2005，18（3）：212-213。

[10] 李梦秋，李冬梅.冰冻红细胞去甘油方法学评价[J]. 医药论坛杂志，2010，31（18）：74-75.

[11] 王惟.不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量研究[J].中国实用医药，2013，8（26）：274-275.

（收稿日期：2014-08-05 本文编辑：许俊琴）endprint