丙肝患者HCV－Ab、HCV－RNA、HCV－Ag试剂盒联合检测体会

王沈莉

(解放军一五三医院 检验科，郑州450042)

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的传染病之一［1］。在我国自然人群中丙型肝炎病毒的感染率仅次于乙肝病毒，它是由输血、透析、手术、性传播、母婴传播等引起的。极易转为慢性，发展为肝硬化、肝癌，但目前HCV 感染者治疗效果差，治疗时间长，治疗成本高，尤其目前还没有预防疫苗。早期检测受到广大患者和医疗工作者的重视，HCV -Ab、HCV-RNA、HCV-Ag 联合检测将是一个非常有效检测的方法。笔者回顾分析90 例疑似丙型肝炎患者，其检测体会如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择解放军一五三医院2011年10月～2012年10月收治的怀疑是丙型肝炎90 例患者的血清。男52 例，女38 例，年龄20 ～60 岁，平均40 岁。

1.2 检测试剂及方法 所有试验均严格按照试剂说明书操作和判读结果，同一份标本同时检测HCV-Ab 、HCV-RNA 、HCV-Ag。

1.2.1 HCV-Ab 检测 采用双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析法(TRIFMA)，检测试剂盒由江苏新波生物制剂有限公司生产。配套新波生物的Anytest 时间分辨荧光检测仪和Efficuta 全自动样本前处理系统。正常值为S/C0 ＞=1 为阳性，S/Co ＜1为阴性，S/CO 为待测样品的荧光计数值/Cutoff 值。

1.2.2 HCV -RNA 检测 采用RT -PCR 方法结合荧光探针的扩增技术。由深圳凯杰生物工程有限公司生产，配套HCV 核酸扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒，HCV-RNA 载量正常值为＜500cop/ml。

1.2.3 HCV -Ag 检测 采用ELISA 检测方法，试剂盒由湖南康润药业有限公司生产。临界值(CUT OFF)为:阴性对照平均OD 值+0.06(阴性对照OD值≦0.06 时按0.06 计算)，待检样品的OD 值≧临界值判定为HCV 抗原阳性，待检样品的OD 值＜临界值判定为HCV 抗原阴性。

2 检测结果

90 例丙肝患者HCV -Ab 阳性率为97%，HCV-RNA 的阳性率为74%，HCV-Ag 阳性率为61%，见表1。

表1 疑似丙肝患者HCV-Ab、HCV-RNA、HCV-Ag 检测情况(n=90)

3 讨论

HCV 病毒感染通常是持续性的终生感染。在中国人群的感染率达到3.2%，其中50% ～80%感染者发展为慢性丙型肝炎，10% ～30%发展为肝硬化，肝硬化患者中约3% ～10%可以演变为肝癌。感染丙型肝炎病毒的患者极容易被误诊为其他疾病，感染丙型肝炎病毒后，自身往往感觉不到，一旦有症状出现，很可能已经错过最佳的治疗［2］。HCV初发时比较隐匿，仅有约20% ～30%的感染者呈急性肝炎表现，所以HCV 抗体的检测便成为诊断丙肝的确定方法。但是HCV 窗口期长，感染初期就不能及时检测出HCV 抗体，对临床的早期诊断和筛查增加了难度。

当人体感染HCV 病毒1 ～2 周时，血清中即可检测出HCV -RNA。其水平反应病毒的复制与传染性，是诊断HCV 的“金标准”。HCV 感染在实验室的诊断指标主要为检测抗原、抗体和RNA［3］，临床实验室以抗体的检测最为常见。但HCV -RNA也有一定的局限性，它不仅需要严格的操作环境，严谨的操作步骤，精密的仪器设备，还需要较长的实验时间。大大限制了HCV - RNA 在临床的推广与应用。

近来，一种敏感而特异的HCV 抗原ELISA 方法的检测大大提高了HCV 病毒的检测速度，由于HCV 感染后至抗体转阳窗口期平均为70 d，有的患者可延长6 ～9个月或更长，少数病患因免疫缺陷或免疫系统未发育成熟而表现为阴性。HCV 抗原在体内几乎与HCV -RNA 同时出现，HCV 核心抗原非常稳定，可以在室温条件下稳定保存7 d，而且试验方法简单易操作。

综上所述HCV-Ab、HCV -RNA、HCV -Ag 检测在丙型肝炎诊断中各有局限性，三者综合检测可以完善其诊断。HCV-Ag 和HCV -RNA 可以在窗口期检测出HCV 病毒含量，HCV -Ab 检测成为确诊HCV“金标准”，三项联合检测从而达到指导临床用药及感染和疗效的观察。

［1］丁 进，岳向荣，张红梅.302 例老年患者丙型肝炎检测分析［J］.检验医学与临床，2009，6 (17):1 474.

［2］王 迅，刘宇宁，贾 尧，等.丙型肝炎病毒抗体筛查阳性结果确证方案的探讨［J］.中国输血杂志，2008，21(4):255 -258.

［3］Pearlman BL. Hepatitis C infection:a clinical review［J］. South Med J，2004，97(4):364 -373.