类风湿关节炎血清标本库的构建及意义

钮敏红　万晓春　闫晓霏　吕卫东

（深圳大学第一附属医院，广东 深圳 518035）

类风湿关节炎血清标本库的构建及意义

钮敏红万晓春闫晓霏吕卫东

（深圳大学第一附属医院，广东 深圳 518035）

目的 探讨类风湿关节炎血清标本库的创建及管理方法，合理利用标本资源，为临床及类风湿关节炎的防治研究提供平台。方法收集类风湿关节炎患者外周血标本，分离血清、血浆和血细胞，按照标本入库编号进行登记，-80 ℃低温冷冻保存；同时建立血清标本库的信息管理系统，以便于标本及临床资料数据的收集管理、查询及调用。结果已收集了类风湿关节炎患者不同分期的血清共326份，血浆261份，淋巴细胞213份。并对所收集标本的流行病学及临床资料整理后归档管理。结论初步建立了具有一定数量的类风湿关节炎血清标本库，为今后相关的类风湿关节炎研究提供服务平台。

类风湿关节炎；血清标本库；构建

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常见的、以全身性炎症及骨关节病变为主的慢性自身免疫性疾病。随着病情的进展，可出现全身滑膜关节的病变、骨质破坏、关节畸形甚至关节强直，具有较高的致残率，患病率约为0.3%～0.4%，其发病机制尚不明确，多认为RA的发病是由遗传和环境因素共同作用的结果，RA目前尚无根治的药物，但早期诊断、早期治疗可以有效延缓病情进展，改善患者的生活质量。RA的血清样本是重要的临床病例资料，建立规范化、临床资料完整的RA血清标本库，不仅能最大限度的保护和合理利用标本资源，同时还可为相关研究提供足够的标本，实现临床资源和样本资源的共享，缩短研究周期，促进类风湿关节炎研究的进展。

1　材料与方法

1.1主要材料：人淋巴细胞分离液（灏洋生物），DMEM培养基、小牛血清（GIBCO），DMSO（Amresco），-80 ℃超低温冰箱（SANYO），液氮罐（Thermo），离心机（Eppendorf）等。

1.2血液标本的收集：所收集的病例均符合美国风湿病学会RA诊断标准，同时排除糖尿病、高血压、慢性系统性疾病及其他自身免疫性疾病。血液样本来源于晨起空腹采集的外周静脉血，在首先满足临床病理检测的前提下，收集剩余血液样本，每份血液样本以抗凝与不抗凝两种形式保存。所有血液标本处理工作应尽快完成，通过严格控制标本处理时间从而有效保证血液标本的质量。

1.3血清的分离与冻存：收集的抗凝血液样本于37 ℃静置1 h后，1500转/分离心5 min分离血清，每份血清样本经分装后置于-80 ℃冰箱中保存。

1.4血浆、淋巴细胞的分离与冻存：取收集的新鲜抗凝血，小心加入等体积的细胞分离液于液面上，1500转/分离心15 min，此时所分离的血液样本分为四层，其中第一层即为血浆层，第二层为淋巴细胞。收集第一层的血浆分装后置于-80 ℃冰箱中保存。将第二层的细胞转移至含PBS的离心管中，充分混匀后，1500转/分离心15～20 min，弃上清，沉淀经反复洗2次后即得淋巴细胞。所得淋巴细胞与冻存液混匀后，分装至冻存管，经程序降温后转移至液氮罐保存。

1.5标本的后期管理：收集的标本经编号登记后，标本数据库实行信息化管理，以便与后期的使用和管理。

2　结　果

2.1血液标本的采集及冻存：已收集了类风湿关节炎患者不同分期的血清共326份，血浆261份，淋巴细胞213份。并对所收集标本的流行病学及临床资料整理后归档管理。

2.2标本数据的收集及管理：我们按照血清标本库建设的各项工作流程、工作制度、质控和管理要求建立了类风湿关节炎血清标本库。根据标本库建设及管理需要，标本库需详细记录患者的基本信息、临床诊断信息、标本基本信息、标本使用情况、标本质量控制等相关资料。标本库信息主要包括以下内容：①患者的一般资料：姓名、性别、年龄、民族、职业、联系方式、住院号等；②标本临床检验资料：临床诊断、病理诊断等；③病理资料：诊治经过、预后资料等；④标本基本信息：编号、存放位置、入库日期、标本数量、标本到期时间；⑤标本使用管理：出库编号、出库时间、使用单位、使用人、审批单位、审批人等；⑥患者随访信息：定期随访患者的疾病发展情况信息。

3　讨　论

标本采集是临床护士工作的一项重要内容，为了保证所收集的血清标本的质量，避免血清标本在收集与保存过程中因人为因素造成偏差，需要对标本采集人员进行相应的技术培训，强化质量意识，确保所收集血清样本的质量［1-3］。参与标本库建立的护士需具有丰富的临床经验和高度的责任心，熟悉血清标本库建设的工作流程及注意事项，能够严格按照标准化的血清处理步骤建库，从而严格控制血标本的质量。

建设规范化的标本库，需严格把关所收集的患者血液标本，要具备完善的患者基本信息、临床诊断信息等，以保证标本库的信息完整性［4-6］。收集患者的标本前务必需要经患者或患者家属的同意并签署知情同意书，在首先满足临床病理检测的前提下，收集剩余血液样本。通过制定相应的规范操作流程以保证所收集标本的质量，其中包括制定标本采集流程标准，标本信息记录规范，标本制备、保存，标本使用等规范。保证从标本收集开始整个过程都能标准化操作，标本的保存过程中还应定期对标本库进行质量控制以保证标本的有效性和稳定性。标本库的建设需要与科研紧密结合，做到物尽其用，避免不必要的资源浪费，规范化的工作流程也提高了工作效率。

RA是一种高致残率的自身免疫性疾病，对其病因研究依然是近几年研究的重点，目前针对RA相关细胞因子的研究虽已取得了进展，但RA是一种多因素引发的疾病，仍需进一步研究其发病机制以发现更有效的治疗靶点。建立规范化、临床资料完整的类风湿关节炎血清标本库将为RA的研究提供大量临床标本，并为今后开展相关方面的研究进行了资源储备，对于促进RA研究的发展具有重要的医学意义。

［1］温博，曾升平.类风湿关节炎的研究进展［J］.世界中西医结合杂志，2014，9（9）:1014-1019.

［2］高薇，鲁静，赵丽娟.炎性细胞因子与类风湿关节炎［J］.中国现代医学杂志，2007，17（4）:450-457.

［3］董峰.肿瘤血清资源库在肿瘤临床研究中的应用［J］.甘肃科技，2008，24（9）:156-158.

［4］杨宗泽，谭维维，谭珺娅，等.华西医院肝炎病毒血液标本库的创建［J］.华西医学，2013，28（5）:752-755.

［5］季加孚.北京大学临床肿瘤学院肿瘤标本库的建设［J］.北京大学学报（医学版），2005，37（3）:329-330.

［6］朱杰，孙忠保.血清标本库信息系统的建设和应用［J］.公共管理，2013，29（10）:180-181.

Establishment of Rheumatoid Arthritis Serum Specimen Bank and Its Significance

NIU Min-hong，WAN Xiao-chun，YAN Xiao-fei，LV Wei-dong
（The First Affiliated Hospital of Shenzhen University，Shenzhen 518035，China）

Objective To explore the methods to establish a rheumatoid arthritis serum specimen bank and information management system，rational use of resources specimen，which are important to establish a platform for rheumatoid arthritis research. Methods Blood samples were collected from rheumatoid arthritis patients，specimens of serum，plasma and lymphocytes were separated and stored at -80 ℃ after registration. The patient's information was entered into the database. Results326 portions of serum，261 portions of plasma and 213 portions of lymphocyte were collected，the donors' information of epidemiology，clinical records were documented. Conclusion A rheumatoid arthritis serum specimen bank have been established initially，which can provide quality samples and related clinical information for rheumatoid arthritis research.

Rheumatoid arthritis；Serum specimen bank；Establishment

R593.22

B

1671-8194（2015）22-0058-02

深圳大学科研基金资助项目（006023）