柳小玲,樊 超,吴江东,吴 芳,章 乐,曹旭东,张 辉,张万江(石河子大学医学院病理生理学教研室,新疆石河子832002)
以卡介苗和MTB H37Ra的原生质体为亲本制备融合菌株的实验研究*
柳小玲,樊超,吴江东,吴芳,章乐,曹旭东,张辉,张万江△
(石河子大学医学院病理生理学教研室,新疆石河子832002)
目的:以卡介苗(BCG)和结核分枝杆菌(MTB)国际标准无毒株H37Ra (H37Ra)的原生质体为亲本制备融合菌株。方法:制备及鉴定BCG和H37Ra的原生质体;对荧光染色标记的亲本原生质体进行电融合,制备融合菌株,同时优化其制备和再生培养条件。结果:成功制备BCG和H37Ra的原生质体; FDA标记BCG原生质体呈黄绿色荧光,罗丹明B标记H37Ra原生质体呈红色荧光,激光共聚焦显微镜观察到电融合条件在电压E =2.2 kV/cm、电击时间t =0.8 ms,呈桔色荧光的融合子融合率高、活性好。结论:成功制备了以BCG和H37Ra原生质体为亲本的融合菌株。
国家自然科学基金资助项目(No.81260261; No.81160192) ;新疆生产建设兵团医药专项资金资助项目(No.2012BA022)
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