HPLC法测定咽炎含片中橙皮苷的含量

2015-02-18 05:43朱建明
西部中医药 2015年6期
关键词:含片橙皮咽炎

朱建明

甘肃省中医院,甘肃 兰州 730050

咽炎含片由金银花、菊花、陈皮等12味中药组成,具有解毒、消炎、止痛等功效[1]。陈皮为其主要化痰药物,为了控制其化痰作用,笔者采用HPLC对陈皮中的主要成分橙皮苷进行含量测定。现将结果报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 LC-9A高效液相色谱仪(日本岛津公司);641旋转蒸发仪(瑞士BüCHI公司);HS-6150D超声波清洗仪(上海珂淮仪器有限公司);SK-M2サンプルミル粉碎器(日本松下公司);AE-260 AE-240电子天平(瑞士科恩公司);HHS21-8电热恒温水浴锅(上海科升公司);CS101-30型电热鼓风干燥箱(重庆四达试验设备有限公司),TGL-16G高速台式离心机(上海沪粤明科学仪器有限公司)。

1.2 试药 咽炎含片(四川华星药业有限公司),橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用,批号:721-9102);甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,并经0.45μm滤膜过滤,其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 方法[2-4]

2.1.1 色谱条件 色谱柱:Shim-pack C18(150mm×6.0 mm,5μm);流动相:甲醇 -0.1%磷酸水溶液(40∶60);流速:1.0mL/min;进样体积:10μL;检测波长:283 nm;柱温:30℃。

2.1.2 对照品溶液的制备 取橙皮苷化学对照品适量,精密称定。用甲醇定容于25mL容量瓶中,制成177μg/mL的对照品溶液备用。

2.1.3 供试品溶液的制备 取咽炎含片,研细,混匀,取粉末约1.0 g,精密称定,加甲醇15mL,回流40分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇溶解并定容到25mL容量瓶中,作为供试品溶液。

2.1.4 阴性溶液的制备 在去除陈皮的条件下,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

2.2 结果

2.2.1 线性关系考察 取橙皮苷对照品约4.44 mg,精密称定,用甲醇定容到25 mL容量瓶中,超声使其充分溶解,作为贮备液。精密吸取对照品储备液0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、2.0 mL,置 10 mL容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,按“2.1”项色谱条件操作,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,处理得到直线回归方程:Y=6 999.6X+1 921.6,r=0.999 9,线性范围为 14.21~35.52μg/mL。

2.2.2 精密度实验 精密吸取橙皮苷对照品溶液,连续进样5次,5μL/次,以“2.1”项下色谱条件测定,记录色谱图,峰面积的RSD=0.44%。

2.2.3 专属性实验 分别取对照品溶液、样品溶液、阴性对照品溶液,按“2.1”项色谱条件操作,记录色谱图。结果供试品与对照品溶液均在相同保留时间出现吸收峰,空白溶液在此处无吸收峰。见图1。

图1 咽炎含片中橙皮苷专属性考察

2.2.4 重现性实验 取同批咽炎含片,研细、混匀,取粉末6份,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,测定,记录色谱图,其RSD为0.42%,表明方法重现性良好。

2.2.5 回收率实验 采用加样回收法,取已知含量的同批咽炎含片,研细,混匀,取粉末适量,精密称定,精密加入17.76μg/mL的橙皮苷对照品溶液 1、2、3mL,每个比例制备 3份样品。按“2.1”项下相应方法制备供试品溶液,测定,记录色谱图,计算回收率,平均方法回收率分别为99.75%、RSD为1.13%,符合相关规定。结果见表1。

2.2.6 样品测定 取10批咽炎含片,研细,混匀,取粉末适量,精密称定,按“2.1”项方法制备供试品溶液,测定,计算十批样品中橙皮苷的平均含量为5.99 mg/g,RSD=1.72%。结果见表2。

表1 咽炎含片中橙皮苷的回收率测定(n=3)

表2 咽炎含片中橙皮苷的含量测定(n=3)

3 讨论

HPLC是一种常用的分离分析色谱,较普通的液相色谱有以下优点:速度快、灵敏度高、分辨率高、柱子可反复使用[5-8]。本实验通过对HPLC色谱条件的考察,得到橙皮苷色谱条件及标准曲线,通过测定样品中橙皮苷的含量,可得到咽炎含片的质量控制标准。该方法简单、快速、重现性好,适应性广泛,具有良好的实用价值。

[1] 中华人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂[M].北京:人民卫生出版社,1998:130.

[2] 胡志军,陈建秋.HPLC测定不同基原陈皮药材中陈皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(10):95-98.

[3] 王福霞,彭柳,王晓琼.高效液相色谱法测定健胃消食口服液陈皮苷含量[J].医学导报,2009,28(2):236-237.

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[5] 郭敏,王晓琳,黄聪琳,等.镰形棘豆总黄酮提取工艺的比较研究[J].西部中医药,2014,27(2):34-35.

[6] 聂舸,万辉.HPLC法测定保和丸中橙皮苷含量[J].江西中医学院学报.2002,14(4):33-35.

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[8] 郭敏,肖正国,姜华.高效液相色谱法同时测定三黄中空栓中黄芩苷、盐酸小檗碱的含量[J].西部中医药,2014,27(9):19-21.

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