葛根不同炮制品止泻作用研究*

★　钟凌云　马冰洁　龚千锋　(江西中医药大学药学院　南昌 330004)

葛根不同炮制品止泻作用研究*

★钟凌云*第一作者：钟凌云(1971—)，女，教授，博士生导师。研究方向：中药炮制机理及饮片质量标准。E-mail：ly1638163@163.com。马冰洁龚千锋(江西中医药大学药学院南昌 330004)

摘要：目的：研究并比较葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根的止泻作用，为葛根炮制品的临床用药提供客观实验依据。方法：采用胃排空及小肠推进率实验结合腹泻指数的测定，研究葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根的止泻作用。结果：与空白组比较，葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根在胃排空试验、小肠推进率及腹泻指数测定试验中均具有极显著性差异(P<0.01)，各样品随给药剂量的增加，胃内残留率呈增强趋势、小肠推进率呈减弱趋势、腹泻指数呈降低趋势；而样品同剂量之间比较，胃内残留率由高到低为：麸煨葛根>清炒葛根>葛根生品，小肠推进率由高到低为：葛根生品>清炒葛根>麸煨葛根；腹泻指数由低到高：麸煨葛根>清炒葛根>葛根生品。结论：麸煨葛根止泻作用最强，结果为麦麸煨制葛根的临床应用提供试验依据。

关键词：葛根；麸煨葛根；清炒葛根；止泻

葛根为豆科植物野葛Puerarialobata(wilId.) Ohwi的干燥根，有升阳止泻、透疹止渴、解肌退热等功效，可用于治疗泄泻等症[1-3]。葛根为通表药物，古人认为葛根“煨熟则散性全无，可以厚肠止泻”[4]。葛根炮制方法在唐代有“蒸食之”的记载，明代出现炙黄，微炒、干煮法等，清代首次提出煨熟用。目前葛根主要的炮制方法有生用和煨制等，实际生产中又以麦麸煨法居多[5]。从葛根炮制的历史沿革可以看出，葛根也可以清炒法进行炮制，有研究表明，葛根煨制和清炒品所含的总黄酮含量均较生品有增加，其中麦麸煨制葛根含量多于清炒葛根[6]。本文对葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根的止泻作用进行了比较研究，为揭示麸煨葛根炮制机理、为葛根炮制品的临床应用提供试验依据。

1实验材料

1.1实验动物ICR小鼠(SPF级)，体重19～21g，购买于湖南斯莱克景达实验动物有限公司(合格证号NO43004700005554)，购买后在实验室适应性饲养3天后进行实验。

1.2药物及试药葛根饮片(购买于樟树天齐堂药业，批号1310009)经江西中医药大学葛菲教授鉴定为豆科葛属多年生落叶藤本植物野葛Puerarialobata(wilId.)Ohwi的根羧甲基纤维素钠(化学纯)；奶粉；可溶性淀粉；活性炭粉；糖；番泻叶(购买于北京同仁堂药店)

1.3实验溶液制备

1.3.1葛根不同炮制品试药的制备葛根生品：葛根饮片打粉(过50目筛)，取三份各20g，加8倍量的水，连续回流提取2次，每次1.5 h，滤过，合并滤液，分别浓缩至50,100,200mL，即得葛根生品水煎液高、中、低三个剂量试药。

麸煨葛根：热锅撒入麦麸，中火加热至冒烟投入净葛根饮片，不断翻炒至黄色取出，筛去麦麸，放凉备用[7]，照葛根生品项下的方法操作，即得麸煨葛根水煎液高、中、低三个剂量试药。

清炒葛根：净葛根饮片，文火炒至稍带焦斑[7]，放凉备用，照葛根生品项下的方法操作，即得清炒葛根水煎液高、中、低三个剂量试药。

1.3.2半固体炭末营养煳制备羧甲基纤维素钠10g，奶粉16g，糖8g，淀粉8g，活性炭3g，混合加水搅拌均匀，制成300mL，精密吸取1 mL称重为1.054g。

1.3.3番泻叶混悬液制备取干燥叶片除去叶脉，精密称量8g，加沸蒸馏水研和，再加冷蒸馏水配成8%的混悬液，滤过，即得。

2实验方法与结果[8-9]

2.1胃排空及小肠推进率实验

2.1.1试验方法ICR小鼠，体重19～21g，雌雄各半，随机分为10组，每组8只，1组为空白组，其他9组分别给予葛根生品、麸煨葛根和清炒葛根水煎液高、中、低三个剂量，0.2mL/只。灌胃给药，每日1次，连续7d。

第7日禁食不禁水18h后末次给药，1h后灌胃给予半固体炭末营养糊1 mL/只，15min后脱颈椎处死，剖腹取全部胃肠。自幽门切迹处取胃，拭干称重，沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称净重。计算胃内容物残留率(%)=[(胃全重-胃净重)/半固体营养糊]×100%；同时，自盲肠处取上述小鼠的肠，不加牵引平铺于光滑白板上，分别量取自幽门括约肌至炭末营养糊前端及至盲肠前端的距离。计算小肠推进率(%)=(炭末营养糊推进距离/幽门至盲肠全长)×100%。

2.1.2胃残留率及小肠推进率结果结果表明，葛根生品组、麸煨葛根组及清炒葛根组与空白组比较均具有统计学意义(P<0.01)，同剂量相比，作用由强到弱为：麸煨葛根>清炒葛根>葛根，各样品随给药剂量的增加胃内残留率呈增强趋势、小肠推进率呈减弱趋势，各剂量中麸煨葛根均对小鼠胃排空及小肠推进运动抑制作用最强,结果见表1。

表1　葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根

注：**表示与空白组比较P<0.01，具有统计学意义。

2.2对番泻叶所致小鼠腹泻的止泻作用

2.2.1试验方法ICR小鼠，体重19～21g，雌雄各半，随机分为10组，每组8只，1组为空白组，其他9组分别给予葛根生品、麸煨葛根和清炒葛根水煎液高、中、低三个剂量，0.2mL/只。灌胃给药，每日1次，连续3日。第3日禁食不禁水12 h后，分别灌胃给药，末次给药lh后分别以8%25℃番泻叶混悬液0.5 mL/只，灌胃，将小鼠扣于烧杯下，烧杯下放置102中速定性滤纸，连续观察6h，每h换一次滤纸。参考文献记录以下指标：

(a)稀便率=稀便数/总便数

(b)稀便级：表示稀便的程度(以稀便污染滤纸形成污迹的直径大小定级)

分为4级，标准如下：

级数1234污迹直径(cm)<11~1.92~3>3

通过以上两个指标计算其腹泻指数，其公式如下：

腹泻指数=稀便率×稀便级

结果统计均以均数±标准差(S)表示，用组间t检验对数据进行分析统计。

生品组、麸煨葛根组及清炒葛根组与空白组比较均具有极显著性差异(P<0.01)，在相同给药剂量下，止泻作用由强到弱为：麸煨葛根>清炒葛根>葛根生品，各样品止泻作用随给药剂量的增加呈增强趋势,结果见表2。

麸煨葛根高剂量组与葛根高剂量组比较有极显著性差异(P<0.01)，清炒葛根高剂量组与葛根高剂量组比较有显著性差异(P<0.05)，麸煨葛根中剂量组与葛根中剂量组比较有显著性差异(P<0.05)，麸煨葛根低剂量组与葛根低剂量组比较有显著性差异(P<0.05)，结果见表2。

表2　葛根、麸煨葛根及清炒葛根的止泻作用(n=8)

注：★与空白组比较，P<0.01；与葛根生品高剂量比较，■P<0.01，□P<0.05；与葛根生品中剂量比较，▼P<0.05；与葛根生品低剂量比较，●P<0.05。

3讨论

实验以葛根炮制后主要增强的药效作用止泻为考察指标，探讨并比较了葛根生品、麸煨葛根及清炒葛根的止泻作用差异。结果表明葛根经麦麸煨制后止泻作用明显增强，无论是高、中、低剂量均有极显著或显著性差异，经炒制后尽管作用增强，但与葛根生品比较，仅在高剂量组给药时有显著性差异，表明了麦麸煨制葛根的科学性和合理性，验证了古人 “煨法厚肠止泻”的说法。而麸煨葛根止泻作用增强的原因是否与葛根炮制后葛根素、大豆苷、大豆苷元等主要药效成分含量的变化相关仍有待进一步考察和验证。本试验为麦麸煨制葛根作用机制的阐明、相关质量标准的建立以及临床扩大应用奠定基础。

参考文献

[1]苏春晖.葛根临床应用[J].时珍国医国药,1999, 10(4): 293-294.

[2]何飞,刘元,韦焕英,等.葛根芩连微丸止泻止痢药效学实验研究[J].中国实验方剂学杂志, 2003, 9(5): 48-50.

[3]刘家骏,叶寿山.葛根芩连口服液的止泻作用[J].中药药理与临床, 1993, 9(6): 5-5.

[4]解统新.浅谈葛根炮制[J].山东中医杂志, 2003, 22(8): 496-497.

[5]潘亮亮.葛根产地加工质量控制和饮片调剂炮制规范化研究[D].江西中医学院，2013:38-43.

[6]刘舒平,温国庆.HPLC法测定葛根炮制品中葛根素的含量[J].中国中药杂志,1998, 23(12): 723-725.

[7]龚千锋.中药炮制学[M].2版.中国中医药杂志社,2007：125.

[8]黄伟强,金哲雄,张贵君,等.葛根止泻作用实验研究[J].黑龙江医药,2009,22(6): 821-823.

[9]李兴华,胡昌江,李文兵,等.益智仁止泻作用初步研究[J].时珍国医国药,2009,20(10): 2 498-2 499.

Study on the Antidiarrheal Effects of Processed Products ofPuerariaeLobataeRadix

ZHONG Ling-yun, MA Bing-jie, GONG Qian-feng

JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004,China.

Abstract:Objective:To provide experimental basis for clinical use of Puerariae Lobatae radix processing products by comparing the antidiarrheal effects of raw product, simmering by bran product and stir-frying product of Puerariae Lobatae radix. Methods:Gastric emptying, small intestinal propulsion rate test and diarrhea index were applied to determine the antidiarrheal effect of raw product, simmering by bran product and stir-frying product of Puerariae Lobatae radix. Results:Compared with blank group, the three samples of Puerariae Lobatae radix could extremely increase the gastric remnant rate, extremely decrease the rate of small intestine and the diarrhea index(P<0.01)with dose enhancement. Compared with the same dose, the order of the gastric remnant rate decrease, small intestinal propulsion increase and diarrhea index increase is simmering by bran product, stir-frying product and raw product of Puerariae Lobatae radix. Conclusion: Simmering by bran product of Puerariae Lobatae radix showed the best effect of antidiarrheal. The results providing a better understanding of the clinical use of Simmering by bran product of Puerariae Lobatae radix.

Key words:Raw Product of Puerariae Lobatae Radix；Simmering by Bran Product of Puerariae Lobatae Radix；Stir-frying Product of Puerariae Lobatae Radix；Antidiarrheal Effect

收稿日期：(2014-09-09)编辑：曾文雪

中图分类号：R285.5

文献标识码：A

基金项目：*国家“十二五”科技支撑计划项目(2011BA104B05)；江西省主要学科学术和技术带头人培养计划项目(20133BCB22006)；江西中医药大学校级专项(2012EX3002)。