白酱感冒颗粒提取工艺及质量研究

★　胡锐敏　何平清　何纯斌　杨明　文万江 　(江西济民可信药业有限公司　江西 宜春 336000)

白酱感冒颗粒提取工艺及质量研究

★胡锐敏*第一作者：胡锐敏(1987—)，男，工程师。研究方向：新药开发。Tel:0795-3653861,E-mail: huruimin.ok@163.com。何平清何纯斌杨明文万江 (江西济民可信药业有限公司江西 宜春 336000)

摘要：目的：研究白酱感冒颗粒的提取工艺及其质量标准。方法：选用L9(34) 进行正交设计实验，对白酱感冒颗粒的提取工艺进行筛选，以东莨菪内酯含量为指标，考察提取溶剂、提取时间、热回流速度、溶剂倍数4个因素；采用HPLC法测定东莨菪内酯的含量，色谱柱为依利特C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相为乙腈-水-冰醋酸(15∶85∶0.4)；检测波长为343nm。结果：采用热回流提取技术加水煎煮2次，第一次提取2h，第二次提取1h，每次加水15倍，热回流速度为1.5L/h(以每kg药材计)提取效果最好；东莨菪内酯在2～12μg/mL线性关系良好(r=0.9998)，平均回收率100.5%，RSD为1.69%。结论：该方法稳定可靠，适合工业化大生产。

关键词：白酱感冒颗粒；正交设计；东莨菪内酯；高效液相色谱

白酱感冒颗粒由败酱科，败酱属植物白花败酱草这一味中药材经适当方法加工而成，该产品源于我省民间，用本植物治疗流行性腮腺炎，流行性感冒等经验用药[1]。该产品具有清热解毒，疏风散热功效。主要用于风热感冒，发热咽痛，临床疗效显著，应用广泛[2]。白酱感冒颗粒的制备工艺以中医药理论为指导。应用现代科学技术和方法进行剂型选择和工艺设计。

1仪器与试药

1.1仪器高效液相色谱仪(安捷伦1260，VWD紫外检测器)；梅特勒电子天平(型号：XS205)；KUDOS超声仪(型号：SK5200)。

1.2试药

白酱感冒颗粒(江西济民可信药业有限公司)；白花败酱草；东莨菪内酯对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110768-200504)；乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1白花败酱草热回流提取工艺参数的优化

2.1.1正交试验设计预试验研究表明：提取溶剂、提取时间、热回流速度、溶剂倍数对提取结果影响较大。本试验主要考察了影响白花败酱草提取效果的关键参数提取溶剂、提取时间、热回流速度、溶剂倍数这4个因素，设置3个水平，采用L9(34) 正交试验设计表，以东莨菪内酯为评价指标，优化白花败酱草提取工艺。正交设计因素水平表见表1。

表1　正交设计因素水平表

2.1.2样品制备取切成3～5cm的白花败酱草 500g，按L9(34)正交设计表要求试验，提取液合并煎液，滤过，静置过夜，吸取上清液，浓缩成比重为1.32(50℃)的稠膏，测定稠膏中东莨菪内酯的含量,测定东莨菪内酯的转移率。正交试验设计及结果见表2-3。

表2　正交设计及结果

表3　提取方差分析

注：F0.05(2,2)=19.000。

由结果可知，以浓缩液中东莨菪内酯的含量为考察指标，从上图直观分析显示影响因素大小为A>B>D>C,方差分析表明，提取溶剂A对提取结果具有显著影响，根据K值，A因素应选水平3，B因素应选水平2，D因素应选水平1，C因素应选水平3，即使用水为提取溶剂，提取时间3h，热回流速度为1.5L/h(以每kg药材计)，提取溶剂量为15倍量。

2.1.3提取工艺验证实验取同批药材的白花败酱草三份，每份500g，根据上述优选的提取条件进行提取，结果表明，该提取工艺稳定可靠，结果见表4。

表4　验证试验结果

2.2辅料用量的选择

为了保证颗粒剂的相关指标符合要求，实验通过对蔗糖、糊精的用量进行筛选，确定了蔗糖与糊精的比例及最佳制成量，即蔗糖：糊精以4∶1为最佳；同时研制的低糖性白酱感冒颗粒，其蔗糖：糊精以1∶3为最佳。

2.3白酱感冒颗粒的制备

取白花败酱草1.47kg，加水煎煮，第一次提取2h，第2次提取1h，每次加水15倍，合并煎液,滤过，在30min后开始回流，热回流速度为1.5L/h(以每公斤药材计)，滤液，备用，静置，取上清液浓缩至相对密度为1.32 (50℃)的稠膏。取清膏，加入蔗糖706 g，糊精176.5 g，混匀，制成颗粒，干燥，制成1000 g；或加入蔗糖88.2 g，糊精264.6 g，混匀，制成颗粒，干燥，制成470 g(低糖型)，整粒，机分，即得。

3质量研究

3.1东莨菪内酯含量测定[3]

3.1.1色谱条件依利特C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相为乙腈-水-冰醋酸(15∶85∶0.4)；检测波长为343nm；柱温为室温；理论板数按东莨菪内酯峰计应不低于2000。

3.1.2供试品溶液制备取本品，研细，取约10g或4.7g(低糖型)，精密称定，精密加入水50mL，超声处理使溶解，离心，精密吸取上清液25mL，用乙酸乙酯振摇，提取3次，每次30mL，合并乙酸乙酯液，置85℃水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。结果见图1。

A.东莨菪内酯峰对照品；B.供试品溶液

样品量/g样品中原有量/μg添加对照品量/μg测得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%1010.0510.02520.063199.91010.0510.02520.000499.31010.0510.02520.1903101.11010.0510.02520.3515102.81010.0510.02520.2605101.81010.0510.02519.895498.2100.51.69

3.1.3对照品溶液的制备取东莨菪内酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL中含4μg的溶液，即得。

3.1.4线性关系考察分别精密称取东莨菪内酯对照品储备液适量(12.5mg加流动相稀释到100mL)加流动相稀释，分别制成2，4，6，8，10，12μg/mL的东莨菪内酯溶液进样10μL，测定东莨菪内酯的峰面积。以峰面积为纵坐标(Y)，浓度为横坐标(X)，建立回归方程Y=198.66X-0.8387(R2=0.9997)。表明浓度在2～12μg/mL间与峰面积有良好的线性关系。

3.1.5精密度试验精密吸取上述系列对照品溶

液10μL,连续进样6次,分别测定峰面积，东莨菪内酯RSD为0. 42%。

3.1.6重复性试验取同一份样品，按3.1.2项下供试品溶液的制备6份，测定东莨菪内酯的含量，RSD为1. 01%。

3.1.7稳定性试验取同一份供试品溶液,每隔2h进样测定,结果6次测定东莨菪内酯的峰面积基本不变,RSD为0.87%,表明供试品溶液在10 h内稳定。

3.1.8加样回收率试验精密称取已知含量的白酱感冒颗粒样品(批号141001，含量10.05μg/袋)10g，6份，每份加入东莨菪内酯对照品2.5mL(4.01μg/mL)，样品及对照品的加入量见表5，按3.1.2项下供试品的溶液的制备方法制备并测定。

4讨论

4.1白花败酱草采用热回流技术，可以进行完全的提取，以东莨菪内酯作为指标，优化了提取工艺。制备的白酱感冒颗粒符合颗粒剂要求，为颗粒剂中低糖型的制备提供了思路。

4.2建立了白酱感冒颗粒的东莨菪内酯的含量测定方法，适合对白酱感冒颗粒的质量控制，以东莨菪内酯为对照品，采用HPLC法测定，灵敏度高、精密度好、结果可靠、专属性大为增加，而且它是一个活性成份，这样就可以更好的控制产品质量。

参考文献

[1]朴成玉，吴修红，安柏松，等.白花败酱草的研究进展[J].中国民族民间医药，2010，21.

[2]彭金咏，范国荣，吴玉田.白花败酱草化学成分研究[J].中国中药杂质，2006，31(2)：128-129.

[3]朱才庆，曾宪仪，徐晓艳，等.HPLC法测定白酱感冒颗粒中东莨菪素[J].中草药，2006，37(4)：553-554.

征稿启事

《江西中医药》所设的重点栏目有《明医心鉴》、《滕王阁医话》等。《明医心鉴》以介绍名老中医经验和中医临证心得为主，重点刊载中医关于疑难病的诊疗经验，要求观点、方法新，经验独到。《滕王阁医话》主要反映中医教学、科研、临床的一得之见，要求以小见大，有感而文，语言生动流畅，可读性强，富于知识性、趣味性。

Extraction process and quality research of Baijiang Ganmao Granule

HU Rui-min，HE Ping -qing，HE Chun-bin， YANG ming， WEN Wan-jiang

JiminKexinPharmaceuticalCo.Ltd,Yichun336000,China.

Abstract:Objective: To study the extraction process and quality standard of the Baijiang Ganmao Granule.Methods: Making an L9(34) orthogonal experimental design, with the content of Scopoletin as the evaluation index and with the extraction solvent ,extraction time, heat reflux rate, solvent multiples as the four factors. Finding out a optimization of the Baijiang Ganmao Granule extraction process; Using HPLC determination of Scopoletin, the column was Elite C18column (4.6mm × 250mm, 5μm); mobile phase of acetonitrile - water - acetic acid (15∶85∶0.4); detection wavelength of 343nm. Results: Using the heat reflux extraction technology boil water 2 times, the first extract 2 hours and the second 1 hour, added 15 times of water every time, Heat reflux rate 1.5L/h (per kg herbs) extracts the best; good linear indications showed as a results of the scopoletin being controlled within 2～12μg/mL (r=0.9998), the average recovery was 100.5%, RSD is 1.69%. Conclusion: The method was stable and reliable, suitable for industrial production.

Key words:Baijiang Ganmao Granule; Orthogonal Design; Scopoletin; HPLC

收稿日期：(2015-01-21)编辑：曾文雪

中图分类号：TQ461

文献标识码：A