色谱柱对阿莫西林胶囊有关物质检出的影响考察

吴 群，刘映倩，沈丹丹，胡 幸

（重庆市食品药品检验所·重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121）

色谱柱对阿莫西林胶囊有关物质检出的影响考察

吴 群，刘映倩，沈丹丹，胡 幸

（重庆市食品药品检验所·重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121）

目的考察色谱柱对阿莫西林胶囊有关物质检出量的影响。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0．05 mol／L磷酸盐缓冲液（pH=5．0）-乙腈（99∶1）为流动相 A，以 0．05 mol／L磷酸盐缓冲液（pH=5．0）-乙腈（80∶20）为流动相 B，梯度洗脱，流速为1．0 mL／min，检测波长为254 nm。结果与结论采用不同色谱柱测定各厂家阿莫西林胶囊的有关物质，结果差异较大。色谱柱对阿莫西林胶囊有关物质的质量控制有影响。

阿莫西林胶囊；色谱柱；有关物质

阿莫西林为青霉素类抗生素，对链球菌属、需氧革兰阳性球菌、沙门菌属等细菌都有良好的抗菌作用，作为基本药物，被广泛应用于临床。人的个体差异及阿莫西林制剂在生产、贮存和使用过程中引入的杂质均可导致药品不良反应。在长期的检验工作中发现，不同厂家、不同型号的色谱柱检出阿莫西林制剂有关物质的量有所不同。笔者通过各种色谱柱考察阿莫西林胶囊有关物质，筛选出了能最大量地检出有关物质的色谱柱，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1260型高效液相色谱仪，紫外检测器。阿莫西林对照品（中国食品药品检定研究院，批号为130409-200810，含量为86．9%）；4个厂家的阿莫西林胶囊分别用 A，B，C，D编号；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2．1 色谱条件[1]

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），Waters Sun Fire柱（150 mm×4．6 mm，5 μm），Thermo ODS Hypersil柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），Phenomenex Luna 5μ C18柱（250 mm× 4．6 mm，5 μm），分别编号为色谱柱1，2，3，4；柱温：30℃；检测波长：254 nm；流速：1．0 mL／min；流动相：A为0．05 mol／L磷酸盐缓冲液（取0．05 mol／L磷酸二氢钾溶液，用2 mol／L氢氧化钾溶液调节 pH至5．0）-乙腈（99∶1），B为0．05 mol／L磷酸盐缓冲液-乙腈（80∶20），待阿莫西林峰洗脱完毕后立即按表1方法进行梯度洗脱。

表1 流动相线性梯度洗脱表

2．2 溶液制备

取阿莫西林对照品约10 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取供试品内容物，精密称定适量（约相当于阿莫西林50 mg），置25 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2．3 A样品有关物质检测

按拟订色谱条件，对样品A进行检测。结果见图1。

2．4 最大杂质检测

取供试品溶液和对照品溶液，依法进样试验。结果表明，色谱柱3在4个厂家样品中最大杂质的检出量均最大，而在色谱柱1，2，4中A，C，D 3个厂家中最大杂质的检出量很接近；其中B厂家样品的最大杂质在色谱柱2中检出量较小，在色谱柱1，4中的检出量也很接近。详见表2。

2．5 总杂质检测

取供试品溶液和对照品溶液，依法试验。结果表明，总杂质的检出情况与最大杂质的检出情况基本一致。4个厂家样品在色谱柱3中总杂质的检出量均最大，检出杂质峰也最多；4个厂家样品在色谱柱2中总杂质的检出量均最小，A厂家在色谱柱1，2，4中的检出量很接近，C，D厂家在色谱柱1，2，4中的检出量较接近，B厂家的总杂质在色谱柱2中检出量较小，在色谱柱1，4中的检出量也很接近。详见表3。

图1 不同厂家色谱柱检测样品A高效液相色谱图

表2 最大杂质检出结果(%)

表3 总杂质检出结果(%)

3 讨论

目前各国药典都广泛采用以硅烷键合硅胶色谱柱为基础的反相高效液相色谱法作为药品质量控制的一个重要手段。《中国药典》对高效液相色谱法的流动相及溶液配制方面的描述较详尽，但对于色谱柱通常仅指明填料大类[2]。本试验结果显示，不同色谱柱对阿莫西林胶囊最大杂质和总杂质的检出量均有很大差异，故在检测阿莫西林胶囊有关物质时，色谱柱的选择至关重要。

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：401-402．

[2]刘 钐，高丹玲．抗生素质控分析中HPLC色谱柱的选择[J]．海峡药学，2011，23（1）：33-37．

Influence of Chromatographic Column on Determination of Related Substances of Amoxicillin Capsules

Wu Qun，Liu Yingqian，Shen Dandan，Hu Xing
（Chongqing Municipal Institute for Food and Drug Control·Chongqing Municipal Research Center for Drug Process and Quality Control Engineering Technique，Chongqing，China 401121）

Objective To investigate the influence of chromatographic column on the detectable amount of related substances of Amoxicillin Capsules．M ethods With octadecylsilyl-bonded silica gel as the chromatographic column，0．05 mol／L phosphate buffer（pH= 5．0）-acetonitrile（99∶1）as the mobile phase A and 0．05 mol／L phosphate buffer（pH=5．0）-acetonitrile（80∶20）as the mobile phase B，the gradient elution was adopted at a flow rate of 1．0 mL／min，and the detection wavelength was 254 nm．Results and Conclusion Adopting different chromatographic columns for determining the related substances of Amoxicillin Capsules from diffetent manufacturers has large differences in the detection results，which indicating that the chromatographic column has the influence on the quality control of the related substances of Amoxicillin Capsules．

Amoxicillin Capsules；chromatographic column；related substances

R927.11；R978.1+1

A

1006-4931(2015)04-0039-02

2014－06－12)