老年宫颈癌患者组织及血清VEGF－C的表达水平及其相关性研究

陈艳君 黎勇夫

老年宫颈癌患者组织及血清VEGF－C的表达水平及其相关性研究

陈艳君 黎勇夫

目的探析老年宫颈癌患者组织和血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF－C)的表达及其相关性。方法将入选的60例老年宫颈癌患者作为观察对象，其中淋巴转移和非淋巴转移者各30例;入选同期30例老年宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和30例老年健康人群作为对照。采用免疫组化(SP)法检测组织中VEGF－C的表达，采用双抗体夹心酶联吸附免疫(ELISA)法检测血清中VEGF－C的浓度，并采用Pearson相关分析研究VEGF－C在组织和血清中的相关性。结果宫颈癌淋巴转移组组织VEGF－C阳性表达率93．3%(28/30)最高，吸光度(32865．4±5927．4)最高，血清中VEGFC浓度(13845．2±1228．6)pg/ml最高，其次为宫颈癌非淋巴转移组和CIN对照组，正常对照组最低，组间差异均具有统计学意义(P均＜0．05);组织和血清中的VEGF－C呈正相关性，相关系数γ=0．723。结论老年宫颈癌患者组织和血清中VEGF－C均显著升高，且二者呈正相关性。

组织;宫颈癌;血清;VEGF－C;相关性

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:812～814)

宫颈癌也称宫颈浸润癌，是常见的女性恶性肿瘤之一，近年流行病学数据表明，宫颈癌的死亡病例约25．5万［1］。VEGF－C与多种恶性肿瘤的发生、发展以及转移密切相关［2－3］。我院纳入60例老年宫颈癌患者，检测组织和血清中VEGF－C的表达，分析其相关性，现报告如下。

1 材料与方法

1．1 一般资料

入选我院2012年1月－2014年1月收治的60例老年宫颈癌患者作为观察对象，所有患者均经术后病理结果确诊。宫颈癌患者年龄60～80岁，平均(69．2 ±5．1)岁;组织病理学分型:鳞癌48例(80．0%)，腺癌10例(16．7%)，腺鳞癌2例(3．3%);低分化14例(23．3%)，中分化36例(60．0%)，高分化10例(16．7%);根据国际妇产科联盟(FIGO)病理分期:Ⅰ期14例(23．3%)，Ⅱ期16例(2%6．7)，Ⅲ期22例(36．7%)，Ⅳ期8例(13．3%);根据是否有淋巴转移分为2组，各30例。入选同期30例老年CIN患者和30例老年健康人群作为对照。CIN组患者年龄60～79岁，平均(68．7±4．8)岁;CINⅡ期16例(53．3%)，CINⅢ期14例(46．7%)。健康对照组年龄60～83岁，平均(69．1±5．0)岁。4组患者的平均年龄等基线特征大体一致。

1．2 方法

组织VEGF－C表达检测:采用活检取得宫颈组织标本，并用10%福尔马林固定，石蜡包埋，制作若干切片，采用SP法(试剂盒源自美国Santa公司)染色，严格按照试剂盒说明操作。血清VEGF－C浓度检测:抽取受试者静脉血4 ml，置于试管中摇匀，凝固，分离血清标本，在2 000 r/min条件下离心10 min，取上清液待测。采用双抗体ELISA法(试剂盒源自北京博奥森生物技术公司)检测，严格按照试剂盒说明操作。采用Pearson相关性分析研究VEGF－C在组织和血清中的相关性。

1．3 判断和评估标准

根据IseKi K综合计分法计算VEGF－C在组织中的阳性表达［4］:a:染色强度(0=无，1=弱，2=中，3=强);b:阳性细胞数(0=无阳性细胞，1=阳性细胞＜25%，2=阳性细胞25%～50%，3=阳性细胞＞50%)。二者综合得分为0～1分，阳性指数为0;二者综合得分为2分，阳性指数为1;二者综合得分为3分，阳性指数为2;二者综合得分为4～5分，阳性指数为3;二者综合得分为6分，阳性指数为4。阳性指数≥2为阳性表达。读取组织VEGF－C表达的光密度值。根据吸光度值(OD)计算血清中VEGF－C浓度。

1．4 统计学分析

应用SPSS 17．0统计软件对结果进行统计分析，计量资料采用均数±标准差(¯x±s)表示，比较采用t检验，计数资料采用百分数表示，比较采用χ2检验，相关性分析采用Pearson相关性分析，P＜0．05则差异具有统计学意义。

2 结果

2．14 组组织VEGF－C阳性表达率比较

宫颈癌淋巴转移组组织VEGF－C阳性表达率为93．3%(28/30)，显著高于宫颈癌非淋巴转移组60．0%(18/30)(χ2=7．55，P＜0．01);宫颈癌非淋巴转移组显著高于CIN对照组30．0%(9/30)(χ2= 4．31，P＜0．01)，CIN对照组显著高于正常对照组(χ2=8．37，P＜0．01)，差异均具有统计学意义(P均＜0．05)。

2．24 组组织VEGF－C吸光度比较

宫颈癌淋巴转移组组织VEGF－C吸光度为(32865．4±5927．4)，显著高于宫颈癌非淋巴转移组(27092．1±5145．2)，差异具有统计学意义(χ2= 4．03，P＜0．01);宫颈癌非淋巴转移组显著高于CIN对照组(10054．8±4132．9)，差异具有统计学意义(χ2=14．14，P＜0．01);CIN对照组显著高于正常对照组(3743．8±1876．5)，差异具有统计学意义(χ2=7．62，P＜0．01)。

2．34 组血清VEGF－C浓度比较

宫颈癌淋巴转移组组织VEGF－C浓度为(13845．2 ±1228．6)pg/ml，显著高于宫颈癌非淋巴转移组(11938．4±995．8)pg/ml，差异具有统计学意义(χ2= 6．61，P＜0．01);宫颈癌非淋巴转移组显著高于CIN对照组(11003．7±1142．5)pg/ml，差异具有统计学意义(χ2=3．78，P＜0．01);CIN对照组显著高于正常对照组(10123．5±921．6)pg/ml，差异具有统计学意义(χ2=3．28，P＜0．01)。

2．4 组织和血清VEGF－C相关性

根据Pearson相关性分析，宫颈癌组织和血清中的VEGF－C表达均随宫颈癌程度的加深而升高，相关系数γ=0．723，P＜0．05。

3 讨论

宫颈癌病因较为明确，与人乳头瘤病毒(HPV)持续感染密切相关。HPV种类繁多，与生殖道黏膜感染相关者至少有30余种，妇女感染率高达80%［5］，但大多数能够自然清除，少数持续感染。鳞癌是常见的病理类型，其次是腺癌，但近年腺癌发生率逐年上升［6］。过早性行为、过多性伴侣、吸烟、长期服用避孕药以及免疫系统的抑制和缺陷都是宫颈癌的高危发病因素。肿瘤血管生成指的是肿瘤内新生长形成的血管，包括微血管前期到毛细血管形成新血管结构［7］。癌细胞生长到1～2 mm的球状结构时，需要更多营养物质并排出废物，若缺乏血供，则无法继续生长。因此，肿瘤的新生血管可以供肿瘤营养和气体交换等［8］。近年来，诸多临床研究认为［9］，肿瘤的新生血管还是癌变进展、浸润渐深和肿瘤转移的关键因素。肿瘤通过释放血管生成刺激因子诱导新生血管，如VEGF、碱性成纤维细胞生长因子和血小板内皮细胞生长因子(PDECGF)等。

VEGF是一组分泌型糖蛋白，VEGF－C是其中重要一员。VEGF－C也是一种重要的致淋巴管生长因子，主要表达于心脏、小肠、卵巢和胎盘中。无论是在病理组织还是正常组织中，VEGF－C均是新血管生成的主要调节因子，并通过与其受体的结合发挥生物学效应。目前，VEGF－C在宫颈癌中表达的研究较少且无一致结论。但对其它系统肿瘤的研究发现，VEGF－C在肿瘤组织中的阳性表达率升高，且与淋巴结转移密切相关［10］。说明转染了VEGF－C的肿瘤组织生长迅速，且容易形成比正常组织更多的血管异种移植体。

我院纳入60例老年宫颈癌患者，检测组织和血清中VEGF－C的表达。结果发现，宫颈癌淋巴转移组组织VEGF－C阳性表达率最高，吸光度最高，血清中VEGF－C浓度最高，其次为宫颈癌非淋巴转移组和CIN对照组，正常对照组最低，组间差异均具有统计学意义(P均＜0．05)。提示随着宫颈疾病的发生发展，VEGF－C表达逐步增强，尤其是盆腔淋巴转移宫颈癌患者组织和血清中VEGF－C高表达，说明其在术前对宫颈癌是否发生淋巴转移具有重要预测价值。这与国内相关研究结果一致［11］。VEGF－C参与宫颈癌淋巴转移的机制复杂，VEGF－C具有提高肿瘤细胞黏附力并激活淋巴管内皮细胞上受体的作用，从而实现较强趋化能力，使自身淋巴系统为肿瘤转移提供便利条件［12－13］。此外，通过Pearson相关性分析研究发现，组织和血清中的VEGF－C呈正相关，当无法检测组织中VEGF－C表达时，可相对方便地检测血清中VEGF－C浓度，临床价值一致。

综上所述，老年宫颈癌患者组织和血清中VEGFC均显著升高，且二者呈正相关性。

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Study of VEGF-C Expression Level in Tissues and Serum of elderly Patients with Cervical Cancer and Their Relevance

CHEN Yanjun，LI Yongfu．First People＇s Hospital of Jiulongpo，Chongqing，404100

ObjectiveTo study the VEGF－C expression in tissues and serum of elderly patients with cervical cancer and their relevance．Methods60 elderly patients with cervical cancer were chosen as research objects，including 30 cases with lymphatic metastasis and 30 cases without lymphatic metastasis．30 elderly patients with CIN and 30 elderly healthy patients were chosen as the control group．SP method was adopted to detect expression of VEGF－C in tissues，and ELISA method was adopted to detect VEGF concentration in serum．Pearson relevance analysis was adopted to study the relevance of VEGF－C in tissues and serum．ResultsPositive expression rate of VEGF－C in cervical cancer tissues with lymphatic metastasis was 93．3%(28/30)，absorbancy was(32865．4±5927．4)，and serum VEGF－C level was(13845．2±1228．6)pg/ml which was the highest，secondly was cervical cancer without lymphatic metastasis and CIN control group，and healthy control group was the lowest(all P＜0．05)．There was positive relevance between VEGF－C in tissues and serum，and the correlation index was γ=0．723．ConclusionVEGF－C in tissues and serum of elderly patients with cervical cancer both rise obviously and they are positively related．

Tissue;Cervical cancer;Serum;VEGF－C;Relevance

10．3969/j．issn．1001－5930．2015．06．006

R737．33

:A

:1001－5930(2015)06－0812－03

2014－10－23

2015－01－20)

(编辑:甘艳)

404100重庆市九龙坡区第一人民医院