治疗手足癣中药处方优选试验＊

张 炜，马守江，时利民

海岛部队官兵训练、工作和生活条件艰苦，流行病学调查显示，部队官兵以风湿、痛风、手足癣、体癣、湿疹及日光性皮炎等皮肤病多发［1］。手足癣的诱发因素较多，疗程较长，因此容易复发而难以治愈，治疗该病以水杨酸、咪唑、激素等化学药物为主。作者针对海岛部队官兵的常见病——手足癣及湿疹，在经验治疗的基础上，设计纯中药处方并深入研究。

根据中医药理论和传统验方，笔者选取了土荆皮、蛇床子、黄柏、苦参、徐长卿5味药进行组方筛选。土荆皮具有祛风除湿、杀虫止痒的功效，用于治疗癣症［2，3］。蛇床子燥湿祛风、杀虫止痒。黄柏清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮。苦参清热燥湿、杀虫、利尿。徐长卿祛风、化湿、止痛、止痒［4］。中药复方的药效是各药味综合作用的结果，各药味对药效的贡献是非独立的，随着复方中各药味的取舍、药量的加减，药效的变化是非线性的。笔者将以上药味进行正交设计，以体外抗霉菌试验、小鼠耳肿胀试验为考察指标，对处方进行优化，结果如下。

1 实验材料

1.1 供试品溶液的制备 土荆皮粉碎，用95%乙醇浸泡7天，滤除药材，水浴回收乙醇，徐长卿、蛇床子、黄柏、苦参药材以10倍量水浸泡0.5 h，煎煮2次，1 h／次，合并煎液滤过，与提取的土荆皮溶液混合，混合液浓缩至浓度为4 g（生药）／ml，分装至玻璃瓶中，贴标签，密封，流通蒸汽灭菌，备用。上述药材均由安徽亳州德昌药业提供。

1.2 仪器与试剂 培养箱：电热恒温培养两用箱，型号HWB－2。电子天平：梅特勒－托利多，型号ABB5－S。二甲苯：分析纯（烟台市双双化工有限公司），批号：111015。地塞米松注射液：辰欣药业有限公司，批号：11121020。

1.3 霉菌培养基 孟加拉红培养基（北京陆桥技术有限责任公司，批号：110218）根据药典方法制备（称取36.6 g培养基于1 L蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌）。

1.4 菌株 须癣毛癣菌、红色毛癣菌均由107医院检验科从非特异性足癣患者足部皮肤中分离，经全军微生物实验中心主任陈世平教授鉴定，实验均采用第二代纯培养菌株。

1.5 实验动物 KM小鼠，由烟台绿叶制药有限公司动物实验中心提供，SPF级，［SCXK （鲁）2009 0009］。

1.6 统计学处理方法 采用组间显著性检验处理数据，与阴性对照组相比，用SPSS17.0软件进行显著性分析。

2 方 法

2.1 因素－水平设计

表1 处方组成表

2.2 体外抗菌试验 分别取处方组成项下的复方提取液各1 ml，置培养皿中，加入刚制备未凝固的霉菌培养基15 ml，混匀，待凝固后，取菌点样，在每个培养基中均匀接种5个点，将培养基置培养箱内培养5～7 d，观察菌落生长情况并计数。

2.3 小鼠耳肿胀试验 雄性小鼠80只，体重18～22 g，随机分成16组，每组5只，用不同配比的中药复方提取液涂抹小鼠右耳前后两面，每鼠0.5 ml，0.5 h后再涂抹1次，阴性对照组涂抹生理盐水，阳性对照组涂抹浓度为0.25 mg／ml的地塞米松，剂量同上，0.5 h后在受试耳涂抹100%二甲苯0.2 ml，0.5 h后将小鼠颈椎脱臼致死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径8 mm打孔器分别在左右两耳相同部位打下圆耳片，用电子天平称重。每鼠两耳片之差与左耳片重量之比即为耳肿胀度。

3 结 果

体外抗菌试验、小鼠耳肿胀试验结果见表2，各个观测指标影响因素主次顺序及最优处方组合见表3。

表2 不同组方的复方提取液体外抗霉菌试验、小鼠耳肿胀试验结果

表3 影响因素主次顺序及最优处方组合

由表2、3可见，在体外抗菌试验及小鼠耳肿胀试验中，因素D、E对结果影响均最大，因素A对结果影响最小。

综合上述试验的最优组合，可知B2D3E2水平互相重叠。对于因素A，因其对X、Y这2个指标的影响均最低，方差分析时均以A为误差计算，因此在处方中将A因素删除。对于因素C，其对X的影响大于Y，在手足癣的治疗中，以抗霉菌作用为主，以消肿作用为辅，因此在本试验中将C因素选择为C4水平。

通过上述综合分析，可得最优处方为B2C4D3E2，即蛇床子30 g、黄柏20 g、土荆皮10 g、苦参10 g。

4 讨 论

蛇床子燥湿祛风、杀虫止痒，为君药；土荆皮、黄柏、苦参共为臣药。

现代药理研究表明，土荆皮含土荆甲酸、土荆乙酸等多种新二萜酸及白桦脂酸等三萜类成分，尚含鞣质及挥发油等［5］，对多种致病真菌有杀灭作用。蛇床子含挥发油，油中主要成分为蒎烯、莰烯、异戊酸龙脑酯、异龙脑等，尚含蛇床子素等香豆精类成分，有杀灭阴道滴虫作用，对金黄色葡萄球菌、耐药性金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及真菌有抑制作用［6，7］。黄柏主要含小檗碱及少量木兰碱、黄柏碱、掌叶防己碱等，尚含内酯等成分［8］，煎剂、水浸剂于体外对多种致病性皮肤真菌有抑杀作用。苦参主要含多种生物碱，其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱等30余种［9］，尚含苦参醇等黄酮类、醌类及三萜皂苷等，煎剂、醇提物以及所含的多种成分对阴道滴虫、鞭毛虫有一定的抑制作用，对多种致炎剂所引起的炎症反应有明显抑制作用，氧化苦参碱还具有抗过敏作用［10］。上述药物联合应用，对手足部真菌感染以及由感染引起的炎症有良好的治疗作用。

［1］赵河通，李 元，苏永华，等.海岛官兵常见皮肤病的中药外治法［J］.西南军医，2012，14（1）：85－87.

［2］ 宋永锋，陈 虹，李灵芝.土槿皮研究进展［J］.天津药学，2001，13（6）：9－10.

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［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：295.

［5］冯苏秀，郭洪祝，刘 鹏，等.土荆皮化学成分研究［J］.中草药，2008，39（1）：10－12.

［6］王添生，吴艳萍，郭结敏.蛇床子止痒有效成分的研究［J］.南方医科大学学报，2009，29（12）：2567－2568.

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［8］胡俊青，胡 晓.黄柏化学成分和药理作用的现代研究［J］.当代医学，2009，15（7）：139－141.

［9］顾关云，肖年生，蒋 昱.苦参的化学成分、生物活性和药理作用［J］.现代药物与临床，2009，24（5）：265－271.

［10］杨钰萍，沈祥春.氧化苦参碱药理作用的研究进展［J］.中国医院药学杂志，2009，29（05）：405－407.