白细胞相关指标在白血病筛查和鉴别中的应用评价

许青，祝洪涛，徐卫益

(1、浙江大学医学院附属第一医院检验科 浙江 杭州310003;2、温州医学院 浙江 温州325000)

外周血细胞形态学观察一直被认为是细胞形态学检验的金标准[1]，但其对操作者细胞形态学观察水平有较高的要求，当血片中观察到一定比例的异常细胞时，有时较难区分是髓系还是淋系。血细胞形态学与血细胞分析仪已联合应用于白血病检验[2,3]，随着血液分析仪分析技术的不断提高，一些新的参数不断应用于临床[4]。Sysmex XE-2100血细胞分析仪利用流式细胞和核酸荧光染色技术进行白细胞分类，利用IMI通道中特殊溶血剂溶解成熟和幼稚淋巴细胞，通过射频和直流电计数IG和髓系幼稚细胞。已经有IG应用于炎症观察的相关报道[5,6]，但通过结合IG、幼稚细胞计数、白细胞分类散点图来进行白血病筛查和初步分类还未见详细报道。

1 材料与方法

1.1一般资料 选取2014年1月至4月来院就诊的门诊及住院白血病初发患者55例，其中AML 30例，其中男性21例，女性9例，平均年龄 39.0岁；CML 10例，其中男性7例，女性3例，平均年龄40.3岁；ALL 15例，男性8例，女性7例，平均年龄38.0岁。所有患者均最终经骨髓细胞形态学和免疫组化分析确诊。

1.2 仪器与试剂 日本Sysmex XE-2100全自动血液分析仪，原装配套系列试剂；Sysmex SP-1000i全自动推片机，原装配套系列试剂。

1.3 实验方法 2mlEDTA-K2抗凝血标本，用Sysmex XE-2100血细胞分析仪进行细胞计数，记录WBC、IG#、IG%、幼稚细胞数并观察白细胞分类散点图；制备血涂片(BASO染液)干燥后用油镜观察血片，进行细胞分类计数。抽取患者骨髓进行细胞形态学观察和免疫组化分析。

1.4 统计学方法 用SPSS16.0软件处理测试数据。经卡方检验，数据呈非正态分布，因此，结果用百分位数表示，作箱图进行组间比较。

2 结果

2.1 AML、CML和ALL患者外周血白细胞各指标测试结果 AML患者幼稚细胞百分比、IG%明显增高，WBC正常或中度升高；CML患者WBC、IG%、IG#明显增高，但幼稚细胞增高不明显；ALL患者WBC明显增高、幼稚细胞百分比轻度增高、IG%、IG#一般不增高，结果见表1、图1。

表1 AML、CML和ALL患者外周血白细胞各指标测试结果

图1 AML、CML和ALL患者外周血白细胞WBC、IG%、幼稚细胞%三项指标测试结果

2.2 白细胞分类散点图 各组均有特征性改变，表现为细胞相应区域散点分布异常，AML患者白细胞异常散点区域比ALL组大且往右，CML组具有特征性的散点图，主要为细胞数量增多，粒系幼稚以下细胞各阶段细胞均有出现，且以成熟粒细胞为主，嗜酸细胞散点明显增多，在BASO通道表现为嗜碱性粒细胞散点增多。在IMI通道AML和CML检测到较多的未成熟粒细胞和原始细胞，ALL仅检测到很少的未成熟粒细胞和/或原始细胞，见图2。

图2 白细胞分类散点图

2.3 外周血涂片镜检观察 在AML组和ALL组均见到较高比例的幼稚细胞，CML组见到一定比例的幼稚细胞，IG明显增高，嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞明显增多，与散点图相对应，见图3。

图3 各组患者外周血涂片细胞形态观察(瑞姬染色，×1000)

3 讨论

Sysmex XE-2100血细胞分析仪IMI检测通道利用射频、电阻抗和细胞化学染色法原理，计数经溶血剂处理(幼稚细胞与硫化氨基酸结合量多于较成熟细胞，并且对溶血剂有抵抗作用)的细胞悬液中的幼稚细胞，可定量分析不同类型的幼稚细胞，包括造血祖细胞(HPC)、原始细胞、异型/异常淋巴细胞、未成熟粒细胞[7]。Fernandes B等利用显微镜镜检、流式细胞计数与XE-2100血细胞分析仪检测203例不同疾病(急慢性炎症、恶性肿瘤、败血症等)的IG细胞数，认为血细胞分析仪IG计数可替代手工显微镜镜检计数，且有很好的准确性和重复性[8]。

AML患者外周血血细胞可出现数量不等的原始细胞和未成熟粒细胞，表现为IG计数绝对和/或相对增高，由于细胞总数增高不明显，因此，相对值更有意义，散点图显示粒细胞区域范围变大，白细胞无法正常分类计数。CML患者由于外周血细胞各阶段粒细胞明显增多，IG计数绝对和相对增高，散点图出现粒细胞区域散点变多变密，且散点向右上方延伸，表示未成熟、幼稚粒细胞明显增多，嗜酸、嗜碱性粒细胞散点增多，与王霄霞等报道的血细胞分析仪CML特征性散点图描述相符[9]。ALL患者外周血细胞主要以原始或幼稚淋巴细胞为主，因此，IG计数绝对和/或相对仅轻度增高或正常，散点图出现淋巴细胞区域散点往右上方延伸，表示未成熟淋巴细胞增多，但其中有6例患者幼稚细胞计数仅轻度增高，与血片镜检结果不成比例，分析原因可能为IMI通道溶血剂对原始、幼稚淋巴细胞有一定的破坏作用，需在今后的实验中继续观察。

因此，初诊患者外周血细胞分析仪出现异常分类散点图时，对血液病往往有筛查或辅助诊断价值[10,11]，应分析白细胞数是否明显增高，有无特征性散点图，其次，分析IG%和幼稚细胞百分比。有白细胞数明显增高，CML特征性散点图，应当考虑是CML；有白细胞数轻度增高，IG%增高，散点图粒细胞区域范围变大，无法分类，应当考虑AML；有白细胞数中度增高，IG%正常或轻度增高，散点图出现淋巴细胞区域散点往右上方延伸，应考虑ALL。研究发现，白细胞相关指标的综合分析对白血病筛查和鉴别有重要的应用价值。

但有时一些特殊病例可能没有明显的规律，亦存在血细胞分析仪对外周血幼稚细胞漏检的情况[12]，还需结合血片镜检一起考虑。血涂片检查在白血病诊断中有重要意义，较多血液病的细胞形态学改变，血涂片优于骨髓片[13,14]，一些血液病的定义和诊断也是以外周血细胞异常为主要依据的[15]。另外，本次研究只是在利用血液分析仪已有的一些定量参数客观分析，对血液病进行筛查，给血片镜检细胞分类某些方向性指导，明确诊断还需进一步检查。

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